一例雞葡萄球菌病的診治報告

孟凡亮，高繼鋒

吉林省農(nóng)安縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊，吉林農(nóng)安 130200

雞葡萄球菌病是由金黃色葡萄球菌引起的一種重要的雞的急性或慢性細(xì)菌性傳染病。該病一年四季均可發(fā)生，是目前危害我國養(yǎng)雞業(yè)最常見的細(xì)菌性傳染病之一。隨著我國養(yǎng)雞業(yè)的集約化、規(guī)?；l(fā)展，該病的發(fā)生呈現(xiàn)出不斷上升的趨勢。由于該病的病原-金黃色葡萄球菌在自然界廣泛分布，一旦雞體免疫機(jī)能下降或養(yǎng)殖環(huán)境較差時容易導(dǎo)致該病的發(fā)生，給養(yǎng)殖場帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失。現(xiàn)將一例雞葡萄球菌病的診治情況報告如下。

1 發(fā)病情況和臨床癥狀

我縣某養(yǎng)雞場飼養(yǎng)蛋雞6 000只，45日齡的蛋雞突然發(fā)病，病雞臨床表現(xiàn)為精神萎靡、食欲不振、縮頭呆立、嗜睡、羽毛蓬亂沒有光澤，部分雞只發(fā)生下痢，排出黃綠色糞便；同時病雞胸部、腹部以及大腿內(nèi)側(cè)皮膚呈青紫色并伴有皮下水腫，有血樣滲出液，嚴(yán)重的病雞發(fā)病后2～3 d死亡，病死雞只達(dá)40余只。

2 剖檢變化

病死雞經(jīng)剖檢后，胸、腹部皮下可見出血、充血，肌肉組織有出血斑，心包內(nèi)有渾濁滲出液，呈黃紅色，肝臟嚴(yán)重腫大，表面可見點狀白色壞死灶，脾臟腫大充血，有大小不一的壞死灶。

3 實驗室診斷

3.1 細(xì)菌分離及鏡檢

實驗室無菌操作取病死雞的肝臟、脾臟以及心包液，接種于胰蛋白胨大豆肉湯瓊脂培養(yǎng)基（TSA），置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20 h后觀察結(jié)果，在TSA瓊脂培養(yǎng)基上可見邊緣整齊、光滑濕潤的黃白色菌落。取上述培養(yǎng)基上的單菌落進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢，可見圓形、成對或成典型的葡萄串狀排列的革蘭氏陽性球菌。

3.2 生化試驗

取分離純化的菌株接種細(xì)菌微量生化反應(yīng)管，置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)反應(yīng)24 h后觀察結(jié)果，結(jié)果顯示該分離株能夠分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖、甘露醇，產(chǎn)酸但不產(chǎn)氣，凝固酶和觸酶試驗均為陽性。根據(jù)生化試驗結(jié)果對照《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊》發(fā)現(xiàn)，該分離菌的生化特性與金黃色葡萄球菌的相符合。

3.3 PCR菌種鑒定

為了進(jìn)一步鑒定該分離菌，利用16S rRNA測序的方法對分離菌株的種屬進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定。通過水煮法提取分離菌株的基因組制備PCR反應(yīng)模板，利用16S通用引物[27F(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’)和1492R(5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’)]進(jìn)行PCR擴(kuò)增，成功獲得預(yù)期大小的DNA片段，對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行膠回收處理以及Sanger測序分析。測序數(shù)據(jù)良好，無套峰，成功獲得分離菌的16S rRNA核苷酸序列。利用NBCI數(shù)據(jù)庫中的BLAST在線工具對獲得的核苷酸序列進(jìn)行對比分析，結(jié)果顯示該分離菌株16S rRNA序列與數(shù)據(jù)庫中金黃色葡萄球菌的對應(yīng)序列相似度高達(dá)100%，可以確定該分離菌株為金黃色葡萄球菌，與鏡檢和生化試驗的結(jié)果相一致。

3.4 藥敏試驗

采用K-B紙片法對分離鑒定的金黃色葡萄球菌進(jìn)行藥敏試驗，參照美國CLSI標(biāo)準(zhǔn)對藥敏結(jié)果進(jìn)行判讀，結(jié)果顯示，該株金黃色葡萄球菌對恩諾沙星、慶大霉素、多西環(huán)素、氨芐西林敏感，對大觀霉素、鏈霉素、青霉素、阿莫西林、頭孢他啶、四環(huán)素、克林霉素、氟苯尼考、紅霉素呈現(xiàn)不同程度耐藥。

4 診斷

綜合發(fā)病情況、臨床表現(xiàn)、剖檢變化以及實驗室檢驗結(jié)果可以判斷該養(yǎng)殖場的雞群發(fā)生了由金黃色葡萄球菌引起的葡萄球菌病。

5 治療

首先對病死雞采取無害化處理，對發(fā)病雞只進(jìn)行隔離，并對雞舍進(jìn)行全面清掃消毒。根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，對病雞選用恩諾沙星添加至飲水中，用量為50 mg/L，連用3～5 d。同時，飲水中適量的補(bǔ)充電解多維。用藥治療5 d后，發(fā)病雞群狀態(tài)顯著好轉(zhuǎn)，采食、飲水恢復(fù)正常。

6 小結(jié)

雞葡萄球菌病是目前養(yǎng)雞業(yè)中較為常見的細(xì)菌性疾病，作為條件性疾病，該病的發(fā)生與養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)管理水平與雞群的飼養(yǎng)環(huán)境密切相關(guān)。養(yǎng)殖人員應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，對雞舍進(jìn)行及時的清理，保持雞舍環(huán)境衛(wèi)生，經(jīng)常通風(fēng)換氣，保持雞舍干燥，控制雞群飼養(yǎng)密度，減少環(huán)境應(yīng)激。此外，為預(yù)防該病的發(fā)生，雞群可以按照合理的免疫程序適時進(jìn)行疫苗免疫接種，接種葡萄球菌多價滅活疫苗，對該病的發(fā)生具有一定的預(yù)防效果。吉