精油中CBD 含量的HPLC 分析方法研究

賀 凱 華 薇 李 東

（淮陰工學(xué)院化工學(xué)院，江蘇 淮安223001）

1 概述

大麻二酚(CBD)是一種主要的植物大麻素，主要來源于大麻，占大麻提取物的40%，是大麻主要的非精神活性成分，可與體內(nèi)內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的多種生理靶點(diǎn)結(jié)合，具有抗驚厥、鎮(zhèn)靜、催眠、抗焦慮、抗精神病、抗炎和神經(jīng)保護(hù)的性能[1]。CBD 在治療癲癇、多種癌癥、多發(fā)性動(dòng)脈硬化與帕金森病、預(yù)防心肌梗死、抑制神 經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和抑制性激素分泌等具有一定療效。研究表明，CBD 能阻礙四氫大麻酚對(duì)人體神經(jīng)系統(tǒng)的作用，由于這一特性CBD 已被FDA 批準(zhǔn)用于治療難治性癲癇[2]。

2 實(shí)驗(yàn)部分

準(zhǔn)確稱取CBD 對(duì)照品10mg，乙腈溶解并定容至10 mL，得1 mg/mL CBD 標(biāo)準(zhǔn)溶液，再準(zhǔn)確移取1 mL 至10 mL 容量瓶中，乙腈定容，得100 μg/mL 的CBD 標(biāo)準(zhǔn)溶液，并逐級(jí)以乙腈稀釋，得到濃度為1、5、10、20、50 μg/mL 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

稱取一定質(zhì)量的化妝品精油于10 mL 容量瓶中，加入四氫呋喃溶解并定容至10 mL，經(jīng)0.22μm 濾膜過濾后，進(jìn)行HPLC 分析。

儀器為Waters 2695 高液相色譜儀（2996 PDA 檢測器），SHIMADZU WondaCract ODS-2 色譜柱（250×4.6 mm，5μm），流動(dòng)相乙腈：水=70:30（V/V）流速1 mL/min，柱溫30℃，進(jìn)樣量20 μL。

3 結(jié)果與討論

3.1 CBD 紫外吸收曲線

對(duì)照品溶液進(jìn)行HPLC 分析，結(jié)果見圖1、圖2。

圖1 CBD 標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC 色譜圖

圖2 CBD 紫外吸收曲線

分析結(jié)果顯示CBD 在240 nm 以下紫外吸收強(qiáng)度很弱，為了提高檢測的靈敏度，選擇220 nm 作為檢測波長。

3.2 線性實(shí)驗(yàn)

對(duì)1～100 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行HPLC 分析，以峰面積對(duì)濃度作圖，結(jié)果見圖3。結(jié)果顯示在1～100μg/mL 范圍內(nèi)工作曲線線性良好，R＞0.9999。

表1 不同濃度范圍標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積

圖3 CBD 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

3.3 精密度實(shí)驗(yàn)

配置6 個(gè)平行樣品來準(zhǔn)確考量方法的精密度，結(jié)果見表2。

表2 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明分析的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）小于0.5%，說明方法的穩(wěn)定性高，重復(fù)性好。

圖4 樣品的HPLC 色譜圖

3.4 回收率實(shí)驗(yàn)

移取一定量的樣品溶液（本底值為24.61μg/mL），分別加入一定體積的CBD 標(biāo)準(zhǔn)品溶液，混勻后進(jìn)行HPLC 分析，計(jì)算CBD 的回收率，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示方法的回收率為99.3%～101.4%，說明本方法的回收率較好。

表3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了針對(duì)化妝品精油中大麻二酚的HPLC 分析方法。結(jié)果表明在1～100 μg/mL 范圍內(nèi)具有良好的線性，R＞0.9999，加標(biāo)回收率在99.3～101.4%，相對(duì)偏差（RSD）小于0.5%，本方法可滿足對(duì)含CBD 成分的化妝品精油中大麻二酚含量的準(zhǔn)確測定。