李夢桐 王楠 瑪依拉·吐爾地別克

摘要：基于我國藥用食用真菌羊肚菌種植現(xiàn)狀、栽培關(guān)鍵技術(shù)以及富硒控制技術(shù)等方面的最新研究進(jìn)展，著重介紹栽培技術(shù)上如分類及其生活史、生長因素（營養(yǎng)生長與環(huán)境條件）、菌種選育、培養(yǎng)基配方、發(fā)酵技術(shù)、外源營養(yǎng)袋技術(shù)、人工栽培（室內(nèi)栽培和室外栽培）、病蟲害發(fā)生、防治技術(shù)措施等以及富硒控制技術(shù)的相關(guān)研究，并對羊肚菌人工栽培及富硒控制技術(shù)等進(jìn)行歸納總結(jié)，為藥用食用真菌羊肚菌高效優(yōu)質(zhì)栽培提供參考依據(jù)，并對今后強(qiáng)化藥食用真菌羊肚菌標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化栽培，以及富硒控制技術(shù)及其產(chǎn)品開發(fā)提出合理化建議。

關(guān)鍵詞：藥用食用真菌;羊肚菌;人工栽培;富硒;控制技術(shù)

羊肚菌（Morchella spp.）屬子囊菌亞門（Ascomycotina）盤菌綱（Discomycetes）盤菌目（Pezizales）羊肚菌科（Morchellaceae）羊肚菌屬（Morchella），別稱羊雀菌、羊肚蘑、麻子菌、羊肚子或包谷菌，其外形多為尖頂或圓頂，菌柄長3～8 cm、粗2～4 cm，平滑、中空，基部膨大，呈白色;菌蓋為布滿凹陷、棱脊的網(wǎng)狀體，因形似羊肚得名[1]。羊肚菌有肉質(zhì)鮮嫩、獨到風(fēng)味、滋味鮮美的子實體，含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、礦物質(zhì)、酚類化合物、多種維生素和抗氧化劑等有益物質(zhì)，是珍稀的食用藥用真菌[2-3]。此外，羊肚菌中含有多種藥用成分、纖維素酶及γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶等活性成分，具有抗菌、抗病毒、抑制血小板聚集及黑色素形成等特性[4-9]。食用羊肚菌具有助消化、化痰理氣、補腎壯陽、補腦提神、降血脂、調(diào)節(jié)免疫、抗疲勞和抗腫瘤等多重功效[1]。

全世界不少國家和地區(qū)均分布有羊肚菌，較廣泛分布的國家如法國、德國、美國、中國和印度，少量分布的如前蘇聯(lián)、捷克斯洛伐克、墨西哥、瑞典、西班牙和巴基斯坦局部地區(qū)[10]。我國有28個?。ㄖ陛犑小⒆灾螀^(qū)）分布有羊肚菌，北起黑龍江，南到廣東、福建、臺灣，西起新疆、西藏，東到山東[11]。20世紀(jì)末美國率先實現(xiàn)羊肚菌工廠化生產(chǎn)[12]。我國于20世紀(jì)70年代開始對人工栽培羊肚菌技術(shù)進(jìn)行研究，先后對羊肚菌仿生栽培、菌材仿生栽培、菌根化栽培和林下仿生栽培等技術(shù)進(jìn)行深入研究[13-16]，隨著菌種馴化、補料等技術(shù)的不斷優(yōu)化改進(jìn)，其人工栽培技術(shù)得到較快推廣應(yīng)用[17]。目前我國羊肚菌主栽品種為梯棱羊肚菌（M. importuna）和六妹羊肚菌（M. sextelata）等[18-19];其人工集約化栽培已由我國四川、云南等地擴(kuò)展至20多個省（直轄市、自治區(qū)）;2017年我國羊肚菌栽培面積已超過 4 600 hm2，鮮菇平均產(chǎn)量約達(dá) 100 kg/667 m2，全年收獲量近7 000 t[11，20]。但是由于氣候、營養(yǎng)、管理等諸多方面存在差異，實際生產(chǎn)時會出現(xiàn)各種問題，如產(chǎn)量時高時低、風(fēng)險較大和效益不明顯等，會制約羊肚菌規(guī)模化、工廠化生產(chǎn)。

硒有“抗癌之王”的美稱，相關(guān)試驗結(jié)果證明食用菌對硒的富集具有差異性，且其營養(yǎng)成分可通過富硒得到改善，如何應(yīng)用食用菌發(fā)酵技術(shù)培育富硒農(nóng)產(chǎn)品，開發(fā)有機(jī)硒制品已經(jīng)成為新的研究熱門問題[21-22]。本研究主要對羊肚菌人工栽培及富硒控制技術(shù)最新研究進(jìn)展進(jìn)行歸納總結(jié)，以期為其高效、優(yōu)質(zhì)、富硒栽培提供參考依據(jù)，并對今后進(jìn)一步優(yōu)化羊肚菌栽培、富硒控制及其產(chǎn)品開發(fā)提出合理化建議與對策。

1 栽培研究進(jìn)展

1.1 分類及羊肚菌生活史

目前黃色羊肚菌類群（Esculenta Clade）、黑色羊肚菌類群（Elata Clade）和變紅羊肚菌類群（Rufubrunnea Clade）的69個羊肚菌發(fā)育學(xué)種被確立[18，23-24]。杜習(xí)慧等通過對我國和其他國家發(fā)現(xiàn)的各種羊肚菌標(biāo)本進(jìn)行對比和系統(tǒng)發(fā)育分析，得出我國有30個羊肚菌系統(tǒng)發(fā)育學(xué)種，屬于2個分支：黃色羊肚菌類群（17個）和黑色羊肚菌類群（13個）[25-26]。

精確描述羊肚菌的生活史較困難，因為羊肚菌的營養(yǎng)型因環(huán)境條件的不同而不同，有腐生型、菌根型或者二者兼之，變化范圍比較大[27]。Alvarado等提出當(dāng)羊肚菌的子囊果成熟后，每個子囊會有8個子囊孢子產(chǎn)生，之后子囊孢子可以萌發(fā)形成初級菌絲，在逆境下初級菌絲可能會形成分生孢子或菌核[28];不同的子囊孢子形成單核菌絲后相互接合形成異核菌絲或次級菌絲，次級菌絲會扭結(jié)形成菌核，隨之產(chǎn)生厚垣孢子和粉孢子;粉孢子在人工栽培中容易產(chǎn)生，而在自然條件下基本上不能形成[29]。當(dāng)用適當(dāng)?shù)耐獠凯h(huán)境刺激時，羊肚菌的菌核可以形成營養(yǎng)菌絲和產(chǎn)囊絲，產(chǎn)囊絲可以扭結(jié)成細(xì)長形的原基，原基繼續(xù)發(fā)育形成子囊果，在菌絲到子實體形成的整個過程中，菌核的形成必不可少[30-31]。

1.2 生長因素

1.2.1 營養(yǎng)生長 森林腐殖質(zhì)土和黑土等比較適宜羊肚菌發(fā)生，其土壤質(zhì)地主要以沙壤土等為宜，羊肚菌較多生長在森林植被、雜草稀疏和土壤潮濕的區(qū)域[32-34]。羊肚菌能夠利用15種碳源、27種氮源，但不同的碳源、氮源培養(yǎng)基對其菌絲生長有顯著影響;試驗表明，最適宜羊肚菌發(fā)育的碳源、氮源分別為可溶性淀粉和尿素，對復(fù)合氮源、氨基酸和銨鹽的利用效果較差[35]。努爾古麗·阿布都熱合曼的研究也表明，最適宜新疆羊肚菌菌絲和原基生長的碳源依次為蔗糖、葡萄糖和甘油，氮源依次為硝酸鉀、硝酸銨和硫酸銨[36]。李書蘭研究表明，葡萄糖和硝酸鉀對提高菌株含孢量效果顯著，淀粉和蛋白胨可以顯著提高孢子萌發(fā)率[37]。無機(jī)鹽、維生素與植物生長調(diào)節(jié)劑會對羊肚菌菌絲生長造成一定的影響，其中能促進(jìn)羊肚菌菌絲正常生長的有MnSO4、2，4-二氯苯氧乙酸或吲哚乙酸;對羊肚菌菌絲起明顯抑制作用的有赤霉素;作用不明顯的是6-芐氨基腺嘌呤[35]。此外，與羊肚菌菌絲相互扭結(jié)形成子實體的伴生菌有很強(qiáng)的分散纖維素、木質(zhì)素的能力，試驗表明覆土有利于菌絲生長發(fā)育[38]。

1.2.2 環(huán)境條件 通過試驗發(fā)現(xiàn)，不同羊肚菌適宜的溫度、pH值和水分等條件不同。不同條件下同株羊肚菌的菌絲形態(tài)、顏色等也存在差異，這2種現(xiàn)象展現(xiàn)了羊肚菌復(fù)雜多樣的生理特征[39]。羊肚菌菌絲體生長的最適溫度為15～18 ℃，孢子萌發(fā)溫度為18～22 ℃，子實體發(fā)生初期日平均氣溫為6.5～9.3 ℃、盛產(chǎn)期為 10.1～14.4 ℃、末期為15.8～177 ℃，晝夜溫差大促進(jìn)子實體的形成[40-42]。李書蘭研究表明，以15 ℃為培養(yǎng)溫度時菌株的含孢量提高最明顯，但在15 ℃培養(yǎng)時孢子萌發(fā)率會受到明顯抑制[37]。菌株的孢子生成和萌發(fā)不適宜在偏堿性條件下進(jìn)行。孢子的活孢率和萌發(fā)率在逆境下明顯下降，相比對照組有顯著差異。羊肚菌原基形成時期和子實體生長、發(fā)育時期都需要大量水分（80～90mm降水量）和>5 ℃有效積溫≥390～420 ℃[43];菌絲生長時期對空氣不敏感，子實體生長、發(fā)育時期對空氣比較敏感，含氧量過低不會出菇。其他種類食用菌基本一致，羊肚菌生長最適宜pH值為6.0～6.5[44]。在人工栽培羊肚菌時適宜用含水量在63%左右的培養(yǎng)料，子實體生長最佳空氣相對濕度應(yīng)維持在 85%～95%。羊肚菌營養(yǎng)生長階段不需要光照，但子實體形成階段需要光照，一般生長于半陰半陽或七分陰、三分陽等相似環(huán)境，有利于其生長[41-42，45-46]。

1.3 菌種選育

食用菌育種目標(biāo)不僅要提高產(chǎn)量、改良品質(zhì)、增加抗逆性，還要改進(jìn)商品外形、改變栽培溫型和提高某些活性成分含量等[47]。目前羊肚菌純種大都選用孢子分離、基內(nèi)菌絲分離或組織分離等方式進(jìn)行分離，其中孢子分離的方式最安全有效[48]。目前羊肚菌人工栽培中使用的優(yōu)質(zhì)菌種多由2種方式提供：野生菌株分離培養(yǎng)與人工馴化栽培[49-50]，少數(shù)由其孢子自交或雜交培育提供[51];也可采用人為控制下的常規(guī)選育技術(shù)根據(jù)其單孢和多孢均具有出菇特性進(jìn)行多孢雜交選育優(yōu)良品種[18]。國內(nèi)外已馴化出菇的羊肚菌屬物種有9種：變紅羊肚菌（M. rufobrunnea）、小羊肚菌（M. deliciosa）、黑脈羊肚菌（M. angusticeps）、黑脈羊肚菌（M. esculenta）、粗柄羊肚菌（M. crassipes）、尖頂羊肚菌（M. conica）、六妹羊肚菌、梯棱羊肚菌和七妹羊肚菌（M. septimelata）[19，30，52-56]。我國主栽品種屬于黑色羊肚菌支系，以梯棱羊肚菌和六妹羊肚菌為主[19，55]。目前，關(guān)于羊肚菌原生質(zhì)體技術(shù)方面的研究多數(shù)停滯在制備與再生環(huán)節(jié)[57-58]。劉士旺等通過原生質(zhì)體誘變技術(shù)，獲得了高生物量、高氨基酸含量的尖頂羊肚菌突變株[58]。劉偉等首次全方位系統(tǒng)使用內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)分析（ITS）和隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）分子標(biāo)記技術(shù)，鑒別我國羊肚菌栽培菌株的種性并證明了RAPD分子標(biāo)記轉(zhuǎn)化為菌株特征性擴(kuò)增區(qū)域（SCAR）標(biāo)記的可行性[59]。

羊肚菌生產(chǎn)菌種的退化、老化是目前羊肚菌人工栽培面臨的重要問題，與其他食用菌相比羊肚菌菌株退化現(xiàn)象相對嚴(yán)重，每年給生產(chǎn)者造成了大量損失。劉偉等研究顯示，菌種退化主要受其遺傳、細(xì)胞學(xué)、生理學(xué)和環(huán)境因素等決定，羊肚菌的多核現(xiàn)象、快速生長能力和菌絲細(xì)胞之間的頻繁融合現(xiàn)象可能是加劇其菌種退化的重要原因[18]。也有研究發(fā)現(xiàn)普通黑脈羊肚菌部分子囊孢子萌發(fā)菌絲體存在生長停滯現(xiàn)象[60]。He等將不同菌株的高羊肚菌（M. elata）接種在CYM培養(yǎng)基上進(jìn)行 1 400～2 250 h 連續(xù)繼代培養(yǎng)，菌株出現(xiàn)不可逆轉(zhuǎn)的老化死亡現(xiàn)象，菌絲發(fā)育不良、生長速度減緩，菌核形成能力喪失;粗柄羊肚菌、梯棱羊肚菌和六妹羊肚菌也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象;在麥粒、木屑、土壤栽培種培養(yǎng)基連續(xù)傳代培養(yǎng)中也會發(fā)生[61]。有相關(guān)報道稱在草原羊肚菌（M. steppicola）和粗柄羊肚菌的菌絲生長與發(fā)育過程中，會產(chǎn)生明顯的氧化應(yīng)激，適當(dāng)?shù)难趸瘧?yīng)激能促進(jìn)菌核的發(fā)生，過度則會導(dǎo)致核酸、蛋白質(zhì)和脂肪等生物分子受到損傷，誘導(dǎo)一系列控制和監(jiān)督系統(tǒng)損傷，影響老化過程[62-63]。

1.4 培養(yǎng)基配方

李書蘭研究得出了羊肚菌菌株孢子生成的最適培養(yǎng)基的配方（可溶性淀粉含量2%、葡萄糖含量2%、蛋白胨含量1%、KH2PO4含量 0.5%、MgSO4含量 0.5%、CaCO3含量 05%、NaCl含量 0.5%、FeSO4含量 0.01%、瓊脂含量2%，最適pH值為70）[37]。其常用的馴化母種培養(yǎng)基有馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基和改良型PDA培養(yǎng)基等[64]。吳韶菊等確定了羊肚菌母種批量生產(chǎn)的玉米粉培養(yǎng)基最佳配方（玉米粉 20 g、蛋白胨1 g、磷酸氫二鉀 1 g、硫酸鎂 0.5 g、瓊脂 20 g和水1 000 mL）[65]。我國各地羊肚菌原種培養(yǎng)基有很大差異，主要原因是各地的原種栽培料（農(nóng)產(chǎn)品下腳料）配方不同導(dǎo)致[66]。高新樓等研究顯示，原種培養(yǎng)基配方為木屑含量70%、小麥含量10%、腐殖土含量10%、麥麩含量8%、石膏含量1%、過磷酸鈣含量1%[64]。其他的羊肚菌原種栽培種培養(yǎng)基配方如櫟木屑 39 kg、棉籽殼38 kg、麥麩20 kg、砂糖1 kg、石膏 1 kg等[16，67]。萬濤等研究栽培種培養(yǎng)料原料配比，通過試驗篩選出2種高效培養(yǎng)料，其主要原料是小麥、木屑、麥麩、谷殼[68]。羊肚菌栽培種培養(yǎng)基配方也有研究報道：棉殼含量75%、麩皮含量20%、石膏含量1%、石灰含量1%和腐殖土含量3%[16，67];小麥含量34%、腐殖土含量10%、木屑含量55%、石膏粉含量1%[64]。李書蘭也篩選出優(yōu)良羊肚菌菌株的最適栽培種培養(yǎng)基的配方（木屑含量65%、麩皮含量20%、松針粉含量10%、蔗糖含量1%、石膏含量1%、KH2PO4含量0.1%、維生素B1含量 10 mg/kg、新鮮蒜苗浸出液的料液比1 g ∶ 1 mL）[37]。劉偉等報道其外源營養(yǎng)袋配方：小麥80～120 g、谷殼40 g（或木屑 40 g 和谷殼 20 g或玉米芯40 g和谷殼 20 g）、腐殖質(zhì)土20～40 g、生石灰1%～1.5%、石膏2%和KH2PO4 15‰[56]。外源營養(yǎng)袋的配方也不同，相關(guān)研究顯示，其營養(yǎng)袋配方為小麥含量30%、木屑含量30%、稻殼含量27%、腐殖土含量10%、石膏含量2%、生石灰含量1%、KH2PO4含量1‰、含水量60%～65%[64]。

1.5 發(fā)酵技術(shù)

一些野生食用菌如羊肚菌、牛肝菌等雖還不能人工栽培，但均可采用液體發(fā)酵法來生產(chǎn)菌絲體[69]。由于固體培養(yǎng)基培養(yǎng)羊肚菌的培育條件復(fù)雜，使用液體培養(yǎng)基發(fā)酵更有利于不斷優(yōu)化發(fā)酵條件，從而有利于擴(kuò)大規(guī)模化培育并降低輸出成本[70]。李書蘭通過試驗顯示，液體發(fā)酵制得的菌劑平均含孢量均低于固體平板培養(yǎng)，野生孢子粉的含孢量更高[37]。野生孢子粉的萌發(fā)率也高于羊肚菌子實體干粉和液體培養(yǎng)基發(fā)酵產(chǎn)生的菌絲體凍干產(chǎn)物;平板培養(yǎng)制得菌劑的萌發(fā)率低于液體發(fā)酵，但兩者萌發(fā)率都介于子實體干粉及菌絲體干粉和野生孢子粉之間。

李曉明等利用往復(fù)式水浴恒溫振蕩器搖瓶試驗，篩選出最適合羊肚菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方、通氣量、培養(yǎng)時間、溫度、pH值等基本條件，并且利用微生物培養(yǎng)器通過分批發(fā)酵的方法，發(fā)現(xiàn)了羊肚菌液體發(fā)酵的基本規(guī)律[71]。季向陽等優(yōu)化了羊肚菌發(fā)酵培養(yǎng)的基本條件，通過L9（34） 正交設(shè)計法確定了初始pH值為6.0、接種量為10%、裝液量為 100 mL/300 mL 三角瓶、旋轉(zhuǎn)頻率為140 r/min、25 ℃ 恒溫培養(yǎng)120 h是其液體發(fā)酵的最佳條件[72]。張旺璧等通過羊肚菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基試驗，得到最優(yōu)培養(yǎng)基配方：玉米粉30 g/L、黃豆粉 20 g/L、葡萄糖10 g/L、酵母粉5 g/L、磷酸二氫鉀和硫酸鎂適量[73]。任愛梅等通過5種不同成分的羊肚菌培養(yǎng)基試驗，發(fā)現(xiàn)在綜合PDA培養(yǎng)基上羊肚菌菌絲生長速度最快且菌核數(shù)量最多[74]。在生產(chǎn)中使用麥麩酵母膏液體培養(yǎng)基、麥麩大豆粉液體培養(yǎng)基培養(yǎng)羊肚菌可縮短制種周期[75]。王瑩在培養(yǎng)羊肚菌菌絲體時應(yīng)用深層發(fā)酵技術(shù)，繪制出菌株在發(fā)酵罐中的生長曲線，最終確定了合適的放罐時間約為發(fā)酵120 h;并優(yōu)化了液體種子培養(yǎng)參數(shù)和發(fā)酵培養(yǎng)基參數(shù)，建立了生長動力學(xué)模型[76]。

1.6 外源營養(yǎng)袋補料技術(shù)

Ower等多次指出先使用水化處理后培養(yǎng)的菌核或液體發(fā)酵培養(yǎng)的營養(yǎng)菌絲體進(jìn)行播種，再直接控制水分進(jìn)行催菇，可以實現(xiàn)成功出菇，而其曾提出的羊肚菌人工栽培過程中外源營養(yǎng)物補充的問題，該技術(shù)在栽培中的決定性作用在其發(fā)表的專利中并沒有著重體現(xiàn)[77-79]。劉偉等于2005年前后根據(jù)Ower等關(guān)于外源營養(yǎng)物的研究報道，發(fā)現(xiàn)了羊肚菌人工栽培中的外源營養(yǎng)袋營養(yǎng)供給理論，最終發(fā)展成為現(xiàn)在的外源營養(yǎng)袋補料技術(shù)[18，80]。近年來我國先后公開了較多有關(guān)或近似于外源營養(yǎng)袋技術(shù)及配方的專利技術(shù)[81-90]。使用外源營養(yǎng)袋為羊肚菌提供外部營養(yǎng)物，使羊肚菌馴化栽培的商業(yè)化成為必然，是人工栽培羊肚菌研究歷史上的新發(fā)展[17]。近年來外源營養(yǎng)袋的形式和使用方法越來越便捷、有效[80]，由生產(chǎn)前期的大袋（規(guī)格：15 cm×45 cm、22 cm×45 cm）改為現(xiàn)在規(guī)?；褂玫男〈ㄒ?guī)格：12 cm×24 cm），放置數(shù)量為 1 600～1 800袋/667 m2;由立放改為平擺，操作明顯便利，菌絲長滿袋的時間明顯縮短，營養(yǎng)轉(zhuǎn)化效率更高[56]。

1.7 人工栽培技術(shù)

目前研究羊肚菌栽培的系統(tǒng)有M. esculenta和M. angusticeps，這2種系統(tǒng)均包括室內(nèi)自然栽培和室外自然栽培[9]。羊肚菌人工栽培的常規(guī)方法有3種：廣口瓶法、無土出菇法及外源營養(yǎng)袋法[27]。Ower等發(fā)明了廣口瓶法[30，77，91]，Ower等還發(fā)明了另一種栽培方法即外源營養(yǎng)袋法[78]。Masaphy報道了一種羊肚菌無土出菇法栽培變紅羊肚菌[53]。Amir等為了探明栽培中羊肚菌菌核與菌絲中營養(yǎng)成分的關(guān)系，選用分割平板法來代替?zhèn)鹘y(tǒng)的廣口瓶法，最終確定了羊肚菌營養(yǎng)轉(zhuǎn)運機(jī)制[92-93]。

1.7.1 室內(nèi)栽培 Ower于1989年首次報道羊肚菌成功在室內(nèi)栽培[79]。世界上第1家羊肚菌栽培工廠是1994年由Terry Farms Inc.建成的，名為Diversified Natural Products，Inc.（DNP），這家美國公司于2005年宣布羊肚菌在室內(nèi)栽培成功，并應(yīng)用公司專利實現(xiàn)了每周生產(chǎn)變紅羊肚菌3 000磅[94]。我國室內(nèi)栽培羊肚菌雖然也已經(jīng)取得成功，但尚未實現(xiàn)羊肚菌大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)[95]。

1.7.2 室外栽培 我國羊肚菌人工栽培主產(chǎn)區(qū)中選用大田栽培模式的有云南、四川、湖北等地，選用溫室大棚栽培模式的有河北、北京、東北等地[64]。我國羊肚菌人工栽培過程按時間順序依次為貧營養(yǎng)基質(zhì)中菌絲生長時期、富營養(yǎng)基質(zhì)（營養(yǎng)袋）中菌絲生長時期、貧營養(yǎng)基質(zhì)中菌核形成時期與誘導(dǎo)菌核形成子實體時期，這4個時期區(qū)分明顯[27]。李天星等研究表明，羊肚菌大田栽培以大田無基料栽培為主，并對其關(guān)鍵技術(shù)如生長條件、品種選擇、菌種制作、栽培季節(jié)、栽培管理、病蟲害防治等進(jìn)行了總結(jié)，羊肚菌現(xiàn)已在我國西南地區(qū)均有種植[96-98]。廖明亮等采用合適的方法對土壤處理、播種、覆土覆膜、添加外源營養(yǎng)袋、水分和出菇管理等環(huán)節(jié)進(jìn)行了技術(shù)管理，實現(xiàn)了水稻和羊肚菌輪作栽培[99-100]。黃忠乾等詳盡介紹了成都平原地區(qū)與周邊丘陵地區(qū)羊肚菌栽培的林地條件、栽種季節(jié)、作畦、播種覆土、發(fā)菌期與出菇期管理和采收等關(guān)鍵技術(shù)要點[101]?？讓幹业葓蟮涝颇洗罄聿捎煤颂伊窒滦」芭镌耘嘌蚨蔷芯苛诉x地、栽培季節(jié)和菌種選擇、搭蔭棚、播種覆土、營養(yǎng)袋擺放及移走、覆膜、水分管理及采收等技術(shù)[102]。熊維全等總結(jié)了成都市花木林下套種羊肚菌關(guān)鍵技術(shù)[103]。葉平陽相關(guān)報道，福建省福安市果農(nóng)在葡萄樹進(jìn)入冬春落葉休眠期后，在空閑的葡萄大棚內(nèi)成功栽培出羊肚菌，并總結(jié)了在葡萄大棚中栽培羊肚菌的成功經(jīng)驗[104]。尚繼輝報道了羊肚菌和黃瓜循環(huán)高效輪作栽培相關(guān)技術(shù)，包括大棚建造、茬口安排等羊肚菌和黃瓜栽培關(guān)鍵技術(shù)[105]。我國北方部分地區(qū)羊肚菌設(shè)施化栽培、林地栽培也相繼得到示范與應(yīng)用[106-108]。張新燕等針對北方羊肚菌設(shè)施栽培技術(shù)的相關(guān)問題進(jìn)行分析，并得出完善，具體的羊肚菌設(shè)施栽培體系[109]。劉羊權(quán)在甘肅省舟曲縣采用反季節(jié)羊肚茵栽培技術(shù)進(jìn)行了示范種植[110]。馬慶芳等報道，寒區(qū)暖棚內(nèi)草菇與羊肚菌輪作可實現(xiàn)周年生產(chǎn)[111]。高原采用在小麥田內(nèi)套種羊肚菌，實現(xiàn)小麥和羊肚菌雙豐收[112]。

1.8 病蟲害發(fā)生與防治

羊肚菌栽培中常有細(xì)菌、霉菌和酵母菌等污染，以及大型真菌污染和蟲害等[66]。王永元等對甘肅省隴南市羊肚菌栽培中有害生物種類進(jìn)行調(diào)查分類，共計17種，并針對主要的有害生物提出合理意見，提供了農(nóng)業(yè)防治、物理防治和化學(xué)防治等思路[113]。劉偉等也報道了羊肚菌常見的病蟲害發(fā)病特點、發(fā)病原因、常見蟲害（如蝸牛、跳蟲、蛞蝓和蚊蠅等）、真菌性病害、細(xì)菌性病害（如紅體病和軟腐病等），并針對病蟲害提出了相關(guān)解決方法：播種前先進(jìn)行土壤的預(yù)處理，如添加石灰、曝曬、熏蒸、悶棚和水淹等;當(dāng)病蟲害發(fā)生時及時進(jìn)行有效防控，如誘捕和病原物隔離;最重要的措施是增強(qiáng)羊肚菌對病蟲害的抗性，通過了解其生長特點為羊肚菌創(chuàng)造最適宜生長發(fā)育的環(huán)境[114]。

2 富硒研究進(jìn)展

目前國內(nèi)外對富硒羊肚菌的研究較少，成果大都集中在液體發(fā)酵和產(chǎn)物提取方面。羊肚菌對硒元素有比較強(qiáng)的富集和轉(zhuǎn)化作用[115-116]。恩施富硒羊肚菌中總硒含量為50.56 μg/100 g，其中極易被人體吸收的有機(jī)硒含量占總硒含量的90%以上[117]。丁健峰等進(jìn)行富硒羊肚菌深層發(fā)酵時，用粗柄羊肚菌926號作發(fā)酵菌種，選擇亞硒酸鈉作為無機(jī)硒源，應(yīng)用響應(yīng)曲面法設(shè)計試驗，進(jìn)行深層發(fā)酵工藝及其參數(shù)優(yōu)化，得到富硒羊肚菌深層發(fā)酵工藝[115，118]。張躍非在裝液量為100 mL/250 mL，Na2SeO3質(zhì)量濃度為9 μg/mL，pH值為7.0（滅菌后）條件下，于24 ℃進(jìn)行液體發(fā)酵，得到富硒率1834%的菌絲體[119]。通過對比分析得出富硒條件下培養(yǎng)出的羊肚菌菌絲體中硒多糖的體外抗氧化作用比非富硒羊肚菌強(qiáng)[119-120]。冮潔等報道羊肚菌菌絲體具有較強(qiáng)的富硒能力，通過深層液體發(fā)酵優(yōu)化得到了適合的富硒條件為硒濃度10 mg/L、裝液量 100 mL/250 mL、pH值7. 0、溫度 25 ℃;使用優(yōu)化的條件進(jìn)行培養(yǎng)，最終菌絲體中硒含量達(dá) 0.13 mg/g，富硒率為9.10%，比更換培養(yǎng)條件前提高了5041%[121]。李娟使用液體培養(yǎng)的方法，以泰山羊肚菌為研究對象進(jìn)行硒元素富集與生物轉(zhuǎn)化研究，得到培養(yǎng)基中最適硒離子濃度為200 mg/kg，此時菌絲有機(jī)硒含量達(dá)到3 205.85 mg/kg，比對照高145倍[122]。孟超等應(yīng)用超聲波提取法提取羊肚菌菌絲中的硒多糖，通過正交試驗得到料液比、提取時間、乙醇濃度等，最終獲得了提取羊肚菌多糖的最適方案[123]。

3 展望

藥用食用真菌羊肚菌盡管在我國已實現(xiàn)規(guī)模化種植，但也存在著諸多問題，其高效優(yōu)質(zhì)綠色栽培技術(shù)有待進(jìn)一步集成與優(yōu)化;加之我國對富硒羊肚菌研究相對薄弱，還須進(jìn)一步深入研究，以其作為富硒載體，研究示范應(yīng)用富硒羊肚菌栽培控制技術(shù)，培養(yǎng)高質(zhì)量富硒產(chǎn)品，開發(fā)低成本的有機(jī)硒營養(yǎng)品已經(jīng)成為新的研究熱點問題。具體建議如下：

3.1 人工栽培方面

加強(qiáng)羊肚菌的菌種選育。深入開展羊肚菌菌種資源收集、分類、生物學(xué)性狀及其遺傳基礎(chǔ)等相關(guān)研究，明確其倍性和出菇等相關(guān)理論，采用人工馴化、人工栽培、單孢和多孢雜交等技術(shù)手段持續(xù)深入推進(jìn)羊肚菌常規(guī)育種，同時采用原生質(zhì)體育種、誘變育種等方法加強(qiáng)分子育種工作步伐，選育性狀表現(xiàn)良好、品質(zhì)優(yōu)良、產(chǎn)量高產(chǎn)的菌種適用于人工栽培。

進(jìn)一步優(yōu)化羊肚菌外源營養(yǎng)袋技術(shù)。在已有的基礎(chǔ)上進(jìn)一步完善與優(yōu)化外營養(yǎng)袋配方，向工廠化、自動化制作推進(jìn)，科學(xué)合理擺放使其更加高效發(fā)揮外源營養(yǎng)作用。

加強(qiáng)綠色羊肚菌病蟲草害綠色防控。堅持以“預(yù)防為主、綜合防治”為原則，以農(nóng)業(yè)、物理機(jī)械和生物防治為主，持續(xù)控制其有害生物發(fā)生與危害。在草害控制上采取播種前適期進(jìn)行土壤預(yù)處理或土壤封閉處理，避免除草劑殘留影響;在病蟲害控制上采用合理輪作倒茬、加石灰、曝曬、悶棚、合理灌水等措施，以及使用在綠色有機(jī)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中允許使用的生物農(nóng)藥如礦物源農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥和微生物源農(nóng)藥等進(jìn)行防控。

繼續(xù)推進(jìn)規(guī)?；⒓s化綠色人工栽培。在已有的基礎(chǔ)上，不斷集成配套不同區(qū)域不同適宜的羊肚菌規(guī)?；?、集約化人工栽培模式，形成地方農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，強(qiáng)化綠色標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。同時要不斷加強(qiáng)技術(shù)研究與創(chuàng)新，解決制約羊肚菌工廠自動化栽培關(guān)鍵技術(shù)，以點帶面，點面結(jié)合，不斷推進(jìn)羊肚菌栽培設(shè)施化、自動化、智能化、精細(xì)化和精準(zhǔn)化發(fā)展。

3.2 富硒控制方面

開展富硒羊肚菌菌種選育及營養(yǎng)有效性評價研究。考查國內(nèi)外羊肚菌不同菌種資源富硒能力的差異，通過馴化選育、遺傳改良、分子育種等手段選育富集硒能力較強(qiáng)的新菌種，用分子標(biāo)記技術(shù)對高硒新菌種進(jìn)行遺傳多樣性分析，為培育附加值高的羊肚菌高硒新菌種提供優(yōu)質(zhì)的菌種資源。

開展羊肚菌產(chǎn)品富硒吸收特征研究。分析羊肚菌無害化生產(chǎn)體系下，富硒土壤和缺硒土壤對內(nèi)源土壤硒和外源添加硒的吸收特性，包括硒形態(tài)以及定量吸收特征，為富硒土壤和硒肥施用提供技術(shù)參數(shù)。

開展硒肥控制性使用技術(shù)。主要針對缺硒土壤特別是我國北方地區(qū)缺硒土壤，研究通過栽培措施以及硒肥控制性施用等調(diào)節(jié)羊肚菌產(chǎn)品硒濃度，研究施用形態(tài)、施用時間、施用方式對于硒資源利用、產(chǎn)品質(zhì)量及產(chǎn)品硒濃度的影響機(jī)制和控制技術(shù)。

開展優(yōu)質(zhì)富硒保持與質(zhì)量控制關(guān)鍵技術(shù)研究與產(chǎn)品開發(fā)。對藥食用真菌富硒羊肚菌的有機(jī)硒測定、硒含量標(biāo)準(zhǔn)、產(chǎn)品質(zhì)量控制等方面進(jìn)行深入研究，形成規(guī)范化的優(yōu)質(zhì)富硒產(chǎn)品關(guān)鍵控制技術(shù)體系;加大富硒羊肚菌食品的開發(fā)，采用現(xiàn)代加工技術(shù)逐步促進(jìn)其產(chǎn)品多樣化、系列化發(fā)展，并對其富硒制品建立國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行行業(yè)規(guī)范，形成統(tǒng)一規(guī)范加以強(qiáng)化，促進(jìn)其產(chǎn)業(yè)化持續(xù)健康發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]趙 琪，康平德，戚淑威，等. 羊肚菌資源現(xiàn)狀及可持續(xù)利用對策[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2010，23（1）：266-269.

[2]何九軍，王 昱，王 瀚，等. 甘肅隴南野生羊肚菌的菌種資源及開發(fā)策略[J]. 甘肅高師學(xué)報，2011，16（5）：27-29.

[3]Tietel Z，Masaphy S. True morels （Morchella）-nutritional and phytochemical composition，health benefits and flavor：a review[J]. Critical Reviews in Food Science and Nutrition，2018，58（11）：1888-1901.

[4]Peretz A，Zabari L，Pastukh N，et al. In vitro antileishmanial activity of a black morel，Morchella importuna （Ascomycetes）[J]. International Journal of Medicinal Mushrooms，2018，22（1）：71-80.

[5]Lee S R，Roh H，Lee S，et al. Bioactivity-guided isolation and chemical characterization of antiproliferative constituents from morel mushroom （Morchella esculenta） in human lung adenocarcinoma cells[J]. Journal of Functional Foods，2018，40（1）：249-260.

[6]潘志福，蘭 瑛，張 松. 尖頂羊肚菌胞外多糖提取物抗氧化作用的研究[J]. 華南師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2011（2）：124-128.

[7]楊 芳，王新風(fēng)，翁 良，等. 兩種羊肚菌胞內(nèi)多糖體外抗氧化性[J]. 食品科學(xué)，2010，31（23）：76-78.

[8]張利平，陳 彥，王子堯，等. 羊肚菌胞外多糖免疫活性研究[J]. 中國食用菌，2009，28（3）：47-49.

[9]Barbara B，Avtar S A，Selim K. Characterization of lipoxygenase activity from a partially purified enzymic extract from Morchella esculenta[J]. Process Biochemistry，2000，36（1/2）：1-7.

[10]龍正海，秦 京. 羊肚菌的生態(tài)及分類學(xué)研究進(jìn)展[J]. 貴州科學(xué)，1993，11（3）：74-76.

[11]于冬梅，尤文忠，張 悅，等. 羊肚菌人工栽培研究進(jìn)展[J]. 遼寧林業(yè)科技，2018（2）：48-51.

[12]朱斗錫. 羊肚菌工廠化栽培技術(shù)的探討[J]. 浙江食用菌，2010，18（1）：43-44.

[13]趙 琪，徐中志，楊祝良，等. 羊肚菌仿生栽培關(guān)鍵技術(shù)研究初報[C]//中國藥物學(xué)會. 第八屆全國食用菌學(xué)術(shù)研討會暨新產(chǎn)品新技術(shù)交流會論文匯編，2007：360-363.

[14]趙 琪，徐中志，程遠(yuǎn)輝，等. 尖頂羊肚菌仿生栽培技術(shù)[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，22（6）：1690-1693.

[15]程遠(yuǎn)輝，趙 琪，楊祝良，等. 利用圓葉楊菌材栽培羊肚菌初報[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報，2009，25（21）：170-172.

[16]王 震，王春弘，蔡英麗，等. 羊肚菌人工栽培技術(shù)[J]. 中國食用菌，2016，35（4）：87-91.

[17]劉 偉，張 亞，蔡英麗. 我國羊肚菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀及趨勢[J]. 食藥用菌，2017，25（2）：77-83.

[18]劉 偉，張 亞，何培新. 羊肚菌生物學(xué)與栽培技術(shù)[M]. 長春：吉林科學(xué)技術(shù)出版社，2017.

[19]何培新，劉 偉，蔡英麗，等. 我國人工栽培和野生黑色羊肚菌的菌種鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 鄭州輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報（自然科學(xué)版），2015，30（3/4）：26-29.

[20]倪淑君，張海峰. 我國羊肚菌的產(chǎn)業(yè)發(fā)展[J]. 北方園藝，2019（2）：165-167.

[21]潘 慧. 增強(qiáng)食用菌對硒生物富集作用的探討[J]. 科技創(chuàng)業(yè)月刊，2004（9）：118-119.

[22]凌宏通，宋 斌，林群英，等. 富硒食用菌的研究進(jìn)展[J]. 微生物學(xué)雜志，2008，28（4）：78-84.

[23]Taskin H，Buyukalaca S，Dogan H H，et al. A multigene molecular phylogenetic assessment of true morels （Morchella） in Turkey[J]. Fungal Genetics Biology，2010，47（8）：672-682.

[24]Odonnell K，Ronney A P，Mills G L，et al. Phylogeny and historical biogeography of true morels （Morchella） reveals an early Cretaceous origin and high continental endemism and provincialism in the Holarctic[J]. Fungal Genetics Biology，2011，48（3）：252-265.

[25]杜習(xí)慧，趙 琪，楊祝良. 羊肚菌的多樣性、演化歷史及栽培研究進(jìn)展[J]. 菌物學(xué)報，2014，33（2）：183-197.

[26]Du X H，Zhao Q，ODonnell K，et al. Multigene molecular phylogenetics reveals true morels （Morchella） are especially species-rich in China[J]. Fungal Genetics and Biology，2012，49（6）：455-469.

[27]李 濤，劉文亮，張 廣，等. 羊肚菌栽培外源營養(yǎng)袋的研究進(jìn)展[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報，2018，34（26）：65-69.

[28]Alvarado C G，Mata G，Sangabriel C W. Understanding the life cycle of morels （Morchella spp. ） [J]. Revista Mexicana de Micología，2014，40（1）：47-50.

[29]Stamets P. Growing gourmet and medicinal mushrooms[M]. Berkeley：Ten Speed Press，2011.

[30]Ower R. Notes on the development of the morel ascocarp：Morchella esculenta[J]. Mycologia，1982，74（1）：142-144.

[31]Volk T J，Leonard T J. Cytology of the life-cycle of Morchella[J]. Mycological Research，1990，94（3）：99-406.

[32]張廣倫，肖正春，趙培忠. 新疆野生粗炳羊肚菌的化學(xué)成分分析[J]. 江蘇食用菌，1992（5）：21-22.

[33]蘭 進(jìn)，曹文芩，徐錦堂. 中國羊肚菌屬真菌資源[J]. 資源科學(xué)，1999，21（2）：56-61.

[34]王純利，努爾古麗. 新疆羊肚菌研究開發(fā)進(jìn)展及其前景[J]. 新疆農(nóng)業(yè)科技，2004（4）：39.

[35]朱永真，杜雙田，車 進(jìn)，等. 不同碳源及氮源對羊肚菌菌絲生長的影響[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2011，39（3）：113-118.

[36]努爾古麗·阿布都熱合曼. 新疆羊肚菌的生物學(xué)特性研究[D]. 烏魯木齊：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.

[37]李書蘭. 羊肚菌人工栽培中無性孢子菌劑的研究[D]. 西安：陜西師范大學(xué)，2012.

[38]陸 娜，王偉科，聞 靜. 野生羊肚菌培養(yǎng)研究初報[J]. 杭州農(nóng)業(yè)與科技，2008（5）：35-37.

[39]王秀云. 羊肚菌生物學(xué)特性的研究[J]. 食用菌，1998（1）：13-14.

[40]陳惠群，劉洪玉，楊 晉，等. 羊肚菌子實體生理特性研究（二）——菌絲發(fā)育成子實體的條件[J]. 食用菌，1997（2）：6-7.

[41]王 波. 羊肚菌人工栽培新技術(shù)[M]. 上海：上海科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2005.

[42]朱斗錫. 羊肚菌人工栽培研究進(jìn)展[J]. 中國食用菌，2008（4）：3-5.

[43]陳惠群，劉洪玉，楊 晉，等. 羊肚菌子實體生理特性研究（三）——氣候?qū)ρ蚨蔷訉嶓w發(fā)生的影響[J]. 食用菌，1997，（6）：2-3.

[44]劉洪玉，陳惠群，楊 晉，等. 羊肚菌子實體生理特性研究（一）——羊肚菌子實體形成的生境條件[J]. 食用菌，1996（5）：2-3.

[45]應(yīng)建新. 中國藥用真菌圖鑒[M]. 北京：北京科學(xué)出版社，1985.

[46]朱斗錫，何榮華.羊肚菌不同菌株生物學(xué)特性及優(yōu)良品種選育[J]. 中國食用菌，2008（6）：15-16，23.

[47]張金霞. 中國食用菌種學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011.

[48]楊 靜. 羊肚菌的人工栽培及育種[J]. 新農(nóng)民，2019（24）：59-60.

[49]韓 鵬，陳青君，賀國強(qiáng)，等. 2種野生羊肚菌分離、鑒定與菌絲培養(yǎng)條件[J]. 北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報，2018，33（1）：2-6.

[50]陳 影，唐 杰，彭衛(wèi)紅，等. 羊肚菌新品種‘川羊肚菌6號[J]. 園藝學(xué)報，2017，44（12）：2431-2432.

[51]王秀云. 羊肚菌的自交和雜交試驗初探[J]. 食用菌，2000（1）：9-10.

[52]Masaphy S. External ultrastructure of fruit body initiation in Morchella[J]. Mycological Research，2005，109（4）：508-512.

[53]Masaphy S. Biotechnology of morel mushrooms：successful fruiting body formation and development in a soilless system[J]. Biotechnology Letters，2010，32（10）：1523-1527.

[54]Pilz D，Mclain R，Alexander S，et al. Ecology and management of morels harvested from the forests of Western North America[M]. American：Diane Publishing，2007.

[55]王 波，鮮 靈. 人工栽培羊肚菌的鑒定[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2013，26（5）：1988-1991.

[56]劉 偉，蔡英麗，張 亞，等. 我國羊肚菌人工栽培快速發(fā)展的關(guān)鍵技術(shù)解析[J]. 食藥用菌，2018，26（3）：142-147.

[57]Moriguchi M，Kotegawa S. Preparation and regeneration of protoplasts from mycelia of Morchella esculenta[J]. Agricultural and Biological Chemistry，1985，49（9）：2791-2793.

[58]劉士旺，梁宗琦，劉愛英. 羊肚菌原生質(zhì)體誘變篩選高生物量高氨基酸含量菌株[J]. 菌物系統(tǒng)，1999，18（2）：168-171.

[59]劉 偉，蘭阿峰，張倩倩，等. 羊肚菌栽培菌株遺傳多樣性分析及種特異性RAPD-SCAR 標(biāo)記開發(fā)[J]. 菌物學(xué)報，2018，37（12）：1650-166.

[60]Hervey A，Bistis G，Leong I. Culture studies of single ascospore isolates of Morchella esculenta[J]. Mycologia，1978，70（6）：1269-1274.

[61]He P X，Cai Y L，Liu S M，et al. Morphological and ultrastructural examination of senescence in Morchella elata[J]. Micron，2015，78：79-84.

[62]Georgiou C D，Patosoukis N，Parapostolou L，et al. Sclerotial metamorphosis in filamentous fungi is induced by oxidative stress[J]. Integrative & Comparative Biology，2006，46（6）：691-712.

[63]何培新，劉 偉，蔡英麗，等. 氧化應(yīng)激對粗柄羊肚菌菌絲生長和菌核發(fā)生的影響[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，53（13）：3085-3089.

[64]高新樓，李 賓，田 芳，等. 鄭州地區(qū)羊肚菌林下栽培技術(shù)[J]. 農(nóng)業(yè)科技通訊，2019（12）：307-308.

[65]吳韻菊. 羊肚菌固體培養(yǎng)基的篩選[J]. 北方園藝，2009（6）：216-218.

[66]羊 晨，魏寶陽. 羊肚菌栽培技術(shù)及產(chǎn)業(yè)發(fā)展建議[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018（7）：122-126.

[67]戴玉淑，徐方杰，趙艷春. 羊肚菌的栽培技術(shù)[J]. 中國農(nóng)村小康科技，2008（3）：40-41.

[68]萬 濤，吳道軍. 羊肚菌人工培養(yǎng)料優(yōu)化及田間栽培管理技術(shù)研究[J]. 綠色科技，2018（3）：80-81.

[69]朱玉昌，周大寨，唐巧玉，等. 富硒野生食用菌液體培養(yǎng)條件初步優(yōu)化[J]. 中國釀造，2009，28（4）：61-64.

[70]豆 艷，楊 沖，孫麗嬌，等. 羊肚菌液體發(fā)酵研究進(jìn)展[J]. 青海草業(yè)，2017，26（4）：38-42.

[71]李曉明，趙嘉平，唐周斌. 羊肚菌液體發(fā)酵的研究[J]. 西北林學(xué)院學(xué)報，2004，19（3）：116-118.

[72]季向陽，羅孝坤. 羊肚菌液體培養(yǎng)條件的優(yōu)化[J]. 中國食用菌，2016，35（2）：21-23，27.

[73]張旺璧，薛 莉. 羊肚菌（Ydj0705）液體發(fā)酵工藝方法的研究[J]. 太原理工大學(xué)學(xué)報，2012，43（6）：660-664.

[74]任愛梅，李建宏，謝 放，等. 不同培養(yǎng)基對羊肚菌菌絲生長及菌核形成的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（11）：270-272.

[75]張 松. 羊肚菌液體菌種培養(yǎng)配方的研究[J]. 食用菌，1996（3）：15.

[76]王 瑩. 羊肚菌深層發(fā)酵及生長動力學(xué)研究[D]. 長春：吉林大學(xué)，2006.

[77]Ower R D，Gary L M，James A. Malachowski：Cultivation of Morchella：4，594，809[P]. 1986-06-17.

[78]Ower R D，Gary L M，James A. Malachowski：Cultivation of Morchella：4，757，640[P]. 1988-07-19.

[79]Ower R D，Gary L M，James A. Malachowski：Cultivation of Morchella：4，866，878[P]. 1989-09-19.

[80]譚方河. 羊肚菌人工栽培技術(shù)的歷史、現(xiàn)狀及前景[J]. 食藥用菌，2016，24（3）：140-144.

[81]陳萬鵬. 羊肚菌的仿生栽培方法：CN 101161051A [P]. 2008-04-16.

[82]陳 文，吳光順. 一種羊肚菌的栽培方法：CN 103202177A[P]. 2013-07-17.

[83]趙 琪，楊祝良. 梯棱羊肚菌的栽培方法：CN 103168622A[P]. 2013-06-26.

[84]石代勇. 一種羊肚菌培養(yǎng)料配方及營養(yǎng)包配方的制備方法：CN 103819281A[P]. 2014-05-28.

[85]羅興富. 一種羊肚菌專用營養(yǎng)包的配制方法：CN 104098373A[P]. 2014-10-15.

[86]秦小波，張國珍，時小東，等. 羊肚菌營養(yǎng)配方、營養(yǎng)袋及其制備方法與羊肚菌培養(yǎng)方法：CN 105191667A[P]. 2015-12-30.

[87]姜 鄰，羅孝貴，甘炳成，等. 一種促進(jìn)羊肚菌菌核形成的轉(zhuǎn)化袋及羊肚菌栽培方法：CN 105075668A[P]. 2015-11-25.

[88]羅金洲，郭 建，楊 燕，等. 一種尖頂羊肚菌的人工栽培方法：CN 104885786A[P]. 2015-09-09.

[89]蘭順明. 一種羊肚菌工廠化后補營養(yǎng)料栽培方法：CN 105009935A[P]. 2015-11-04.

[90]羅倩茹. 一種羊肚菌營養(yǎng)包的配制及栽培方法：CN 105237189A[P]. 2016-01-13.

[91]Volk T J，Leonard T J. Physiological and environmental studies of sclerotium formation and maturation in isolates of Morchella crassipes[J]. Applied & Environmental Microbiology，1989，55（12）：3095-3100.

[92]Amir R，Levanon D，Hadar Y，et al. Formation of sclerotia by Morchella esculenta：relationship between media composition and turgor potential in the mycelium[J]. Mycological Research，1992，96（11）：943-948.

[93]Amir R，Levanon D，Hadar Y，et al. Morphology and physiology of Morchella esculenta during sclerotial formation[J]. Mycological Research，1993，97（6）：683-689.

[94]趙永昌，柴紅梅，張小雷. 我國羊肚菌產(chǎn)業(yè)化的困境和前景[J]. 食藥用菌，2016，24（3）：133-139，154.

[95]朱斗錫，何榮華. 羊肚菌室內(nèi)栽培方法：200610076953[P]. 2006-04-12.

[96]李天星. 羊肚菌大田無基料栽培技術(shù)[J]. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技，2019，30（13）：82-83.

[97]彭鴻強(qiáng). 成都地區(qū)羊肚菌大田無基料栽培技術(shù)要點[J]. 南方農(nóng)業(yè)，2015，9（25）：13-14，17.

[98]耿新翠，郝 界，弋 淮，等. 西南地區(qū)羊肚菌無基料栽培技術(shù)[J]. 食用菌，2017，39（1）：46-47.

[99]廖明亮. 羊肚菌稻田栽培技術(shù)[J]. 江西農(nóng)業(yè)，2019（24）：22.

[100]何琳華，徐 蕊，嵇偉彬，等. 蘇南地區(qū)稻茬羊肚菌栽培關(guān)鍵技術(shù)[J]. 食用菌，2019，41（1）：54-55，58.

[101]黃忠乾，唐利民，鄧 玲，等. 林下羊肚菌高效栽培技術(shù)[J]. 四川農(nóng)業(yè)科技，2018（1）：24-25.

[102]孔寧忠，尹繼庭，蘇嗣杰，等. 大理州核桃林下栽培羊肚菌技術(shù)[J]. 食用菌，2019，41（3）：59-61.

[103]熊維全，曾先富，李昕竺. 花木林地套種羊肚菌栽培關(guān)鍵技術(shù)[J]. 中國食用菌，2017，36（5）：85～86.

[104]葉平陽. 葡萄大棚種植羊肚菌栽培技術(shù)[J]. 福建農(nóng)業(yè)科技，2018（3）：37-39.

[105]尚繼輝. 羊肚菌與黃瓜高效循環(huán)輪作栽培技術(shù)[J]. 農(nóng)業(yè)科技與信息，2018（17）：10-12.

[106]尹衛(wèi)東，張江萍，付麗嬌，等. 北方羊肚菌人工栽培技術(shù)[J]. 山西林業(yè)科技，2017，46（2）：49-50.

[107]張季軍，張 敏，肖千明，等. 遼寧地區(qū)羊肚菌日光溫室栽培技術(shù)[J]. 遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015（3）：92.

[108]索偉偉. 林下種植羊肚菌栽培技術(shù)[J]. 現(xiàn)代園藝，2015（9）：35.

[109]張新燕，劉海順，劉海光. 羊肚菌設(shè)施栽培技術(shù)探索與實踐[J]. 熱帶農(nóng)業(yè)工程，2019，43（5）：41-42.

[110]劉羊權(quán). 反季節(jié)羊肚菌栽培技術(shù)[J]. 農(nóng)業(yè)科技與信息，2018（16）：5-6.

[111]馬慶芳，張丕奇，張景東，等. 寒冷地區(qū)暖棚內(nèi)草菇和羊肚菌輪作栽培技術(shù)[J]. 食用菌，2019，41（6）：46-48.

[112]高 原. 小麥套種羊肚菌種植技術(shù)[J]. 中國農(nóng)業(yè)信息，2011（11）：28.

[113]王永元，李巖龍，楊 帆，等. 羊肚菌人工栽培出菇期蟲害調(diào)查[J]. 食藥用菌，2019，27（4）：278-282.

[114]劉 偉，蔡英麗，何培新，等. 羊肚菌栽培的病蟲害發(fā)生規(guī)律及防控措施[J]. 食用菌學(xué)報，2019，26（2）：128-134.

[115]丁健峰，孫永海，付天宇，等. 響應(yīng)曲面法優(yōu)化羊肚菌富硒深層發(fā)酵條件[J]. 吉林大學(xué)學(xué)報（工學(xué)版），2013，43（增刊）：557-563.

[116]黃春燕，張柏松，萬魯長，等. 食用菌富硒培養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，44（7）：81-87.

[117]南占東，于斌武，趙 靜，等. 恩施富硒羊肚菌中生物活性物質(zhì)研究[J]. 中國果菜，2019，39（4）：27-30.

[118]丁健峰. 羊肚菌富硒深層發(fā)酵工藝及產(chǎn)物功能性研究[D]. 長春：吉林大學(xué)，2014.

[119]張躍非. 探析羊肚菌菌絲體富硒培養(yǎng)條件優(yōu)化及其菌絲體硒多糖抗氧化活性[J]. 農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備，2018（7）：134，203.

[120]黃玲玲，蘇彩霞，張宗申，等. 硒、鋅元素對羊肚菌多糖抗氧化性的影響[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，2015，41（7）：122-125.

[121]冮 潔，麥海美，解 彬，等. 羊肚菌菌絲體富硒條件優(yōu)化及其硒多糖抗氧化活性研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，2016，42（9）：120-125.

[122]李 娟. 泰山羊肚菌液體培養(yǎng)條件優(yōu)化及富鐵、鋅、硒研究初探[D]. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

[123]孟 超，史洪艦，趙 靜，等. 富硒羊肚菌多糖提取工藝的研究[J]. 中國西部科技，2013，12（2）：83-84.袁艷文，劉 昭，趙立欣，等. 生物質(zhì)沼氣工程發(fā)展現(xiàn)狀分析[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，49（6）：28-33.