宋德武 王貴升 李玉杰 陳靜 馬慧玲 邢琳琳 徐聰

摘要：為了解山東省春季主要?jiǎng)游镆卟∶庖咝Ч?，采?6市2，939份血清樣品，針對(duì)禽流感、口蹄疫、小反芻獸疫等主要?jiǎng)游镆卟∶庖呖贵w進(jìn)行檢測(cè)分析。結(jié)果表明，三種動(dòng)物疫病免疫抗體合格率高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，口蹄疫免疫效果不同畜種、不同亞型間有差異，羊場(chǎng)O型口蹄疫免疫效果與小反芻獸疫免疫效果類(lèi)似，禽屠宰場(chǎng)禽流感免疫抗體水平低。

關(guān)鍵詞：山東；動(dòng)物疫??；抗體監(jiān)測(cè)

動(dòng)物疫病免疫工作是目前控制疫病發(fā)生最科學(xué)、最有效的措施，開(kāi)展免疫抗體監(jiān)測(cè)、及時(shí)了解動(dòng)物免疫效果對(duì)科學(xué)評(píng)估動(dòng)物疫病防控效果，并為政府科學(xué)制定動(dòng)物疫病預(yù)防控制規(guī)劃和預(yù)警提供依據(jù)具有十分重要的意義[1，2]。為掌握山東省禽流感、口蹄疫、小反芻獸疫等重大動(dòng)物疫病臨床免疫效果，為下一步做好重大動(dòng)物疫病科學(xué)防控工作提供參考，針對(duì)2020年春季山東省重大動(dòng)物疫病血清學(xué)抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè)分析如下。

1材料與方法

1.1樣品采集

2020年上半年，從每個(gè)市抽取1個(gè)農(nóng)業(yè)縣，每個(gè)農(nóng)業(yè)縣選擇牛、羊、豬、禽、水禽、家禽屠宰場(chǎng)進(jìn)行血清采樣，共采集了16個(gè)市98個(gè)場(chǎng)（戶）的血清樣品2，939份。

1.2檢測(cè)方法

按照《口蹄疫診斷技術(shù)》（GB/T 18935—2003）采用液相阻斷ELISA檢測(cè)O型和A型口蹄疫抗體；按照《小反芻獸疫診斷技術(shù)》（GB/T 27982—2011）采用ELSIA檢測(cè)小反芻獸疫抗體；按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936—2003）采用HI檢測(cè)高致病性禽流感抗體。

1.3檢測(cè)試劑

O型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒由中國(guó)農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)（批號(hào)：20191128133）；A型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒由中國(guó)農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)（批號(hào)：20190701134）；羊小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒由北京明日達(dá)科技發(fā)展有限責(zé)任公司生產(chǎn)（批號(hào)：20191011）；H5亞型禽流感（Re-11）、H5亞型禽流感（Re-12）、H7N9亞型禽流感抗原均由哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司生產(chǎn)（批號(hào)分別為：20191012、20191014、20190415）。

2結(jié)果與分析

2.1抗體水平檢測(cè)整體結(jié)果

檢測(cè)51個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)O型口蹄疫抗體樣品1，530份，合格樣品1，256份，43家場(chǎng)合格，抗體合格率為82.09%，場(chǎng)間免疫合格率為84.31%；檢測(cè)16個(gè)牛養(yǎng)殖場(chǎng)A型口蹄疫抗體樣品480份，合格樣品372份，合格場(chǎng)11家，抗體合格率為77.5%，場(chǎng)間免疫合格率為68.75%；檢測(cè)17個(gè)羊養(yǎng)殖場(chǎng)羊小反芻獸疫抗體樣品480份，合格樣品378份，合格場(chǎng)14家，抗體合格率為78.75%，場(chǎng)間免疫合格率為82.35%；檢測(cè)47家禽養(yǎng)殖場(chǎng)（屠宰場(chǎng)）血清樣品1，409份，H5亞型禽流感（Re-11）抗體合格率為77.33%（1，088/1，407），場(chǎng)間免疫合格率為76.59%（36/47），H5亞型禽流感（Re-12）抗體合格率為77.70%（1，094/1，408），場(chǎng)間免疫合格率為78.72%（37/47），H7N9亞型禽流感抗體合格率為77.77%（1，095/1，408），場(chǎng)間免疫合格率為76.59%（36/47）。

2.2不同畜種間O型口蹄疫抗體比較分析

檢測(cè)16家牛場(chǎng)480份牛血清，合格血清446份，合格場(chǎng)14家；檢測(cè)17家羊場(chǎng)480份羊血清，合格血清374份，合格場(chǎng)14家，2家羊場(chǎng)免疫抗體合格率為0；檢測(cè)18家豬場(chǎng)540份豬血清，合格血清446份，合格場(chǎng)15家，其中1家豬場(chǎng)免疫抗體合格率為0。O型口蹄疫免疫抗體樣品合格率：牛90.83%>豬82.59%>羊77.92%（374/480）；O型口蹄疫免疫抗體場(chǎng)間合格率：牛90.83%>豬82.59%>羊77.92%。

2.3相同牛場(chǎng)O型口蹄疫和A型口蹄疫抗體比較分析

檢測(cè)16家牛場(chǎng)480份牛血清，其中，O型口蹄疫抗體，樣品合格436份，場(chǎng)合格14家；A型口蹄疫抗體，樣品合格372份，場(chǎng)合格11家。不同亞型口蹄疫免疫抗體樣品合格率：O型口蹄疫90.83%>A型口蹄疫77.69%；不同亞型口蹄疫免疫抗體場(chǎng)間合格率：O型口蹄疫87.5%>A型口蹄疫68.75%。

2.4相同羊場(chǎng)O型口蹄疫和小反芻獸疫抗體比較分析

17家羊場(chǎng)O型口蹄疫和小反芻獸疫抗體樣品合格率：O型口蹄疫77.92%（374/480），小反芻獸疫78.75%（378/480），兩者相近；17家羊場(chǎng)O型口蹄疫和小反芻獸疫抗體場(chǎng)間合格率：O型口蹄疫82.35%（14/17），小反芻獸疫82.35%（14/17），兩者相同，其中兩家羊場(chǎng)O型口蹄疫和小反芻獸疫樣品抗體合格率均為0。利用Excel中CORREL函數(shù)計(jì)算17家羊場(chǎng)小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率相關(guān)性，結(jié)果為0.696。

2.5禽流感抗體分析

對(duì)32家禽養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行分析，H5亞型禽流感（re-11）抗體樣品合格率為93.73%（897/957），場(chǎng)間合格率為93.75%（30/32）；H5亞型禽流感（re-12）抗體樣品合格率為92.48%（886/958），場(chǎng)間合格率為93.75%（30/32）；H7N9亞型禽流感抗體樣品合格率為93.63%（897/958），場(chǎng)間合格率為93.75%（30/32）。對(duì)15家禽屠宰場(chǎng)進(jìn)行分析，H5亞型禽流感（re-11）抗體樣品合格率為42.44%（191/450），場(chǎng)間合格率為40%（6/15）；H5亞型禽流感（re-12）抗體樣品合格率為46.22%（208/450），場(chǎng)間合格率為46.67%（7/15）；H7N9亞型禽流感抗體樣品合格率為44%（198/450），場(chǎng)間合格率為40%（6/16）。利用Excel中CORREL函數(shù)計(jì)算32家禽養(yǎng)殖場(chǎng)H5亞型禽流感兩種毒株免疫抗體合格率相關(guān)性，結(jié)果為0.997。

3討論

3.1主要?jiǎng)游镆卟∶庖呖贵w水平整體合格

根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2020年監(jiān)測(cè)計(jì)劃，口蹄疫、小反芻獸疫、禽流感免疫抗體合格率≥70%為免疫合格要求。春季對(duì)全省98家養(yǎng)殖場(chǎng)（屠宰場(chǎng)）監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，O型口蹄疫、A型口蹄疫、羊小反芻獸疫、H5亞型禽流感（Re-11）、H5亞型禽流感（Re-12）、H7N9亞型禽流感平均抗體合格率分別為82.09%、78.75%、78.75%、77.33%、77.70%、77.77%，均符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部監(jiān)測(cè)計(jì)劃規(guī)定要求，表明全省春季集中免疫工作達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。

3.2不同畜種、不同亞型口蹄疫免疫效果有差異

牛、羊、豬O型口蹄疫免疫抗體合格率均符合國(guó)家規(guī)定要求，其中牛O型口蹄疫免疫效果最好，羊O型口蹄疫免疫效果最差，可能因免疫疫苗及免疫程序不同造成免疫效果差異，同時(shí)場(chǎng)間免疫合格率與抗體平均合格率成正相關(guān)，且有兩個(gè)羊場(chǎng)抗體合格率為0，不排除因個(gè)別場(chǎng)免疫失敗影響平均抗體合格率。16家牛場(chǎng)O型口蹄疫免疫效果明顯優(yōu)于A型口蹄疫，都采用口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗免疫，免疫程序一致，可能是牛對(duì)二價(jià)疫苗中O型免疫應(yīng)答要優(yōu)于A型，應(yīng)進(jìn)一步優(yōu)化二價(jià)滅活苗免疫效果[3]。

3.3免疫是否規(guī)范顯著影響羊場(chǎng)免疫效果

17家羊場(chǎng)小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率相近，場(chǎng)間合格率一致，17家羊場(chǎng)小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率相關(guān)系數(shù)為0.696，中度相關(guān)，且2家羊場(chǎng)小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率均為零，說(shuō)明羊場(chǎng)各種疫苗的整體免疫效果依賴(lài)于羊場(chǎng)免疫是否規(guī)范，應(yīng)進(jìn)一步提高免疫密度和質(zhì)量。

3.4禽養(yǎng)殖場(chǎng)不同亞型、不同毒株禽流感免疫效果基本一致

32家禽養(yǎng)殖場(chǎng)H5亞型禽流感（Re-11）、H5亞型禽流感（Re-12）、H7N9亞型禽流感平均抗體合格率分別為93.73%、92.48%、93.63%，十分相近，且32家禽養(yǎng)殖場(chǎng)H5亞型禽流感（Re-11）與H7N9亞型禽流感抗體不合格場(chǎng)完全一致，H5亞型禽流感兩種毒株免疫抗體合格率相關(guān)系數(shù)為0.997，說(shuō)明雞和鴨對(duì)不同亞型、不同毒株禽流感免疫應(yīng)答差異很小，由于數(shù)據(jù)有限，可能結(jié)果存在片面性，需進(jìn)一步論證。

3.5肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)禽流感免疫效果不理想

禽屠宰場(chǎng)禽流感免疫抗體合格率和場(chǎng)間合格率都不足50%，通過(guò)采樣單調(diào)查，雞養(yǎng)殖場(chǎng)均為蛋雞場(chǎng)，鴨養(yǎng)殖場(chǎng)為肉鴨場(chǎng)，15家禽屠宰場(chǎng)有12家為雞屠宰場(chǎng)。蛋雞場(chǎng)飼養(yǎng)周期長(zhǎng)、免疫次數(shù)多，免疫保護(hù)水平一直維持較高水平[4]；肉鴨養(yǎng)殖場(chǎng)一般免疫一次，存在免疫不合格場(chǎng)，但整體免疫合格率在70%以上，與鴨屠宰場(chǎng)抗體免疫合格率相吻合，表明鴨養(yǎng)殖場(chǎng)整體免疫合格，可以提供整體免疫保護(hù)；12家肉雞屠宰場(chǎng)中有8家免疫抗體不合格，且抗體合格率為零，表明肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)的免疫密度和質(zhì)量十分不好，需引起重視，進(jìn)一步關(guān)注疫情暴發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。█

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