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      全株玉米青貯、小麥秸稈、苜蓿干草組合的體外消化特性及組合效應(yīng)研究

      2021-06-05 02:59:02張?jiān)獞c張丹丹王棟才孫銳鋒
      關(guān)鍵詞:粗飼料產(chǎn)氣干草

      程 景 張?jiān)獞c 張丹丹 李 博 靳 光 王棟才 徐 芳 孫銳鋒

      (山西農(nóng)業(yè)大學(xué)(山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,太原 030032)

      飼料原料間可產(chǎn)生組合效應(yīng),飼糧的表觀消化率并不簡(jiǎn)單是飼糧中各組分的表觀消化率的加權(quán)值總和。大量研究表明,飼料原料在飼糧體系中存在廣泛的正負(fù)組合效應(yīng)。盧德勛[1]指出,當(dāng)飼料原料間的互作使得飼糧中某種養(yǎng)分的采食量或者利用率高于各飼料原料的加權(quán)值時(shí)為正組合效應(yīng)。飼糧中粗飼料的來(lái)源、比例、利用率及組合效應(yīng)是當(dāng)下研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)[2]。應(yīng)通過(guò)飼糧組分的合理配比來(lái)控制飼料原料間的組合效應(yīng),盡量避免飼料原料間的負(fù)組合效應(yīng),最大限度地發(fā)揮正組合效應(yīng),以提高飼糧的綜合營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和利用率[3]。

      隨著反芻動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,粗飼料缺口日益增大,而隨著人們生活水平和動(dòng)物生產(chǎn)水平的提高,對(duì)粗飼料質(zhì)量的要求也隨之提高。小麥作為我國(guó)三大糧食作物之一,其秸稈數(shù)量龐大,但適口性差,可發(fā)酵碳水化合物含量低,作為粗飼料使用時(shí)消化率低[2]。苜蓿是公認(rèn)的優(yōu)質(zhì)粗飼料,但我國(guó)苜蓿產(chǎn)量不足,需大量進(jìn)口,且苜蓿價(jià)格居高不下。隨著“糧改飼”政策的推進(jìn),飼用玉米現(xiàn)在廣泛種植,其生產(chǎn)的全株玉米青貯已經(jīng)不再局限于奶牛,也逐步向肉牛推廣,成為反芻動(dòng)物生產(chǎn)中最重要的粗飼料來(lái)源。針對(duì)小麥秸稈高纖維、低蛋白質(zhì)的特性,配合使用苜蓿、全株玉米青貯等優(yōu)質(zhì)粗飼料可為瘤胃微生物提供足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),通過(guò)合理配比來(lái)充分激發(fā)粗飼料間的正組合效應(yīng),提高小麥秸稈的利用率[4-6],這既能最大限度發(fā)揮飼糧的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,又能緩解環(huán)境壓力,保證畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展,推進(jìn)我國(guó)發(fā)展節(jié)糧型畜牧業(yè)的進(jìn)程[7]。因此,本試驗(yàn)通過(guò)體外產(chǎn)氣法研究以不同比例組合的全株玉米青貯、小麥秸稈、苜蓿干草的肉牛瘤胃消化特性及組合效應(yīng),旨在探索小麥秸稈、全株玉米青貯、苜蓿干草的合理配比,為實(shí)際生產(chǎn)中肉牛飼糧中粗飼料的科學(xué)配制提供理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 試驗(yàn)材料

      全株玉米青貯、小麥秸稈和苜蓿干草均由朔州市朔城區(qū)雁園種牛養(yǎng)殖合作社提供,常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定結(jié)果見表1。

      表1 全株玉米青貯、小麥秸稈和苜蓿干草的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))

      1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

      采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì),將全株玉米青貯、小麥秸稈和苜蓿干草在風(fēng)干樣基礎(chǔ)上依照表2所設(shè)定的比例組成10種組合粗飼料,加上3種單獨(dú)的粗飼料,共計(jì)13種發(fā)酵底物。

      表2 各組粗飼料配比(風(fēng)干基礎(chǔ))

      1.3 瘤胃液供體動(dòng)物和飼養(yǎng)管理

      試驗(yàn)于2019年5月在山西省太原市山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所進(jìn)行。選擇4頭體況良好、體重(570.2±41.7) kg、安裝有永久性瘤胃瘺管的晉南牛閹牛作為瘤胃液供體動(dòng)物。供體牛所采食飼糧按照《肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》[8]配制,精粗比為40∶60,并按照山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所試驗(yàn)牛場(chǎng)日常飼養(yǎng)管理方式飼養(yǎng)。

      1.4 體外發(fā)酵試驗(yàn)

      人工瘤胃培養(yǎng)液配制和體外發(fā)酵試驗(yàn)參照Menke等[9]的方法執(zhí)行。稱取0.22 g發(fā)酵底物置于培養(yǎng)管底端,每個(gè)樣品5個(gè)重復(fù)。各培養(yǎng)管分別加入30 mL人工瘤胃培養(yǎng)液,將玻璃注射器內(nèi)空氣排盡,于39 ℃搖床連續(xù)培養(yǎng)72 h,試驗(yàn)共重復(fù)3個(gè)批次,每個(gè)批次設(shè)5個(gè)空白對(duì)照。

      1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

      1.5.1 常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

      各發(fā)酵底物、發(fā)酵后殘?jiān)某R?guī)營(yíng)養(yǎng)成分使用AOAC(2000)[10]所規(guī)定的方法測(cè)定干物質(zhì)(DM)、粗灰分(Ash)、粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)含量,采用Van Soest等[11]的方法測(cè)定中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)含量。

      1.5.2 產(chǎn)氣量(GP)及產(chǎn)氣參數(shù)

      記錄培養(yǎng)0、1、2、3、4、6、8、10、12、16、20、24、28、32、36、40、48、54、60、72 h時(shí)的產(chǎn)氣量。將各樣品在2、4、6、9、12、24、36、48 h時(shí)的產(chǎn)氣量代入產(chǎn)氣模型計(jì)算產(chǎn)氣參數(shù),產(chǎn)氣模型如下:

      GP=a+b(1-e-ct)。

      式中:t為發(fā)酵開始后某一時(shí)間(h);GP為發(fā)酵開始后某一時(shí)間的產(chǎn)氣量(mL);a為快速降解部分產(chǎn)氣量(mL);b為慢速降解部分產(chǎn)氣量(mL);c為b的產(chǎn)氣速率常數(shù)(%/h);a+b為潛在產(chǎn)氣量(mL)。

      1.5.3 體外發(fā)酵參數(shù)

      體外發(fā)酵72 h后,迅速放入冰水終止發(fā)酵,將發(fā)酵液導(dǎo)入離心管中,4 ℃、5 400 r/min離心15 min后提取上清。使用雷磁PHS3C型酸度計(jì)測(cè)定上清pH;參照馮宗慈等[12]方法測(cè)定上清中氨態(tài)氮(NH3-N)濃度;參照王加啟[13]的方法,使用Agilent-6890A型氣相色譜儀測(cè)定上清中揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度。發(fā)酵后殘?jiān)褂谜麴s水清洗3遍,105 ℃烘干至恒重,用以計(jì)算體外干物質(zhì)消化率(IVDMD),計(jì)算公式為:

      近幾年,隨著我國(guó)分子生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,對(duì)子宮肌腺癥的發(fā)病機(jī)制以及病因的相關(guān)研究也在不斷深化,特別是在遺傳因素、免疫因素、基因改變等方面都取得了突破性的進(jìn)展,主要包括患者遺傳因素[1]?;蛩?、免疫因素的改變。子宮腺肌癥的發(fā)病源主要是指子宮內(nèi)膜的基底層在受到某些因子的刺激后,相深層進(jìn)行生長(zhǎng),然后侵入到平滑肌中,并指使平滑肌的細(xì)胞出現(xiàn)增生現(xiàn)象[2]。子宮腺肌癥主要的臨床表現(xiàn)為痛經(jīng)、經(jīng)期延長(zhǎng)、月經(jīng)量較多等,這會(huì)對(duì)女性生存的質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重的影響[3]。目前,通過(guò)對(duì)子宮腺肌癥的相關(guān)生物學(xué)發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究,以此對(duì)當(dāng)下臨床的診斷與治療進(jìn)行指導(dǎo)。

      IVDMD(%)=[(發(fā)酵底物DM量-發(fā)酵后殘?jiān)麯M量)/發(fā)酵底物DM量]×100。

      1.5.4 組合效應(yīng)指數(shù)的計(jì)算

      參照王旭[14]使用的方法計(jì)算各指標(biāo)的單項(xiàng)組合效應(yīng)指數(shù)(single factor associative effects index,SFAEI)及多項(xiàng)組合效應(yīng)指數(shù)(multiply factor associative effects index,MFAEI),具體公式如下:

      加權(quán)估算值=全株玉米青貯實(shí)際測(cè)定值×所占比例+小麥秸稈實(shí)際測(cè)定值×所占比例+苜蓿干草實(shí)際測(cè)定值×所占比例;SFAEI=(組合后實(shí)測(cè)值-加權(quán)估算值)/加權(quán)估算值;MFAEI=ΣSFAEI。

      1.6 數(shù)據(jù)分析

      原始數(shù)據(jù)使用WPS office 2019處理后,使用SPSS 21.0的一般線性模型進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),Duncan氏法進(jìn)行組間的多重比較,并做Pearson相關(guān)性分析。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,以P<0.05為差異顯著的判定標(biāo)準(zhǔn)。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 不同粗飼料的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量

      由表3可知,3種粗飼料經(jīng)組合后,與單一粗飼料小麥秸稈相比,各組合粗飼料的DM、NDF、ADF、Ash含量均因全株玉米青貯和苜蓿干草比例的增加而降低,CP和EE含量則隨著與全株玉米青貯和苜蓿干草比例的增加而提高。

      表3 不同粗飼料的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))

      2.2 不同粗飼料的體外產(chǎn)氣量和產(chǎn)氣參數(shù)

      由表4可知,體外發(fā)酵產(chǎn)氣量隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸上升,且發(fā)酵初期增長(zhǎng)速度較快。不同粗飼料組合對(duì)各發(fā)酵時(shí)間時(shí)的產(chǎn)氣量均有極顯著影響(P<0.01)。其中,發(fā)酵12和24 h時(shí)A組的產(chǎn)氣量顯著高于其他組(P<0.05),發(fā)酵48和72 h時(shí)A組產(chǎn)氣量顯著高于除C組外的其他組(P<0.05),發(fā)酵72 h時(shí)產(chǎn)氣量由大到小為A組>C組>B組>E組>D組>F組>I組>G組>J組>H組。3種單一粗飼料中小麥秸稈各發(fā)酵時(shí)間時(shí)的產(chǎn)氣量均顯著低于全株玉米青貯和苜蓿干草(P<0.05);除發(fā)酵3 h時(shí),全株玉米青貯各發(fā)酵時(shí)間時(shí)的產(chǎn)氣量均顯著高于苜蓿干草(P<0.05)。

      表4 不同粗飼料的體外產(chǎn)氣量

      從體外產(chǎn)氣參數(shù)(表5)來(lái)看,不同組合粗飼料中,快速降解部分產(chǎn)氣量(a)以A組最高,顯著高于其他各組(P<0.05);A組的慢速降解部分產(chǎn)氣量(b)最高,顯著高于其他各組(P<0.05),H組的b最低;b的產(chǎn)氣速率常數(shù)(c)介于0.098~0.124,以J組最低,且與除I組外的其他組差異顯著(P<0.05);A組的潛在產(chǎn)氣量(a+b)最高,但與C組差異不顯著(P>0.05);各組的a+b與發(fā)酵72 h時(shí)的產(chǎn)氣量變化趨勢(shì)一致。3種單一粗飼料中中,全株玉米青貯的a顯著高于小麥秸稈和苜蓿干草(P<0.05),b和a+b依全株玉米青貯、小麥秸稈和苜蓿干草的次序降低,組間差異顯著(P<0.05),且小麥秸稈的c顯著低于苜蓿干草和全株玉米青貯(P<0.05)。

      表5 不同粗飼料的體外產(chǎn)氣參數(shù)

      2.3 不同粗飼料的體外發(fā)酵參數(shù)

      表6 不同粗飼料的體外發(fā)酵參數(shù)

      2.4 不同組合粗飼料的組合效應(yīng)

      表7反映的是不同組合粗飼料體外發(fā)酵產(chǎn)氣量、IVDMD以及體外發(fā)酵液pH、NH3-N與VFA濃度的SFAEI及MFAEI。B和H組出現(xiàn)了產(chǎn)氣量的負(fù)組合效應(yīng),其余組的產(chǎn)氣量均為正組合效應(yīng)。IVDMD、體外發(fā)酵液pH在各組中均為正組合效應(yīng)。體外發(fā)酵液中NH3-N濃度除A組外均為正組合效應(yīng)。體外發(fā)酵液中乙酸、丙酸和丁酸濃度均以C組的正組合效應(yīng)值最高、H組的負(fù)組合效應(yīng)值最低。MFAEI排序?yàn)镃組>E組>F組>D組>I組>B組>A組>G組>J組>H組。

      表7 不同組合粗飼料的組合效應(yīng)

      2.5 組合粗飼料的IVDMD與常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的相關(guān)性

      由表8可知,組合粗飼料的IVDMD與DM、EE含量呈正相關(guān),與CP、NDF、ADF和Ash含量呈負(fù)相關(guān),其中與ADF和Ash含量呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01),與NDF含量呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)。

      表8 組合粗飼料的IVDMD與常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的相關(guān)性

      3 討 論

      3.1 不同粗飼料的體外產(chǎn)氣量及產(chǎn)氣參數(shù)

      體外發(fā)酵的主要?dú)怏w來(lái)源為飼糧中的碳水化合物和CP,同時(shí)產(chǎn)氣活動(dòng)還受到瘤胃微生物活性的影響,即飼糧中可發(fā)酵成分含量越多,瘤胃微生物活性越高,產(chǎn)氣量相應(yīng)就越多[15]。而瘤胃中的能氮平衡又決定瘤胃微生物對(duì)有機(jī)物的分解能力,這與飼糧中可發(fā)酵有機(jī)物的含量相關(guān)[16]。本試驗(yàn)中,單一粗飼料以全株玉米青貯的72 h產(chǎn)氣量最高,苜蓿干草次之,小麥秸稈相對(duì)較低,這是因?yàn)槿暧衩浊噘A中含有較多的可用于發(fā)酵的碳水化合物;發(fā)酵3 h時(shí),小麥秸稈的產(chǎn)氣量?jī)H為5.33 mL,苜蓿干草則達(dá)到17.28 mL,與全株玉米青貯相當(dāng),但在發(fā)酵72 h時(shí)小麥秸稈的產(chǎn)氣量達(dá)到50.17 mL,略低于苜蓿干草的54.10 mL,這是由于苜蓿干草中CP等可快速發(fā)酵化合物含量豐富,由此發(fā)酵初期產(chǎn)氣量迅速上升,而小麥秸稈中NDF含量高,反芻動(dòng)物可利用NDF轉(zhuǎn)化為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),后期發(fā)酵水平也逐步提高。各組合粗飼料中,隨著全株玉米青貯比例的增加,72 h產(chǎn)氣量增加,但其水平均低于全株玉米青貯、高于小麥秸稈和苜蓿干草,可見全株玉米青貯在發(fā)酵產(chǎn)氣過(guò)程中起主導(dǎo)作用。C組的72 h產(chǎn)氣量高于B組,E組高于D組,I組高于G組,即在全株玉米青貯比例相同的前提下,可發(fā)酵成分含量較高的苜蓿干草占比多時(shí)72 h產(chǎn)氣量反而小于苜蓿干草占比少時(shí),這可能是因?yàn)榘l(fā)酵底物中組分的不同造成非結(jié)構(gòu)性碳水化合物和碳水化合物、碳水化合物和蛋白質(zhì)之間比例有所不同,導(dǎo)致各組合的產(chǎn)氣規(guī)律不同,其機(jī)制需進(jìn)一步研究。體外產(chǎn)氣能力差的小麥秸稈和苜蓿干草,在與發(fā)酵能力較高的全株玉米青貯組合以后,整體產(chǎn)氣水平優(yōu)于單一粗飼料的發(fā)酵。從體外產(chǎn)氣參數(shù)來(lái)看,苜蓿干草和全株玉米青貯的a+b均略低于72 h產(chǎn)氣量,小麥秸稈的a+b高于72 h產(chǎn)氣量,這與小麥秸稈中纖維含量高,發(fā)酵速度慢有關(guān),72 h的發(fā)酵時(shí)間對(duì)于小麥秸稈而言,還未能完全利用其中的營(yíng)養(yǎng)成分。

      3.2 不同粗飼料的體外發(fā)酵72 h的IVDMD與發(fā)酵參數(shù)

      IVDMD與飼糧中可溶性碳水化合物含量呈正相關(guān),與優(yōu)質(zhì)粗飼料相比,低質(zhì)的粗飼料中可溶性碳水化合物含量較低,反芻動(dòng)物瘤胃對(duì)其消化利用率也較低[17]。不同組合粗飼料的IVDMD隨著組合中全株玉米青貯比例的提高而提高,這是因?yàn)槿暧衩浊噘A富含非結(jié)構(gòu)性碳水化合物,可消化有機(jī)物含量高,更容易被瘤胃微生物發(fā)酵利用。本試驗(yàn)條件下,10種組合粗飼料和3中單一粗飼料發(fā)酵72 h后發(fā)酵液的pH在6.70~6.85,均在微生物發(fā)酵所需的適宜pH范圍內(nèi),以碳水化合物含量較高的全株玉米青貯的pH最低。NH3-N的濃度反映了飼糧中蛋白質(zhì)的降解以及微生物利用其合成菌體蛋白的動(dòng)態(tài)平衡[18],濃度過(guò)高或者過(guò)低均不利于微生物的生長(zhǎng)與繁殖。13種發(fā)酵底物經(jīng)72 h發(fā)酵后,發(fā)酵液中NH3-N濃度為16.17~20.93 mg/dL,均在有關(guān)文獻(xiàn)[19]的報(bào)道范圍內(nèi),說(shuō)明其濃度可以確保瘤胃微生物的正常生長(zhǎng)。

      3.3 不同粗飼料體外發(fā)酵72 h時(shí)發(fā)酵液中VFA濃度

      瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生的VFA主要包括乙酸、丙酸、丁酸等,乙酸是合成體脂和乳脂的原料,可為反芻動(dòng)物提供所需的大部分能量,丙酸則是葡萄糖合成的前體,其能為反芻動(dòng)物提供生產(chǎn)和生長(zhǎng)所需的能量,提高VFA中丙酸的比例可提高肉牛、肉羊的增重性能[20]。不同組合粗飼料體外發(fā)酵72 h后,因粗飼料中含有大量的纖維素和半纖維素,乙酸產(chǎn)量明顯大于丙酸產(chǎn)量,這與Zhang等[21]的研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)條件下,乙酸/丙酸值在2.48~3.01,符合正常情況下乙酸/丙酸值范圍(2.0~3.6)[22]。3種單一粗飼料中,全株玉米青貯的TVFA濃度最高,乙酸/丙酸值最低,表明全株玉米青貯此類禾本科飼草更容易被消化吸收,這與史卉玲等[23]研究結(jié)果一致。而不同組合粗飼料中,乙酸/丙酸值在2.62~2.80,差異不大,但均比苜蓿干草和小麥秸稈乙酸/丙酸值低,說(shuō)明將3種粗飼料混合后提高了養(yǎng)分在瘤胃中的消化利用率,更易被消化吸收。

      3.4 不同組合粗飼料的組合效應(yīng)

      本試驗(yàn)條件下單一的體外發(fā)酵指標(biāo)并未呈現(xiàn)一致的規(guī)律性變化,可見以單一指標(biāo)作為選擇依據(jù)不能合理確定全株玉米青貯、小麥秸稈、苜蓿干草組合的最佳配比,只有綜合多項(xiàng)指標(biāo)評(píng)定才能得出更為準(zhǔn)確的結(jié)論。本試驗(yàn)結(jié)果表明,小麥秸稈、苜蓿干草和全株玉米青貯按照各不同比例組合,表現(xiàn)出不同程度的組合效應(yīng),當(dāng)全株玉米青貯比例達(dá)到60%及以上時(shí),各組合均表現(xiàn)出正組合效應(yīng)。秸稈類非常規(guī)粗飼料與豆科類牧草具有協(xié)同作用,組合配制飼糧時(shí)組合效應(yīng)顯著,這與劉麗英等[2]的研究結(jié)果一致。據(jù)報(bào)道,粗飼料按照60%或者80%的全株玉米青貯與40%或者20%的稻草組合可產(chǎn)生正組合效應(yīng)[24]。本試驗(yàn)條件下,全株玉米青貯∶小麥秸稈∶苜蓿干草為70∶20∶10、60∶20∶20時(shí)組合效應(yīng)較高,也就是說(shuō),在全株玉米青貯和苜蓿干草中加入20%的小麥秸稈,提高了本試驗(yàn)條件下粗飼料的降解率和消化率。其原因可能是不同粗飼料以適宜的比例組合后,營(yíng)養(yǎng)成分之間互補(bǔ),促進(jìn)了微生物的生長(zhǎng)及其對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的消化,提高了混合粗飼料的整體發(fā)酵水平,并且改善了低質(zhì)量小麥秸稈的消化率,這與韓肖敏等[25]的研究結(jié)果一致。

      3.5 組合粗飼料IVDMD與常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的相關(guān)性

      組合粗飼料IVDMD與EE含量呈正相關(guān),與CP、NDF、ADF和Ash含量呈負(fù)相關(guān)。當(dāng)EE含量高時(shí),可發(fā)酵碳水化合物含量提高,由此IVDMD可提高。張霞等[26]、楊志林等[27]研究發(fā)現(xiàn),飼草CP含量較低時(shí)可提高微生物活性,有利于微生物發(fā)酵。

      4 結(jié) 論

      本試驗(yàn)條件下,與小麥秸稈和苜蓿干草相比,全株玉米青貯的體外發(fā)酵產(chǎn)氣量、IVDMD以及體外發(fā)酵液中乙酸、丙酸、丁酸濃度均最高,發(fā)酵速度快;全株玉米青貯、小麥秸稈、苜蓿干草按照不同比例組合后,以MFAEI評(píng)定的最優(yōu)配比為全株玉米青貯∶小麥秸稈∶苜蓿干草為70∶20∶10。

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