合并巨細胞病毒感染對小兒乙型肝炎疫苗初次免疫應答的影響

葉明 徐璐 趙子華 段雙霞

巨細胞病毒(HCMV)易進入母體導致新生兒出現(xiàn)先天性感染，使胎兒出現(xiàn)發(fā)育遲緩現(xiàn)象，出生后免疫功能降低，持續(xù)感染發(fā)生可能性加大[1]。我國是HCMV感染率較高的國家，而新生兒免疫功能低下，對病毒抵抗力小，被感染時身體免疫機能會遭受嚴重破壞[2-3]。乙肝疫苗在1992年成為我國計劃免疫疫苗之一，新生兒出生后24 h內(nèi)需要接種乙肝疫苗[4]。臨床上關于HCMV感染對乙肝疫苗效果的影響研究結果較少，本研究通過對比有HCMV感染和無HCMV感染的新生兒初次免疫應答情況，了解HCMV的可能影響機制。

資料與方法

一、一般資料

選取新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院2017年1月至2018年1月148例足月出生且出生后24 h內(nèi)完成接種乙肝疫苗的新生兒(未接種第二針乙肝疫苗)，其中納入確診為HCMV感染的患兒74例計為觀察組，另選未被HCMV感染的新生兒74例計為對照組。觀察組男、女分別為42、32例，日齡20～34(25.52±3.09)d；對照組男、女分別為41、33例，日齡21～35(25.57±3.05)d，兩組資料基本相當(P>0.05)。本研究經(jīng)院醫(yī)學倫理委員會通過。納入標準：①日齡20～35 d；②父母乙肝指標均為陰性，抗HBsAb滴度≥10 mIU/mL；③家長知情同意。排除標準：①其他肝炎病毒感染者；②其他病原感染(風疹病毒、EB病毒及弓形體)及遺傳代謝疾??；③先天性畸形；④存在自身免疫性肝炎。

二、研究方法

(1)初次免疫后檢測兩組血清乙肝表面抗體(抗-HBs)、白細胞介素(IL)-2、IL-6水平，早上空腹抽取靜脈血2 mL。ELISA檢測血清抗-HBs、IL-2、IL-6水平。

(2)記錄兩組對乙肝疫苗初次免疫應答情況 用CMIA法檢測抗-HBs，兒童HBsAb，HBsAb陰性者檢測HBV-DNA。正常應答：抗-HBs>100 mIU/mL，低應答：抗-HBs在10～99 mIU/mL，無應答：抗-HBs<9 mIU/mL且HBsAb、HBV-DNA均為陰性。

(3)檢測兩組細胞免疫指標水平，取入選對象靜脈血1 mL，采用流式細胞儀上機檢驗CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

三、統(tǒng)計學分析

結 果

一、兩組血清抗-HBs、IL-2、IL-6水平比較

觀察組抗-HBs、IL-2水平低于對照組，IL-6水平高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組抗-HBs、IL-2、IL-6水平比較(±s)

二、兩組乙肝疫苗初次免疫應答比較

觀察組新生兒對乙肝疫苗初次免疫保護應答率67.57%低于對照組85.14%(P<0.05)，見表2。

表2 兩組乙肝疫苗初次免疫應答比較[n(%)]

三、兩組細胞免疫指標比較

觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于對照組(P<0.05)，CD8+水平高于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 兩組細胞免疫指標比較(%，±s)

討 論

嬰兒感染HCMV多為先天性感染，新生兒免疫功能低下，對病毒的抵抗力較小，病毒進入體內(nèi)后易造成細胞免疫功能低下，進而會對機體免疫功能造成損害[5-6]。我國乙型肝炎發(fā)病率較高，乙肝病毒攜帶者多，接種乙肝疫苗后機體會出現(xiàn)免疫應答情況，可有效預防和控制乙肝病毒的傳播[7]。HCMV感染對乙肝疫苗效果的影響目前研究結果較少，為進一步了解HCMV對乙肝疫苗效果的影響，本研究對148例新生兒進行觀察，記錄新生兒初次免疫應答情況，分析其HCMV可能影響機制，現(xiàn)已經(jīng)取得有效成果。

本研究中，觀察組血清IL-2、抗-HBs水平比對照組低，血清IL-6水平比對照組高，觀察組新生兒對乙肝疫苗初次免疫保護應答率比對照組低，表明被巨細胞病毒感染的患者初次免疫應答率低于未被病毒感染的患者。接種乙肝疫苗后，乙肝病毒表面抗原進入機體，機體免疫功能發(fā)生作用產(chǎn)生特異性抗體，當乙肝病毒再次進入機體，特異性抗體與外來抗原反應產(chǎn)生免疫反應[8-9]，因此，乙肝疫苗作用的激發(fā)，特異性抗體的出現(xiàn)是以機體自身免疫功能發(fā)生作用為前提的[10]。HCMV可以感染機體多個器官和組織中的間質(zhì)細胞、實質(zhì)細胞和血細胞，例如肝臟中的細胞，肝臟不止有內(nèi)分泌、消化器官，還有免疫器官，機體被HCMV感染后，免疫功能下降，IL-6過度分泌，IL-2下降，促進免疫細胞再生和肝功能修復，機體免疫調(diào)節(jié)功能紊亂[11-12]。當被HCMV感染的患兒接種乙肝疫苗時，免疫功能低下的機體對乙肝疫苗的免疫反應明顯下降，分泌血清抗-HBs水平降低，特異性抗體數(shù)量不夠，初次免疫應答強度變?nèi)?，免疫應答率變低[13]。韓啟軍等[14]對小鼠進行實驗的研究結果與本研究結果相似。

本研究中，觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比對照組低，而CD8+水平高于對照組，表明受HCMV感染的患兒相對于未被感染的患兒而言其免疫功能更加低下。CD4+作為一種分泌性細胞因子，具有趨化、活化淋巴細胞功能和炎癥細胞的作用。CD8+可抑制T細胞增殖和B細胞抗體免疫反應，CD4+/CD8+降低是免疫功能破壞程度的重要指標[15]。HCMV感染導致細胞功能和結構紊亂，此時細胞表面抗體識別抗原和處理抗原能力減弱，新生兒體內(nèi)對病毒具有清除能力的細胞增殖速度及免疫功能降低[16-17]。溫麗等[18]對103例巨細胞病毒感染兒童的研究結果與本研究結果相似。

綜上，合并巨細胞病毒感染會抑制新生兒機體免疫功能，使機體對乙肝疫苗初次免疫時抗-HBs水平、IL-2、IL-6水平降低，免疫應答率降低，應答強度減弱。