兩種分析系統(tǒng)血漿D-二聚體結(jié)果一致性分析

石 飛，孫建方

（1.江蘇省張家港中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 張家港 215600；2.江蘇省張家港市婦幼保健所檢驗(yàn)科，江蘇 張家港 215600）

D-二聚體（D-Dimer）是交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物，其生成反映機(jī)體凝血和纖溶系統(tǒng)的激活，是體內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶亢進(jìn)的分子標(biāo)志物之一，同時(shí)D-二聚體也是溶栓治療的有效性觀察指標(biāo)。臨床主要應(yīng)用在靜脈血栓（VTE）和肺靜脈栓塞（PE）性疾病排除診斷，DIC診斷以及抗凝、溶栓療效觀察[1-4]。隨著D-二聚體的廣泛應(yīng)用，D-二聚體檢測中存在的問題也日益增多，主要表現(xiàn)在無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、檢測系統(tǒng)多及結(jié)果可比性差等[5-6]。本研究對全自動(dòng)血凝儀與全自動(dòng)生化儀比對分析，探討不同分析系統(tǒng)血漿D-二聚體結(jié)果的一致性，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 邁瑞C-3510全自動(dòng)血凝分析儀，D-二聚體檢測試劑盒，C-3510全自動(dòng)血凝分析儀D-二聚體檢測配套試劑，購自上海長島生物技術(shù)公司，批號(hào)：200703500（含質(zhì)控品、校準(zhǔn)品），有效期：202107；貝克曼AU-680全自動(dòng)生化分析儀，D-二聚體試劑盒及質(zhì)控品、校準(zhǔn)品均購自日本積水公司，試劑批號(hào)：898RKQ，校準(zhǔn)品批號(hào)：819RKP，質(zhì)控品批號(hào)；823RBQ，有效期：202110。

1.2 標(biāo)本采集與檢測 2020年8月21日—9月20日，本院107 例患者（其中手術(shù)50 例，感染11 例，心腦血管疾病19 例，腫瘤8 例，其他19 例）血液標(biāo)本。靜脈采血，置枸椽酸鈉真空抗凝管，充分混勻，在室溫下以3 000 r/min水平離心機(jī)15 min分離血漿，合格標(biāo)本必須排除溶血、黃疸、脂血等。并按試劑說明書操作，室內(nèi)質(zhì)控在控，即時(shí)完成檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用EP Evaluator軟件兩種方法比對及CLSI EP12模式統(tǒng)計(jì)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。根據(jù)試劑生產(chǎn)商推薦，兩種方法均以纖維蛋白原當(dāng)量單位（FEU）作為質(zhì)量濃度報(bào)告單位，D-二聚體0.5 mg/L（FEU）作為排除靜脈血栓的cut off值。以大于0.5 mg/L為陽性，分別計(jì)算兩種方法的總符合率，陰、陽性符合率。

2 結(jié)果

邁瑞C-3510全自動(dòng)血凝分析儀（實(shí)驗(yàn)方法）和貝克曼AU-680全自動(dòng)生化分析儀（參考方法）檢測107 例患者血漿D-二聚體，結(jié)果分別為1.364（0.20, 18.40）mg/L和2.062（0.12, 32.90）mg/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

邁瑞C-3510全自動(dòng)血凝分析儀（實(shí)驗(yàn)方法）和貝克曼AU-680全自動(dòng)生化分析儀（參考方法）結(jié)果間總符合率為85.0%（95%CI77.1%～90.6%），陽性符合率為98.2%，陰性符合率為71.2%，對稱性試驗(yàn)（McNemar Test）未通過，實(shí)驗(yàn)方法D-二聚體結(jié)果高于參考方法，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ChiSq＝12.250，1df，P＜0.001）；Cohen's Kappa系數(shù)0.698（95%CI0.562～0.835）。見表1。

表1 兩種檢測系統(tǒng)D-二聚體檢測結(jié)果比較

3 討論

D-二聚體作為纖維蛋白降解產(chǎn)物，其血漿水平升高反映體內(nèi)交聯(lián)纖維蛋白的形成及繼發(fā)性纖溶增強(qiáng)，應(yīng)用于靜脈血栓陰性排除及溶栓監(jiān)測。在循環(huán)中，D-二聚體與E片段構(gòu)成復(fù)合物形式存在（DD/E），因纖溶酶蛋白水解程度不同，每個(gè)個(gè)體血漿中包含的纖維蛋白片段復(fù)合物可有1個(gè)或數(shù)個(gè)D-二聚體不等，故其相對分子質(zhì)量可達(dá)228 000（DD/E）甚至更高[7]。目前的檢測實(shí)質(zhì)上是對包含混合有D-二聚體的纖維蛋白降解片段進(jìn)行測定，加上目前仍無統(tǒng)一的校準(zhǔn)品，所以不同定量檢測方法結(jié)果差異很大，給實(shí)驗(yàn)室和臨床帶來困擾[8-10]。

免疫比濁法在臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用廣泛，本次實(shí)驗(yàn)所采用的邁瑞C-3510全自動(dòng)血凝分析儀及貝克曼AU-680全自動(dòng)生化分析儀，方法學(xué)平臺(tái)不同，其各自的配套試劑也不同。檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示，前者的陽性檢出率要顯著高于后者（P＜0.001）。因使用的單抗不同及校準(zhǔn)品的不統(tǒng)一，導(dǎo)致兩種儀器檢測結(jié)果間的不一致。目前，實(shí)驗(yàn)室在開展D-二聚體檢測時(shí)，須定期對檢測儀器校準(zhǔn)，試劑進(jìn)行性能評價(jià)，包括參考值范圍的驗(yàn)證。使用過程中，需對D-二聚體質(zhì)量濃度進(jìn)行說明，是D-二聚體單位（DDU），還是纖維蛋白原當(dāng)量單位（FEU），換算公式為：1 mg/L（DDU）＝0.5 mg/L（FEU）[11]。而在一些實(shí)驗(yàn)室對此缺乏認(rèn)識(shí)。

D-二聚體檢測在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)開展，但還存在著不少問題需加以解決?；鶎俞t(yī)院尤其要加強(qiáng)室內(nèi)質(zhì)控，需每天堅(jiān)持做2個(gè)水平的質(zhì)控品。實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行D-二聚體結(jié)果比對。征求臨床科室的意見，有條件的情況下，聯(lián)合血漿FDP檢測，以提高診斷靈敏度及特異性[12]。