尿蛋白三種定性檢測方法的對比分析

王 青 王金娜 何 雪 劉 靜 賀紅艷

（西安醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，陜西 西安 710021）

尿液蛋白質(zhì)的定性檢測是尿液常規(guī)檢測必做項(xiàng)目之一，能夠有效反映腎臟的功能狀態(tài)，可作為泌尿系統(tǒng)疾病的篩選指標(biāo)[1]。血漿中小相對分子量（＜40 000）蛋白能順利通過腎小球的濾過膜并被重吸收，由于其血漿中濃度較低，最終僅有少量蛋白出現(xiàn)在尿液中。白蛋白等中相對分子量的蛋白在血漿中濃度較高，絕大部分血漿白蛋白在通過濾過膜后都被腎小管重吸收，高相對分子量（＞90 000）蛋白很難通過正常的腎小球?yàn)V過膜。一般常規(guī)方法無法檢出[2]。隨著醫(yī)療水平和人民健康意識的增強(qiáng)，人們對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，可靠性要求更高[3]。如何合理選擇檢測方法是檢驗(yàn)工作者必須認(rèn)真思考的問題。該實(shí)驗(yàn)同時(shí)使用三種方法檢測同一尿液標(biāo)本，比較三種方法結(jié)果的差異，并從原理進(jìn)行探討分析。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

連續(xù)7 d隨機(jī)收集住院病人尿液標(biāo)本500例，并于2 h內(nèi)檢驗(yàn)完成。

1.2 試劑與器材

尿液分析儀，酒精燈，5%醋酸溶液，10%磺基水楊酸。

1.3 方法

（1）干化學(xué)法。確保儀器狀態(tài)良好、質(zhì)控結(jié)果在控后，嚴(yán)格按照試紙條和儀器使用說明進(jìn)行操作，儀器自動打印結(jié)果。

（2）磺基水楊酸法。留取離心后上清尿液2 mL于小試管中，滴加10%磺柳酸試劑1～2滴，觀察尿液渾濁度變化、有無沉淀生成，判讀并記錄結(jié)果。

（3）加熱乙酸法。向玻璃試管加入尿液8 mL約占試管的2／3，試管夾持試管底部，試管呈60°傾斜，管口朝外，將尿液上端部分置于火焰上方加熱煮沸，以小滴管加入2～3滴醋酸溶液后，觀察有無渾濁，繼續(xù)加熱至沸，判讀并記錄結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

對比干化學(xué)法、加熱乙酸法，磺基水楊酸法三種方法的陽性率，計(jì)數(shù)資料以百分率表示。并將磺基水楊酸法作為參考方法，計(jì)算干化學(xué)法和加熱乙酸法的靈敏度、特異度。

2 結(jié)果

對500例尿標(biāo)本同時(shí)用三種蛋白定性方法進(jìn)行檢測?；腔畻钏岱ǖ鞍钻栃?17例，陽性率23.40%；干化學(xué)法蛋白陽性161例，陽性率32.20%，加熱乙酸法蛋白陽性111例，陽性率22.20 %。見表1。干化學(xué)法的假陽性率、真陽性率高于加熱乙酸法，假陰性率、真陰性率低于加熱乙酸法。見表2、表3。

表1 三種蛋白檢測方法陽性率比較

表2 磺基水楊酸法（設(shè)為參考方法），干化學(xué)法、加熱乙酸法檢驗(yàn)結(jié)果比較

表3 干化學(xué)法、加熱乙酸法評價(jià)指標(biāo)的比較

3 討論

尿液干化學(xué)法方便快捷，成本低，是臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的篩選方法[4]。但由于檢測原理的局限，影響因素較多，如pH過高、陰道分泌物的污染、色素、部分鹽類或標(biāo)本含有較多細(xì)胞成分時(shí)，干化學(xué)法檢測可引起假陽性。加熱乙酸法中加入乙酸可使尿液pH下降到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，從而促進(jìn)蛋白質(zhì)變性沉淀，并可消除尿液中某些磷酸鹽受熱析出結(jié)晶，進(jìn)而避免混濁的干擾，結(jié)果準(zhǔn)確，可作為蛋白質(zhì)定性實(shí)驗(yàn)的確證實(shí)驗(yàn)，但當(dāng)尿呈強(qiáng)堿性時(shí)，加熱乙酸法呈假陰性反應(yīng)?；腔畻钏岱ú僮鞅憬?，敏感度較高。易受干擾因素影響，造成假性結(jié)果。

本實(shí)驗(yàn)對比了三種尿蛋白定性檢測方法檢測結(jié)果的差異，發(fā)現(xiàn)干化學(xué)法的假陽性率（誤診率）、真陽性率（靈敏度）高于加熱乙酸法，假陰性率、真陰性率低于加熱乙酸法，假陰性率（漏診率）、真陰性率（特異度）低于加熱乙酸法。林榮萬[5]等研究尿蛋白三種檢驗(yàn)方法比較結(jié)果顯示，干化學(xué)法陽性率最高，為31.33%，且靈敏度較高，但誤診率較高，加熱

乙酸法特異度最高，三種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)綜合分析，慎重選擇檢測方法，與本研究結(jié)果相符。

綜上所述，三種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，相輔相成，在臨床工作中應(yīng)全面分析，合理選擇，特別是要注重干擾因素的影響，從而降低方法學(xué)所帶來的假陽性率和假陰性率。