7種殺蟲劑對梨癭蚊的毒性及其對異色瓢蟲的安全性評價

滕海媛 張?zhí)熹? 常曉麗 顧浩天 王冬生 袁永達

摘要 ：為了篩選對梨癭蚊幼蟲具有高毒性并對天敵異色瓢蟲安全的殺蟲劑，采用浸漬法測定了7種殺蟲劑對梨癭蚊幼蟲的毒力;采用濾紙接觸法測定了7種殺蟲劑對天敵異色瓢蟲1齡幼蟲和成蟲的毒力，并評價這些藥劑對異色瓢蟲的安全性。結果表明，藥劑處理48 h后對梨癭蚊幼蟲毒力從大到小依次為2.5%高效氯氟氰菊酯EW（5.540 mg/L）>5%氯蟲苯甲酰胺SC（10.015 mg/L）>60 g/L乙基多殺菌素SC（33.224 mg/L）>2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME（214.644 mg/L）>45%毒死蜱EC（231.876 mg/L）>150 g/L茚蟲威EC（401.490 mg/L）>10%蟲螨腈SC（404.147 mg/L）。藥劑處理24 h后，7種殺蟲劑對天敵異色瓢蟲1齡幼蟲和成蟲的毒力測定結果基本一致，60 g/L乙基多殺菌素SC毒力最低，2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME、2.5%高效氯氟氰菊EW和45%毒死蜱EC的毒力均高于其他4種殺蟲劑。結合益害毒性比和安全系數(shù)，5%氯蟲苯甲酰胺SC和60 g/L乙基多殺菌素SC對梨癭蚊毒力高而對異色瓢蟲毒力低，適合應用于梨癭蚊的化學防治和生物防治相結合的防治策略。

關鍵詞 ：殺蟲劑; 梨癭蚊; 異色瓢蟲; 毒力; 安全性評價

中圖分類號：

S 482.3

文獻標識碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2020016

Toxicity of seven insecticides on Dasineura pyri and safety

evaluation to predator Harmonia axyridis

TENG Haiyuan， ZHANG Tianshu， CHANG Xiaoli， GU Haotian， WANG Dongsheng*， YUAN Yongda*

（Eco-Environmental Protection Research Institute， Shanghai Academy of Agricultural Sciences， Shanghai 201403， China）

Abstract

In order to screen insecticides with high toxicity to Dasineura pyri and safety to its natural enemy Harmonia axyridis， toxicities of seven insecticides to D.pyri and H.axyridis were evaluated by dipping method and filter paper contact test， respectively. The results showed that after treatment on D.pyri larvae for 48 h， the median lethal concentrations （LC50） values ranked as lambda-cyhalothrin 2.5% EW （5.540 mg/L）>chlorantraniliprole 5% SC （10.015 mg/L）>spinetoram 60 g/L SC （33.224 mg/L）>emamectin benzoate 2.2% ME （214.644 mg/L）>chlorpyrifos 45% EC （231.876 mg/L）>indoxacarb 150 g/L EC （401.490 mg/L）>chlorfenapyr 10% SC （404.147 mg/L）. After treatment for 24 h， the toxicities of seven insecticides to the 1st instar larvae of H.axyridis were consistent with those to the adults of H.axyridis， spinetoram 60 g/L SC was the lowest， emamectin benzoate 2.2% ME， lambda-cyhalothrin 2.5% EW and chlorpyrifos 45% EC were more toxic than the other four insecticides. Overall， taken both the toxicity ratio and safety coefficient into account， chlorantraniliprole 5% SC and spinetoram 60 g/L SC had high toxicity to D.pyri low ecological risk against Haxyridis， which are the recommended candidates for the integrated pest management against D.pyri.

Key words

insecticide; Dasineura pyri; Harmonia axyridis; toxicity; safety evaluation

梨癭蚊Dasineura pyri （Bouche）屬雙翅目癭蚊科，又稱梨卷葉癭蚊、梨芽蛆，是梨樹的主要害蟲之一。早期在英國、法國、德國、荷蘭、挪威、瑞典、丹麥、瑞士、意大利、新西蘭和美國均有梨癭蚊的記錄[12]。1981年在我國安徽省安慶、宣城、巢湖等地發(fā)現(xiàn)該蟲且為害嚴重[3]。2000年以后該蟲在我國為害范圍和為害程度逐漸增加[46]，成為梨樹栽培中急需解決的重要問題。

在梨癭蚊的各種防治技術中，化學防治是速度最快、效果較好的一種防治方法。梨癭蚊的化學防治常用藥劑包括77.5%敵敵畏乳油、 40%毒死蜱乳油、5%高效氯氟氰菊酯乳油、3%啶蟲脒可濕性粉劑、5%阿維菌素乳油、10%吡蟲啉可濕性粉劑等[711]。傳統(tǒng)農藥施藥量大、毒性高，對環(huán)境中的水土造成污染。因此，迫切需要篩選高效低毒對環(huán)境友好的可用于果樹害蟲防治的農藥。

生物防治是害蟲綜合治理中的重要組成部分。高效利用天敵生物，可將害蟲數(shù)量控制在經濟閾值以下[12]。異色瓢蟲Harmonia axyridis （Pallas）（鞘翅目：瓢甲科）是梨樹上的重要捕食性天敵[1314]，也是梨園中梨癭蚊的主要捕食者[14]。關于異色瓢蟲捕食梨癭蚊已有部分研究[15]，但是化學藥劑對異色瓢蟲的安全性評價方面的報道較少，新的防治梨癭蚊殺蟲劑對天敵安全性方面的研究比較欠缺，這也為生物防治在生產中運用帶來了困難。

本研究選擇的7種殺蟲劑是可用于果園中害蟲防治的藥劑。本研究的目的是通過測定7種殺蟲劑對梨癭蚊和異色瓢蟲的毒力，評價藥劑對害蟲的毒力水平和對瓢蟲的安全性，篩選出對害蟲高效、對天敵安全的藥劑，從而有效控制害蟲、減少化學品投入和對水土環(huán)境的影響。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

1.1.1 梨癭蚊

于2019年5月18日，在位于江蘇省蘇州市吳中區(qū)的梨園，隨機采集梨樹（‘翠冠梨）上的梨癭蚊幼蟲蟲癭。選擇大小一致的幼蟲作為供試蟲源。

1.1.2 異色瓢蟲

異色瓢蟲卵購自北京闊野田園生物技術有限公司，將其在上海市農業(yè)科學院生態(tài)環(huán)境保護研究所養(yǎng)蟲室內擴繁。異色瓢蟲的養(yǎng)殖參照肖達等[16]的方法，略有修改。飼養(yǎng)過程為：種植大量蠶豆苗，將豆蚜Aphis craccivora Koch接于蠶豆苗進行擴大繁殖。將帶有豆蚜的蠶豆苗放入一面是尼龍網（120目）的塑料盒（13.5 cm×23 cm×18 cm）中，同時將異色瓢蟲卵塊放入盒中。卵塊孵化后直至成蟲均在塑料盒中飼養(yǎng)。將養(yǎng)蟲盒放入溫度（26±1）℃，相對濕度為（60±5）%，光周期為L∥D=16 h∥8 h的養(yǎng)蟲房，選擇異色瓢蟲1齡幼蟲和1日齡成蟲進行生物測定。

1.2 供試藥劑

150 g/L茚蟲威乳油（EC），5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑（SC），美國杜邦公司;60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑（SC），45%毒死蜱乳油（EC），美國陶氏益農公司;10%蟲螨腈懸浮劑（SC），巴斯夫歐洲公司;2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑（ME），浙江海正化工股份有限公司;2.5%高效氯氟氰菊酯水乳劑（EW），先正達南通作物保護有限公司。

1.3 7種殺蟲劑對梨癭蚊的毒力測定

采用浸漬法[17]。將采集到的帶有梨癭蚊的新鮮葉片放在顯微鏡下，用昆蟲針剔除葉片上其他害蟲，保留蟲體大小一致、齡期相近的梨癭蚊低齡幼蟲。將7種藥劑用含0.1% Triton X-100（以促進殺蟲劑活性成分均勻分布處理葉片）的蒸餾水分別稀釋成6個系列質量濃度，用含0.1% Triton X-100的蒸餾水作為對照[18]。試驗設置43個處理，每10片葉作為一個重復，每個處理重復4次。將帶蟲葉片浸入不同濃度的藥液中30 s，取出晾干后放入有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，置于溫度（25±1）℃，濕度（60±5）%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，處理48 h，在顯微鏡下檢查幼蟲存活情況，統(tǒng)計活蟲數(shù)和死蟲數(shù)。用昆蟲針輕輕觸碰蟲體，不動者計為死亡。

1.4 7種殺蟲劑對異色瓢蟲的毒力測定

異色瓢蟲幼蟲毒力測定采用濾紙接觸法[19]。根據預試驗的結果，將各殺蟲劑用含0.1% Triton X-100稀釋成6個系列質量濃度，用含0.1% Triton X-100的蒸餾水作為對照。試驗設置43個處理，每處理重復4次。取直徑為9 cm的濾紙放入塑料培養(yǎng)皿中，將1 mL藥液均勻滴在培養(yǎng)皿內的濾紙上（按每667 m2施藥量100 L計算而得）。濾紙自然晾干后，取10頭1齡異色瓢蟲幼蟲放入含有藥液的濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋子，放入溫度為（26±1）℃，相對濕度（60±5）%，光周期為L∥D=14 h∥10 h的人工氣候培養(yǎng)箱中。24 h后檢查異色瓢蟲幼蟲的存活情況，以試蟲不能正常爬行視為死亡。

7種殺蟲劑對異色瓢蟲成蟲的毒力測定方法與幼蟲測定相同。

1.5 7種殺蟲劑對異色瓢蟲的安全性評價

以殺蟲劑的田間推薦使用濃度與異色瓢蟲致死中濃度LC50相比，求得安全系數(shù)，評估藥劑對異色瓢蟲的安全程度。以殺蟲劑對異色瓢蟲的致死中濃度LC50與對梨癭蚊的致死中濃度LC50相比，求得益害毒性比[19]。

1.6 數(shù)據統(tǒng)計與分析

毒力測定中，幼蟲死亡率、校正死亡率按以下公式計算：

死亡率=死亡蟲數(shù)處理總蟲數(shù)×100%;

校正死亡率=處理死亡率-對照死亡率1-對照死亡率×100%。

根據試驗所得數(shù)據，利用POLO軟件[20]計算出致死中濃度（LC50）及其95%置信區(qū)間和斜率，95%置信區(qū)間不重疊時表明參數(shù)之間差異顯著。

2 結果與分析

2.1 7種殺蟲劑對梨癭蚊幼蟲的毒力

7種藥劑對梨癭蚊幼蟲的LC50（見表1），梨癭蚊幼蟲對7種殺蟲劑的敏感性由高到低的順序為：25%高效氯氟氰菊酯EW、5%氯蟲苯甲酰胺SC、60 g/L乙基多殺菌素SC、2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME、45%毒死蜱EC、150 g/L茚蟲威EC、10%蟲螨腈SC。梨癭蚊幼蟲對2.5%高效氯氟氰菊酯EW敏感性最強，LC50為5.540 mg/L，5%氯蟲苯甲酰胺SC次之，LC50為10.015 mg/L，對10%蟲螨腈SC的敏感性最低，LC50為404.147 mg/L。

從相對毒力指數(shù)可以看出，2.5%高效氯氟氰菊酯EW相對毒力指數(shù)最高，為4 185.49，其次是5%氯蟲苯甲酰胺SC，相對毒力指數(shù)為2 315.29，60 g/L乙基多殺菌素SC相對毒力指數(shù)為697.92，2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME相對毒力指數(shù)為108.03，其他兩個藥劑的相對毒力指數(shù)均低于對照藥劑45%毒死蜱EC。

2.2 7種殺蟲劑對異色瓢蟲幼蟲的毒力

7種殺蟲劑中2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME對異色瓢蟲幼蟲的毒力最高，LC50為0.043 mg/L，其次是2.5%高效氯氟氰菊酯EW，60 g/L乙基多殺菌素SC對其毒力最低，LC50為296.745 mg/L。相對毒力指數(shù)順序為2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME>2.5%高效氯氟氰菊酯EW>45%毒死蜱EC>10%蟲螨腈SC>150 g/L茚蟲威EC>5%氯蟲苯甲酰胺SC>60 g/L乙基多殺菌素SC（表2）。

由表3可知，7種殺蟲劑對異色瓢蟲成蟲的毒力大小順序為45%毒死蜱EC>2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME>2.5%高效氯氟氰菊酯EW>10%蟲螨腈SC>5%氯蟲苯甲酰胺SC>150 g/L茚蟲威EC>60 g/L乙基多殺菌素SC。45%毒死蜱EC對異色瓢蟲成蟲的毒力最高，LC50為8.207 mg/L， 60 g/L乙基多殺菌素SC毒力最低，LC50為8 065.928 mg/L。

2.3 7種殺蟲劑對異色瓢蟲的安全性評價

從7種藥劑對異色瓢蟲幼蟲的安全系數(shù)看（表4），60 g/L乙基多殺菌素SC的安全系數(shù)最高，對異色瓢蟲較為安全，而其他6種藥劑對異色瓢蟲的安全系數(shù)均較低，順序為5%氯蟲苯甲酰胺SC>150 g/L茚蟲威EC>10%蟲螨腈SC>2.5%高效氯氟氰菊酯EW、2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME>45%毒死蜱EC。安全系數(shù)和益害毒性比的結果表明，60 g/L乙基多殺菌素SC對異色瓢蟲較為安全。

從7種藥劑對異色瓢蟲成蟲的安全系數(shù)看（表5），60 g/L乙基多殺菌素SC的安全系數(shù)最高，對異色瓢蟲成蟲較為安全，45%毒死蜱EC對異色瓢蟲成蟲的安全系數(shù)最低，其他殺蟲劑的安全系數(shù)順序為150 g/L茚蟲威EC>5%氯蟲苯甲酰胺SC>2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME>10%蟲螨腈SC>2.5%高效氯氟氰菊酯EW。7種殺蟲劑的益害毒性比的順序為：60 g/乙基多殺菌素SC>5%氯蟲苯甲酰胺SC>2.5%高效氯氟氰菊酯EW>150 g/L茚蟲威EC>10%蟲螨腈SC>2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME>45%毒死蜱EC。

3 討論

在IPM計劃中使用的最理想殺蟲劑是對害蟲有毒性，但對天敵無毒[21]。在沒有這種殺蟲劑的情況下，最好的選擇是使用對捕食者選擇性最低的殺蟲劑。殺蟲劑對天敵瓢蟲的毒力作用，已有研究表明，氯蟲苯甲酰胺對異色瓢蟲2齡幼蟲的LC50（36.67 mg/L）值低于防控田間靶標害蟲時的推薦劑量，對異色瓢蟲2齡幼蟲毒性較高[22]。與本研究結果不一致，可能是與兩者測定方法、蟲齡、作用時間以及異色瓢蟲種群來源不同有關。另外， DI VITANTONIO等[23]的研究顯示，經短期和長期暴露于乙基多殺菌素殘留物中（66.67 mg/L）后，異色瓢蟲和二星瓢蟲 Adalia bipunctata （Linnaeus）幼蟲和成蟲的死亡率與對照組相近，說明乙基多殺菌素對異色瓢蟲的危害相對較小。張懷江等[24]報道，35%氯蟲苯甲酰胺對七星瓢蟲的直接殺傷作用在16%以下，毒性較小。這些均與本試驗結果相近。在本試驗測試的7種殺蟲劑中，5%氯蟲苯甲酰胺SC、60 g/L乙基多殺菌素SC對異色瓢蟲幼蟲和成蟲的選擇性均較低，是比較安全的殺蟲劑。在應用這兩種殺蟲劑對梨癭蚊幼蟲進行防治時，可同時釋放天敵異色瓢蟲進行協(xié)同防治。

殺蟲劑對癭蚊科害蟲防治中，畢海燕等[25] 的研究顯示，40%毒死蜱EC和5%高效氟氯氰菊酯EC防效均達到80%以上，具有較好的防效。周慧等[17]報道6%乙基多殺菌素SC對康癭蚊 Contarinia maculipennis Felt幼蟲的毒力（LC50=26.28 mg/L）較高，有較好的防治效果，與本研究相似（LC50=3324 mg/L）。研究結果表明，可將新型殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺和乙基多殺菌素應用在梨癭蚊的防治中。由于本研究僅進行了殺蟲劑室內生物測定，后續(xù)應對殺蟲劑和天敵釋放進行田間協(xié)調防治效果的研究，以全面評估其對梨癭蚊的防治效果。

參考文獻

[1] BARNES H F. Studies of fluctuations in insect populations， V. The leaf-curling pear midge， Dasyneura pyri （Cecidomyidae） [J].Journal of Animal Ecology， 1935， 4（2）： 244253.

[2] MUNDINGER F G. A newly observed insect pest in Hudson Valley pear orchards [J]. Journal of Economic Entomology， 1932（25）： 728729.

[3] 蔡平.梨癭蚊研究初報[J].安徽農學院學報， 1984（1）：6065.

[4] 何子順， 趙廣， 李養(yǎng)義， 等. 梨癭蚊在中國的蔓延與分析[J].北方果樹， 2019（3）：14.

[5] 侯啟昌， 崔改泵.中原地區(qū)梨癭蚊的生物學特性及防治研究[J].植物保護， 2010， 36（5）：154156.

[6] 凌學林，吉海龍，王舒悅.昆山地區(qū)梨癭蚊的發(fā)生及綠色防控技術[J]. 農業(yè)災害研究，2018， 8（1）： 1718.

[7] OLTEAN I， GHIZDAVU I， PORCA M， et al. Researches regarding the chemical killing of Dasyneura pyri species [J]. Bulletin of the University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine， 2002， 57： 163165.

[8] 蒙華貞，楊翠芳. 梨癭蚊的發(fā)生及防治試驗初報[J].中國南方果樹， 2004， 33（2）： 5758.

[9] 侯啟昌. 中原地區(qū)梨癭蚊的發(fā)生特點及防治[J]. 北方果樹， 2009（5）：1213.

[10]范文忠. 不同藥劑對梨卷葉癭蚊的毒力測定和田問藥效試驗[J]. 北方園藝， 2010（1）： 180181.

[11]吳傳偉， 胡瓊， 張海松， 等. 梨花癭蚊防治適期及藥劑篩選試驗[J]. 中國植保導刊， 2013， 33（2）：3334.

[12]SYMONDSON W O C， SUNDERLAND K D， GREENSTONE M H. Can generalist predators be effective biocontrol agents？ [J].Annual Review of Entomology， 2002（47）： 561594.

[13]江奇卿，張曉陽，金健， 等. 江西梨癭蚊發(fā)生與綜合防治技術[J]. 生物災害科學， 2015（1）： 2730.

[14]杜浩，高旭輝，劉坤，等.異色瓢蟲對梨癭蚊幼蟲的捕食功能反應及捕食偏好[J].中國生物防治學報， 2017， 33（6）：811816.

[15]費關鍵， 張默， 劉萬峰. 梨樹新蟲害梨癭蚊防治技術[J]. 陜西農業(yè)科學， 2013（1）： 278279.

[16]肖達， 郭曉軍， 王甦， 等.三種殺蟲劑對幾種昆蟲天敵的毒力測定[J]. 環(huán)境昆蟲學報， 2014，36（6）： 951958.

[17]周慧， 李培征， 陳施明， 等. 6種殺蟲劑對康癭蚊幼蟲室內毒力測定及田間藥效試驗[J].南方農業(yè)學報， 2015，46（2）： 260264.

[18]CHE Wunan， HUANG Jianlei， GUAN Fang， et al. Cross-resistance and inheritance of resistance to emamectin benzoate in Spodoptera exigua （Lepidoptera： Noctuidae） [J]. Journal of Economic Entomology， 2015， 108（4）： 20152020.

[19]王小藝， 沈佐銳. 四種殺蟲劑對桃蚜和異色瓢蟲的選擇毒性及害蟲生物防治與化學防治的協(xié)調性評價[J]. 農藥學學報， 2002， 4（1）： 3438.

[20]LeOra Software. PoloPlus， a users guide to probit and logit analysis [DB]. LeOra Software， Berkeley， CA. 2003.

[21]PLAPP F W， BULL D L. Toxicity and selectivity of some insecticides to Chrysopa carnea， a predator of the tobacco budworm [J].Environmental Entomology， 1978（7）： 431434.

[22]娜娃茲. 氯蟲苯甲酰胺和氟啶蟲胺腈對捕食性天敵異色瓢蟲的潛在影響研究[D].武漢： 華中農業(yè)大學， 2018.

[23]DI VITANTONIO C， DEPALO L， MARCHETTI E， et al. Response of the European ladybird Adalia bipunctata and the invasive Harmonia axyridis to a neonicotinoid and a reduced-risk insecticide [J].Journal of Economic Entomology， 2018， 111（5）： 20762080.

[24]張懷江， 仇貴生， 閆文濤， 等. 氯蟲苯甲酰胺對蘋果樹主要害蟲的控制作用及天敵的影響[J]. 環(huán)境昆蟲學報， 2011， 33（4）： 493501.

[25]畢海燕， 朱曉鋒， 阿布都克尤木·卡德爾， 等. 不同藥劑對棗癭蚊的防治效果評價[J]. 新疆農業(yè)科學， 2014， 51（5）： 915919.

（責任編輯：田 喆）