韓志雙 胡鳳

摘 ? 要：本實驗采用API 20E鑒定系統(tǒng)和國標(biāo)生化鑒定方法，分別對2020年四川省市場監(jiān)督管理局能力驗證計劃提供的樣品中分離得到的沙門氏菌可疑菌落進行鑒定。結(jié)果表明，兩種方法的檢測結(jié)果均為沙門氏菌陽性，故可用于對食品中腸桿菌科致病菌的鑒定，且API 20E鑒定系統(tǒng)更優(yōu)于傳統(tǒng)生化鑒定方法。

關(guān)鍵詞：API 20E ?沙門氏菌 ?鑒定

沙門氏菌是一種食源性致病菌，且大多數(shù)食品在生產(chǎn)過程中易接觸到此類污染物，這也是食品被沙門氏菌污染的重要途徑。其中，畜禽肉類、蛋類、乳制品等食品最易受到該菌的污染，尤其是生鮮[1]類食品。由于沙門氏菌對人類的健康威脅較大，故世界各國普遍規(guī)定食品中不得檢出該菌。

我國國標(biāo)方法GB 4789.4-2016[2]中規(guī)定了食品中沙門氏菌的檢驗方法，如傳統(tǒng)的生化鑒定方法，但該方法所需時間較長且工作量較大。目前，由于微生物自動化檢測系統(tǒng)與常規(guī)鑒定方法相比具有準(zhǔn)確、快速地發(fā)現(xiàn)和鑒定病原體的特點，因此被越來越多地應(yīng)用于臨床檢驗、疾病控制等領(lǐng)域[3]。API 20E是梅里埃公司根據(jù)酶促反應(yīng)及代謝產(chǎn)物檢測而研制的腸桿菌生化鑒定試劑條，API 20E細(xì)菌鑒定系統(tǒng)則為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)鑒定系統(tǒng)，也是腸桿菌科和弧菌的標(biāo)準(zhǔn)鑒定系統(tǒng)。

本研究將API 20E鑒定系統(tǒng)運用于食品中沙門氏菌的檢驗，并同國標(biāo)中的生化鑒定方法結(jié)果相比較。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備及試劑

1.1.1 國標(biāo)生化鑒定方法

生化試劑盒、陽性對照乙型副傷寒沙門氏菌，由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司制造提供。

1.1.2 API 20E法

API 20E試劑盒、API LAB軟件，法國生物梅里埃公司制造提供。

1.1.3 供試品來源

奶粉樣品由四川省食品藥品檢驗檢測院提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 國標(biāo)生化鑒定方法

樣品按GB 4789.4-2016經(jīng)過選擇性瓊脂平板增菌，經(jīng)TSI、賴氨酸脫羧酶初步生化確定為疑似沙門氏菌后，將菌落純化，配制成菌懸液，具體按廠家提供的試劑盒使用說明書執(zhí)行。

1.2.2 API 20E法

樣品按GB 4789.4-2016經(jīng)過選擇性瓊脂平板增菌，經(jīng)TSI、賴氨酸脫羧酶初步生化確定為疑似沙門氏菌后，將菌落純化，配制成菌懸液，接種于試劑條，于36℃培養(yǎng)18～24h，觀察生化反應(yīng)結(jié)果。然后，根據(jù)API LAB軟件得到鑒定結(jié)果。

2 結(jié)果和討論

2.1 結(jié)果

生化鑒定結(jié)果見表1，API 20E鑒定結(jié)果見表2。

2.2討論

綜上所述，API 20E鑒定系統(tǒng)和國標(biāo)生化鑒定方法均適用于沙門氏菌的鑒定。API 20E是腸桿菌科與其它G一桿菌和弧菌的標(biāo)準(zhǔn)鑒定系統(tǒng)，即可以用一種鑒定試劑條來鑒定大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌及副溶血性弧菌等不同的致病菌。針對國標(biāo)方法，本實驗采用的生化試劑盒只能鑒別一種致病菌，從微生物檢測實驗室耗材配備角度來看，API 20E可以降低試驗成本，優(yōu)化檢測程序。

API 20E生化反應(yīng)達21種，能有效保證該方法鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性，不僅集約化了生化試驗，也使后續(xù)的血清學(xué)反應(yīng)操作更為簡便。并且，API 20E僅需試劑條及API LAB軟件，不需要配置其他生化試劑，能滿足基層實驗室的相關(guān)需求。

參考文獻：

[1] 韓晗，韋曉婷，等.沙門氏菌對食品的污染及其導(dǎo)致的食源性疾病[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué).2016，44（5）：15-20.

[2] 《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗-沙門氏菌檢驗》（GB/T 4789.4-2016）.

[3] 莊華君，金映川，楊旭.API20E、VITEK-32在臨床細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生工程學(xué).2011.8（14）：320-322.