賴思婷，豐 鋒，陳樺潔，廖 菲，唐蕓妃，黃朝鳳，陳江萍，吳日怡

（廣東海洋大學(xué)濱海農(nóng)業(yè)學(xué)院，廣東 湛江 524088）

【研究意義】蝴蝶蘭（Phalaenopsisspp.）為蘭科（Orchidaceae）蝴蝶蘭屬多年生草本植物，世界著名的珍貴花卉之一。蝴蝶蘭以其美麗多姿、花朵造型獨(dú)特深受各國人們喜愛，被譽(yù)為“洋蘭皇后”［1］。蝴蝶蘭在熱帶地區(qū)氣候條件下自然花期為每年3～5月，為促進(jìn)蝴蝶蘭的開發(fā)利用，增大節(jié)假日對蝴蝶蘭的需求量，尤其是春節(jié)等重要節(jié)假日用花，可通過人工調(diào)節(jié)和控制環(huán)境因子進(jìn)行花期調(diào)控，實(shí)現(xiàn)按時按需供花［2］。蝴蝶蘭花期調(diào)控一般采用高山低溫以及空調(diào)制冷方法，但高山基地存在氣候波動不穩(wěn)定、上下山運(yùn)輸成本逐年增高等問題，因此，目前越來越多的從業(yè)者采用空調(diào)結(jié)合植物生長調(diào)節(jié)劑的方法進(jìn)行催花［3］?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】金龍等［4］采用6-BA噴施蝴蝶蘭葉片自上向下第2、3、4葉片節(jié)部位，結(jié)果表明大辣椒蝴蝶蘭對植物生長調(diào)節(jié)劑較富樂夕陽敏感，促進(jìn)其花芽分化的6-BA質(zhì)量濃度為10、25 mg/L。劉曉榮等［5］采用6-BA噴施大花型線條花系2048蝴蝶蘭植株葉片自上向下第2、3、4 葉片節(jié)部位的方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)10、25、50 mg/L 6-BA提高了蝴蝶蘭抽梗率、雙梗率和開花率，以25 mg/L為最佳濃度。陳鳳玲等［6］在蝴蝶蘭花芽分化前用GA3涂抹涂抹莖基部，結(jié)果表明150～200 mg/L處理可提前開花12～15 d；但小花的畸形率隨著GA3質(zhì)量濃度的提高也隨之上升，加入等量IBA或IAA可減少花畸形的發(fā)生。國內(nèi)學(xué)者研究使用6-BA和GA3灌根處理對春石斛花芽分化影響時發(fā)現(xiàn)，GA3灌根處理也可促進(jìn)假鱗莖花芽發(fā)育，但效果不穩(wěn)定。施用GA3時，質(zhì)量濃度不宜超過20 mg/L，高濃度GA3會導(dǎo)致春石斛葉片脫落；使用6-BA灌根處理具有促進(jìn)春石斛的花芽分化的作用［7-9］。陳昌銘［10］采用不同噴施方式發(fā)現(xiàn)，在雜交蘭苗期促進(jìn)花芽分化上，以低濃度6-BA噴施假鱗莖為佳；在促進(jìn)花梗長度上，以低濃度GA3噴施葉面為宜。在植物生長調(diào)節(jié)劑其他處理方式和處理部位的研究方面，貴紅霞［11］采用1% 6-BA涂抹蘭花根系發(fā)現(xiàn)，該方式可促進(jìn)產(chǎn)生不定芽進(jìn)而萌發(fā)增加分枝；采用1% 6-BA涂抹秋海棠葉片，可使葉邊產(chǎn)生不定芽，進(jìn)而萌發(fā)形成新株莖枝?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】本試驗(yàn)采用不同質(zhì)量濃度6-BA噴施處理火鳳凰蝴蝶蘭成苗，噴施后50 d內(nèi)每隔10～15 d測定蝴蝶蘭葉片可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)含量以及POD、CAT活性等生理指標(biāo)，且在抽出花梗后計(jì)算各處理抽梗率和雙梗率，在抽出花蕾后測定形態(tài)指標(biāo)，分析生理指標(biāo)在不同6-BA濃度噴施處理下的變化，同時分析這些生理指標(biāo)變化與形態(tài)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性。目前有關(guān)6-BA噴施處理對蝴蝶蘭成花誘導(dǎo)影響的研究較多，而對火鳳凰蝴蝶蘭研究較少，同時也針對6-BA促進(jìn)蝴蝶蘭花芽分化的濃度因種類不同也會產(chǎn)生差異，本文以此為切入點(diǎn)，探討6-BA噴施處理火鳳凰蝴蝶蘭成花誘導(dǎo)影響的同時找出促進(jìn)花芽分化效果最適宜的噴施濃度，進(jìn)一步研究和驗(yàn)證6-BA對于蝴蝶蘭成花誘導(dǎo)作用。【擬解決的關(guān)鍵問題】分析火鳳凰蝴蝶蘭生理指標(biāo)與形態(tài)指標(biāo)之間的關(guān)聯(lián)性，探討6-BA對火鳳凰蝴蝶蘭成花誘導(dǎo)的影響，為蝴蝶蘭催花措施的制定提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試蝴蝶蘭品種為火鳳凰，成苗，購于佛山市順德區(qū)陳村花卉世界。

1.2 試驗(yàn)方法

采用單因素隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在人工空調(diào)控溫條件下噴施6-BA，控溫條件為日溫20℃、夜溫17 ℃，光照培養(yǎng)架培養(yǎng)（放置盆栽成苗火鳳凰蝴蝶蘭）。6-BA 質(zhì)量濃度設(shè)5、10、15、20、25、30 mg/L 共6 個處理，以噴施清水為對照。每個處理18 株，共126 株。6-BA 采用小噴壺噴施，噴施部位為自上向下第2、3、4 葉片節(jié)部位，避免噴施到新葉導(dǎo)致傷害?；ɑ苓\(yùn)回實(shí)驗(yàn)室后用清水灌溉緩苗，2019 年7 月28 日（緩苗4 d 后蝴蝶蘭狀態(tài)良好，均是未抽梗、生長情況一致的蝴蝶蘭）進(jìn)行6-BA 第1 次噴施處理，然后分別在第1 次處理后10、20 d 進(jìn)行第2、第3 次處理，共噴施3 次。各處理溫度、光照、肥水用量等其他裁培管理措施一致。每株蝴蝶蘭每隔10 d 澆入100 mL花寶2號（N ∶P ∶K=20 ∶20 ∶20）1 000 倍+磷酸氫二鉀（K2HPO4）500 倍混合液。

1.3 測定項(xiàng)目及方法

試驗(yàn)開始后，每隔10 d調(diào)查1次抽梗率，至80 d結(jié)束調(diào)查。

在蝴蝶蘭植株抽出花梗后計(jì)算抽梗率和雙梗率，在蝴蝶蘭植株抽出花蕾之后測定花梗長度、處理到抽梗的時間間隔、花徑、花蕾數(shù)量。

試驗(yàn)后每隔10～15 d 取樣1 次，每次測定隨機(jī)取樣每個處理2 株，剪取植株自上而下第2 片葉，用以測定生理指標(biāo)，結(jié)束測定時間為試驗(yàn)后50 d（此時絕大多數(shù)植株已經(jīng)抽梗）。其中，可溶性糖含量采用蒽酮比色法［12］測定；可溶性蛋白質(zhì)含量采用考馬斯亮藍(lán)法［13］測定；CAT 活性的測定參考Torres 等（2003）的方法稍做改動；POD 活性的測定參考Polle 等（1994）的愈創(chuàng)木酚法并加以改進(jìn)。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理分析采用 SPSS 19.0，采用Duncan多重比較法進(jìn)行方差分析、采用SPSS 和Excel 2010 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭形態(tài)指標(biāo)的影響

由表1 可知，25 mg/L 6-BA 處理后30 d，蝴蝶蘭植株抽梗率為80%，高于清水對照植株的抽梗率11.76%及5 mg/L 6-BA 處理植株的抽梗率5.88%；每個6-BA 濃度處理后30～60 d，植株抽梗率穩(wěn)步增長；10～30 mg/L 6-BA 處理后60 d，植株均100%抽梗；清水對照植株在70 d 全部抽梗；而5 mg/L 6-BA 處理植株抽梗速度最慢，在處理后80 d 才達(dá)到100%抽梗；30 mg/L 6-BA處理植株雙梗率達(dá)到17.65%。推測10～30 mg/L 6-BA 噴施處理能顯著加快火鳳凰蝴蝶蘭花芽分化速度。

表1 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭抽梗率的影響Table 1 Effect of 6-BA on pedicel extraction rate of ‘Huofenghuang’ butterfly orchid

由表2 可知，10 mg/L 6-BA 處理植株的花梗長度為46.33 cm，顯著高于15 mg/L 6-BA 處理植株的花梗長度40.61 cm，其他處理間無顯著差異。10～30 mg/L 6-BA 處理植株在29～32 d 抽出花梗，顯著低于清水處理植株的44.47 d 和5 mg/L 6-BA處理植株的47.41 d。不同6-BA 噴施處理植株花朵直徑?jīng)]有顯著差異，集中在11 cm 左右。不同6-BA 處理下，植株花蕾數(shù)沒有顯著差異，集中在5 朵左右。推測6-BA 處理對于火鳳凰蝴蝶蘭的花梗長度、花朵直徑、花蕾數(shù)目沒有顯著影響。

表2 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭形態(tài)指標(biāo)的影響Table 2 Effect of 6-BA on morphology index of ‘Huofenghuang’ butterfly orchid

2.2 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片可溶性糖含量的影響

由表3 可知，20、25 mg/L 6-BA 噴施處理后30 d 植株葉片可溶性糖含量達(dá)到最大值（21.27、19.93 mg/g），顯著高于其他處理；噴施處理后30 d 植株進(jìn)行抽梗，消耗大量可溶性糖，因此呈現(xiàn)下降趨勢。5～15 mg/L、30 mg/L 6-BA 處理植株葉片可溶性糖含量在處理后40 d 達(dá)最大，噴施處理后40 d 植株進(jìn)行抽梗。無論是在噴施處理后30 d 還是40 d 可溶性糖含量達(dá)到最大值，這都與形態(tài)觀察結(jié)果一致，這時有花芽出現(xiàn)，推測在蝴蝶蘭抽梗之前葉片積累大量可溶性糖，因此蝴蝶蘭葉片中的可溶性糖含量呈現(xiàn)上升趨勢；隨著花芽發(fā)生、發(fā)育和花梗抽生，蝴蝶蘭抽梗之后可溶性糖大量輸出到花梗中，因此葉片可溶性糖含量在蝴蝶蘭抽梗之后呈現(xiàn)下降趨勢。從可溶性糖含量的變化可以看出，噴施處理后30 d，20、25 mg/L 6-BA 處理的植株葉片可溶性糖含量高于其他處理，而這兩個處理的抽梗率也最高，分別達(dá)77.78%和80%。由此推測，在抽出花梗時期蝴蝶蘭葉片較高的可溶性糖可能會提高蝴蝶蘭抽梗率。

表3 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片可溶性糖含量的影響Table 3 Effect of 6-BA on soluble sugar content in ‘Huofenghuang’ butterfly orchid leaves

2.3 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片可溶性蛋白質(zhì)含量的影響

由表4 可知，25～30 mg/L 6-BA 處理蝴蝶蘭植株葉片可溶性蛋白質(zhì)含量在噴施處理后30 d 大幅下降，其余處理植株葉片可溶性蛋白質(zhì)含量在處理后40 d 降到最小值，這與形態(tài)觀察結(jié)果一致，這時各處理有花芽出現(xiàn)，推測可能是葉片為花芽分化做物質(zhì)準(zhǔn)備而消耗大量可溶性蛋白質(zhì)；噴施處理后50 d，所有處理可溶性蛋白質(zhì)含量又趨于上升，在蝴蝶蘭抽梗后做好營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)保證。從可溶性蛋白質(zhì)含量的變化可以看出，在噴施處理后30 d，清水對照、5 mg/L 6-BA 處理植株葉片可溶性蛋白質(zhì)含量高于其他處理，而這兩個處理的抽梗率也是最低的（分別是11.76%、5.88%）。推測在抽出花梗時期蝴蝶蘭葉片較高的可溶性蛋白質(zhì)可能會降低蝴蝶蘭的抽梗率。

表4 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片可溶性蛋白質(zhì)含量的影響Table 4 Effect of 6-BA on soluble protein content in ‘Huofenghuang’ butterfly orchid leaves

2.4 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片CAT 活性的影響

由表5 可知，在各處理蝴蝶蘭抽梗之前的30 d 植株葉片CAT 活性都呈現(xiàn)上升趨勢，這與形態(tài)觀察結(jié)果一致，這時有花芽還未出現(xiàn)，CAT活性的上升是為抽出花梗做準(zhǔn)備，在噴施處理后30～40 d，清水對照、5 mg/L 6-BA 處理植株葉片的CAT 活性呈現(xiàn)上升趨勢，可能是因?yàn)檫@兩個處理抽出花梗較慢、在為抽出花梗做準(zhǔn)備，所以植株葉片CAT 活性一直維持在上升趨勢；蝴蝶蘭抽梗后30～40 d，10～30 mg/L 6-BA 處理植株葉片CAT 活性呈現(xiàn)下降趨勢，這與形態(tài)觀察結(jié)果一致，這時有花芽出現(xiàn)，植株體內(nèi)氧自由基減少，有利于蝴蝶蘭花芽分化，進(jìn)行抽梗；推測蝴蝶蘭葉片CAT 活性較低時，有利于花梗抽出。從CAT 活性變化可以看出，噴施處理后30 d，20～30 mg/L 6-BA 處理植株葉片CAT 活性高于其他處理，而這3 個處理抽梗率最高，分別為77.78%、80%、76.47% ；推測在抽出花梗時期蝴蝶蘭葉片較高CAT 活性可能會提高蝴蝶蘭的抽梗率。

表5 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片CAT 活性的影響Table 5 Effect of 6-BA on CAT activity in Phalaenopsis amabilis leaves

2.5 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片POD 活性的影響

由表6 可知，各處理蝴蝶蘭植株葉片在整個過程中POD 活性均有一定差異，但不同處理間差異未達(dá)顯著水平。在噴施處理后的15～30 d，除清水對照、5 mg/L 6-BA 處理植株葉片POD 活性變化較平緩?fù)?，其他處理蝴蝶蘭葉片POD 活性均處于上升趨勢，這與形態(tài)觀察結(jié)果一致，此時有些花芽未出現(xiàn)，仍處于營養(yǎng)積累階段，為抽梗做準(zhǔn)備。噴施處理后30～50 d，蝴蝶蘭葉片POD 活性呈現(xiàn)兩種變化：第一種是上升-下降，表明蝴蝶蘭處于營養(yǎng)繼續(xù)積累階段，植株葉片POD 活性下降的過程就是花梗抽出（處理后40 d）的過程；第二種是下降-上升，花梗抽出（處理后30 d）的過程中，POD 活性下降，之后上升，是蝴蝶蘭抽出花梗后進(jìn)入緩慢生長的階段，即葉片POD 活性處于上升階段?？傊?，葉片較低POD 活性有利于花梗抽出，當(dāng)進(jìn)行比較緩慢的營養(yǎng)生長階段時葉片POD 活性較高。對30 mg/L 6-BA 處理蝴蝶蘭葉片POD 活性一直處于上升過程的原因，目前尚不清楚，需要進(jìn)一步深入研究。從蝴蝶蘭葉片POD 活性的變化可以看出，噴施處理后30 d，清水對照、5 mg/L 6-BA 處理植株P(guān)OD 活性低于其他處理，而這兩個處理的抽梗率也最低（11.76%、5.88%），推測在抽出花梗時期蝴蝶蘭葉片較低的POD 活性可能會降低其抽梗率。

表6 6-BA 對火鳳凰蝴蝶蘭葉片POD 活性的影響Table 6 Effect of 6-BA on POD activity in Phalaenopsis amabilis leaves

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，用25 mg/L 6-BA 處理火鳳凰蝴蝶蘭后30 d，抽梗率高達(dá)80.00%，而清水對照植株藥后30 d 的抽梗率僅為11.76%，這與金龍等“10 mg/L 6-BA 處理大辣椒蝴蝶蘭能顯著增加花芽分化速度、促進(jìn)花芽分化”的結(jié)論［4］有差別。由于蝴蝶蘭品種不同，生長特性及內(nèi)源激素變化也不同，導(dǎo)致不同濃度6-BA 促進(jìn)蝴蝶蘭花芽分化的程度可能存在差異，這方面還要擴(kuò)大品種范圍進(jìn)一步試驗(yàn)。我們發(fā)現(xiàn)，不同質(zhì)量濃度6-BA處理火鳳凰蝴蝶蘭，植株花梗長度、花朵直徑、花蕾數(shù)無明顯差異，這與黃建等“一定濃度6-BA 處理能在一定程度上增加蝴蝶蘭的花蕾數(shù)”的結(jié)論［14］不一致，而與呂秉韜等提出的“不同濃度6-BA 處理對不同品種的蝴蝶蘭花朵數(shù)和花朵直徑有不同的效果”［15］大致相同。在本試驗(yàn)中，10～20 mg/L 6-BA 處理植株的雙梗率均為5.56%，30 mg/L 6-BA 處理植株雙梗率為17.65%。關(guān)于蝴蝶蘭雙梗率是否隨著6-BA質(zhì)量濃度增大而提高，還需要進(jìn)一步試驗(yàn)探討，針對李奧等［16］提出的“不同濃度 6-BA 明顯提高了供試3 個品種蝴蝶蘭的雙梗率，其中金桔和雙霞的最適處理濃度為100 mg/L，而‘富樂夕陽’的最適濃度為200 mg/L”的結(jié)論，還需進(jìn)一步進(jìn)行質(zhì)量濃度的篩選。關(guān)于在人工空調(diào)培養(yǎng)的同時噴施6-BA，低溫和6-BA這兩個因素是哪個因素促進(jìn)了蝴蝶蘭表型和生理指標(biāo)的變化這個問題，我們在實(shí)驗(yàn)方案過程中設(shè)置了在同等條件的人工空調(diào)培養(yǎng)的蝴蝶蘭植株作為對照，因此可以確定蝴蝶蘭表型和生理指標(biāo)發(fā)生改變是由噴施6-BA 所致。

生理指標(biāo)測定方面，我們推測在蝴蝶蘭抽梗之前葉片積累大量可溶性糖，這與黃勝琴等［17］在低溫條件下對蝴蝶蘭進(jìn)行花芽誘導(dǎo)所得出的結(jié)論相一致?；瘌P凰蝴蝶蘭抽出花梗時，葉片為花芽分化做物質(zhì)準(zhǔn)備而消耗了大量可溶性蛋白質(zhì)，說明花芽分化消耗了一定量的可溶性蛋白質(zhì)，這與彭芳等“花器官分化開始前，花芽中可溶性蛋白質(zhì)含量先逐漸下降，之后再逐漸增加并達(dá)到最高水平（花萼原基分化期），這可能是花芽萌出前，一些蛋白質(zhì)水解酶活性增強(qiáng)，使組合蛋白分解成可溶性蛋白質(zhì)，或形成特異結(jié)構(gòu)和功能蛋白以滿足花芽的形態(tài)建成”的結(jié)論［18］相一致。

同時，我們發(fā)現(xiàn)噴施6-BA 處理后40 d、50 d，各處理蝴蝶蘭植株的生理指標(biāo)都顯示出恢復(fù)到差異不顯著階段以及各指標(biāo)之間差距減小的狀態(tài)，這可能與蝴蝶蘭最后測定的形態(tài)指標(biāo)（如花梗長度、花朵直徑、花蕾數(shù)）差異不顯著有一定關(guān)系。針對30 mg/L 6-BA 處理植株的雙梗率達(dá)到最大，還需進(jìn)一步深入研究生理指標(biāo)與雙梗率之間的關(guān)系。本研究僅對較易催花的蝴蝶蘭品種火鳳凰進(jìn)行了試驗(yàn)研究，為其他品種蝴蝶蘭的催花提供了參考。

4 結(jié)論

25 mg/L 6-BA 噴施處理火鳳凰蝴蝶蘭后30 d，抽梗率為80.00%，清水處理抽梗率僅為11.76%，10～30 mg/L 6-BA 噴施處理蝴蝶蘭后40 d抽梗率超過90.00%，噴施處理50 d 后全部抽梗；25～30 mg/L 6-BA 處理到抽梗天數(shù)為29 d，顯著低于清水對照的44 d。與形態(tài)觀察相一致的是，花芽未抽出時（即蝴蝶蘭抽梗前）葉片可溶性蛋白質(zhì)含量最低、可溶性糖含量最高；花芽抽出時，蝴蝶蘭葉片CAT、POD 活性逐漸下降。推測在抽出花梗時期，蝴蝶蘭葉片較高的可溶性糖含量、CAT 活性會提高抽梗率；抽出花梗時期，蝴蝶蘭較高的可溶性蛋白質(zhì)含量、較低的POD 活性會降低抽梗率；抽出花梗后，各生理指標(biāo)差異不顯著以及差異減少導(dǎo)致各處理間花梗長度、花朵直徑、花蕾數(shù)差異不顯著。