張 陽(yáng) 呂慧源 徐盛玉 方正鋒 馮 斌 車煉強(qiáng) 林 燕 卓 勇 李 健 江雪梅 趙希侖 吳 德*

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所，成都611130；2.北京生泰爾生物科技股份有限公司，北京102600)

在非洲豬瘟和飼料禁抗的大環(huán)境下，開展保健類飼料添加劑的研究對(duì)維持并提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能、增強(qiáng)動(dòng)物自身健康狀況有著重要意義，成為動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)近年來的研究熱點(diǎn)。其中，復(fù)合益生菌制劑和黃芪多糖(Astragaluspolysaccharide，APS)是2類研究應(yīng)用相對(duì)成熟的動(dòng)物保健產(chǎn)品，它們組成的合生元的應(yīng)用效果也引起一些學(xué)者的關(guān)注。李樹鵬[1]研究發(fā)現(xiàn)，APS與益生菌組成的合生元對(duì)有害菌的抑制效果比單一添加更為顯著；但合生元對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的提高并不比單一添加效果好。其后，部分在雞上的研究表明，復(fù)合益生菌與APS組成的合生元較對(duì)照組和單一添加組對(duì)雞的生產(chǎn)性能、免疫等方面均具有一定優(yōu)勢(shì)[2-5]。岑路等[6]在仔豬上的研究發(fā)現(xiàn)，索比亞益生菌具有顯著的防治口蹄疫和提高口蹄疫疫苗保護(hù)的作用，同時(shí)還促進(jìn)了仔豬的生長(zhǎng)，且添加APS與其有明顯的協(xié)同作用。前人研究多直接關(guān)注復(fù)合益生菌與APS組成的合生元的應(yīng)用效果，且主要關(guān)注生產(chǎn)性能和免疫這2個(gè)方面，這使得我們目前對(duì)于復(fù)合益生菌與APS之間相互作用的了解知之甚少。作為合生元重要組成的益生菌，其重要作用之一便是調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生物，而前人研究卻較少關(guān)注這方面的影響。同時(shí)，在生長(zhǎng)育肥豬上復(fù)合益生菌與APS混合使用效果的研究國(guó)內(nèi)未見報(bào)道。因此，本研究將著重考察復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和糞便微生物的影響，為復(fù)合益生菌與APS在生長(zhǎng)育肥豬上互作效應(yīng)的研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

復(fù)合益生菌制劑購(gòu)于某公司，有效成分為枯草芽孢桿菌、嗜乳酸桿菌和屎腸球菌，活菌數(shù)>5×108CFU/g。APS來源于某公司，有效成分及含量為：黃芪多糖200 mg/g，黃芩苷22 mg/g，綠原酸2.2 mg/g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用2×2雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取80頭健康狀況、體重[(33.5±0.8) kg]相近的“杜×長(zhǎng)×大”生長(zhǎng)豬，隨機(jī)分為4組(每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4頭豬)，分別飼喂基礎(chǔ)飼糧(對(duì)照組)、基礎(chǔ)飼糧+5×108CFU/kg復(fù)合益生菌(復(fù)合益生菌組)、基礎(chǔ)飼糧+0.1%APS(APS組)、基礎(chǔ)飼糧+5×108CFU/kg復(fù)合益生菌+0.1%APS(復(fù)合益生菌+APS組)。試驗(yàn)期為84 d。

1.3 基礎(chǔ)飼糧

試驗(yàn)用基礎(chǔ)飼糧為參照NRC(2012)25～110 kg生長(zhǎng)育肥豬營(yíng)養(yǎng)需要配制的粉狀配合飼料，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items第1～28天Day 1 to 28第29～56天Day 29 to 56第57～84天Day 57 to 84營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels3)消化能 DE/(MJ/kg)14.4414.4014.61粗蛋白質(zhì) CP17.1015.5414.85粗脂肪 EE4.904.805.74粗灰分 Ash4.073.933.90鈣 Ca0.690.680.60總磷 TP0.490.480.42有效磷 AP0.320.310.26可消化賴氨酸 DLys1.141.000.87可消化蛋氨酸 DMet0.320.290.25可消化蛋氨酸+可消化半胱氨酸 DMet+DCys0.920.530.77可消化蘇氨酸 DThr0.720.640.57可消化色氨酸 DTrp0.220.190.17

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所動(dòng)物試驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行。圈舍消毒后轉(zhuǎn)入試驗(yàn)豬只，分組分重復(fù)關(guān)好，同一重復(fù)豬只關(guān)在同一個(gè)圈中。每天飼喂3次(08：00、14：00和20：00)，使豬只全期自由采食，充足飲水，給予豬只適宜的生長(zhǎng)環(huán)境，豬舍定期消毒。

1.5 樣品采集

1.5.1 血樣

試驗(yàn)第85天清晨每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1頭健康的豬，空腹采血5 mL于普通采血管中，靜置2 h后于3 000 r/min離心10 min，將血清分裝于1.5 mL離心管中，于-20 ℃保存待測(cè)。

1.5.2 糞樣

試驗(yàn)第84天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2頭豬使用一次性無菌手套采集糞便樣品，每頭豬采糞30 g左右。每頭豬的糞樣分裝于4支已滅菌的凍存管中，-80 ℃保存待測(cè)，剩余糞樣棄置。

1.6 指標(biāo)檢測(cè)

1.6.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)期間每周結(jié)料，準(zhǔn)確記錄每個(gè)重復(fù)豬只的采食量，試驗(yàn)第28天、第56天和第84天晚上空腹稱重，計(jì)算豬的平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)、平均日增重(average daily gain,ADG)和料重比(feed/gain,F/G)。

1.6.2 血清生化指標(biāo)

采用南京建成生物工程研究所的生化試劑盒，結(jié)合酶標(biāo)儀測(cè)定血清樣品中白蛋白(albumin,ALB)、尿素氮(urea nitrogen,UN)和總膽汁酸(total bile acid,TBA)的含量。

1.6.3 糞便微生物

1.6.3.1 微生物多樣性測(cè)定

將糞便樣品整理好后，送往上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司進(jìn)行環(huán)境微生物測(cè)序，測(cè)序完成后在美吉生物云平臺(tái)上進(jìn)行微生物多樣性分析。

1.6.3.2 微生物代謝產(chǎn)物測(cè)定

短鏈脂肪酸：采用氣相色譜儀(瓦里安MP-3800型)測(cè)定糞便樣品中乙酸、丙酸和丁酸的含量。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

先使用Excel 2010對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，采用SAS 9.2對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和雙因素方差分析。正態(tài)性和方差同質(zhì)性分別通過Shapiro-Wilk檢驗(yàn)和Levene檢驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估。如果2個(gè)因素之間不存在交互作用，進(jìn)行主效應(yīng)分析；如果2個(gè)因素之間存在交互作用，則進(jìn)行簡(jiǎn)單主效應(yīng)分析。結(jié)果以平均值(mean)和集合標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)的形式表示。以P<0.01作為極顯著性差異，P<0.05作為顯著性差異，0.05≤P<0.10作為趨勢(shì)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，復(fù)合益生菌組、APS組和復(fù)合益生菌+APS組生長(zhǎng)育肥豬第1～28天、第57～84天及第1～84天ADFI、ADG和F/G均無顯著差異(P>0.05)；第29～56天，飼糧添加復(fù)合益生菌有提高生長(zhǎng)育肥豬ADFI的趨勢(shì)(P=0.065)，且顯著提高生長(zhǎng)育肥豬F/G(P<0.05)。

表2 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，各組生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。

表3 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

2.3 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物的影響

2.3.1 α多樣性分析

由表4可知，各組操作分類單元(operational taxonomicunit，OTU)序列的覆蓋率(coverage)均達(dá)到了0.99，說明得到的OTU序列對(duì)于試驗(yàn)結(jié)果具有代表性；其中，與對(duì)照組相比，飼糧添加APS顯著降低了生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物的Ace指數(shù)和Chao1指數(shù)(P<0.05)。

表4 生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物α多樣性分析

2.3.2 門水平

由表5可知，經(jīng)檢測(cè)，在本試驗(yàn)采集的生長(zhǎng)育肥豬糞便樣本中，除門水平上未命名的菌群外，相對(duì)豐度大于0.1%的門共有7個(gè)，分別為：厚壁菌門(Firmicutes)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、螺旋體門(Spirochaetes)、放線菌門(Actinobacteria)、藍(lán)細(xì)菌門(Cyanobacteria)、疣微菌門(Verrucomicrobia)和WPS-2門(WPS-2)。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，飼糧添加復(fù)合益生菌有降低生長(zhǎng)育肥豬糞便樣品中厚壁菌門相對(duì)豐度的趨勢(shì)(P=0.071)，有提高擬桿菌門相對(duì)豐度的趨勢(shì)(P=0.061)，有降低厚壁菌門/擬桿菌門值的趨勢(shì)(P=0.050)。

表5 生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物主要菌群門水平上的相對(duì)豐度

2.3.3 屬水平

由表6可知，經(jīng)檢測(cè)，在本試驗(yàn)采集的生長(zhǎng)育肥豬糞便樣本中，除屬水平上未命名的菌群外，共檢測(cè)到63種不同屬的微生物，相對(duì)豐度大于1%的屬共有15個(gè)，分別為：狹義梭菌屬(Clostridium_sensu_stricto_1)、鏈球菌屬(Streptococcus)、Terrisporobacter、乳桿菌屬(Lactobaillus)、Muribaculaceae、瘤胃球菌科UCG-005屬(Ruminococcaceae_UCG-005)、克里斯滕森菌科R-7群屬(Christensenellaceae_R-7_group)、普雷沃氏菌屬(Prevotella)、毛螺菌科XPB1014群屬(Lachnospiraceae_XPB1014_group)、顫螺旋菌科NK4A214群屬(Oscillospiraceae_NK4A214_group)、普雷沃氏菌科NK3B31群屬(Prevotellaceae_NK3B31_group)、瘤胃球菌科UCG-014屬(Ruminococcaceae_UCG-014)、理研菌科RC9腸道群屬(Rikenellaceae_RC9_gut_group)、密螺旋體屬(Treponema)和瘤胃球菌科UCG-002屬(Ruminococcaceae_UCG-002)。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，飼糧添加APS顯著降低生長(zhǎng)育肥豬糞便樣品中顫螺旋菌科NK4A214群屬相對(duì)豐度(P<0.05)；復(fù)合益生菌與APS對(duì)糞便樣品中毛螺菌科XPB1014群屬相對(duì)豐度存在互作效應(yīng)(P<0.05)，與對(duì)照組相比，復(fù)合益生菌組和APS組毛螺菌科XPB1014群屬相對(duì)豐度顯著提高(P<0.05)，而與復(fù)合益生菌組和APS組相比，復(fù)合益生菌+APS組毛螺菌科XPB1014群屬相對(duì)豐度顯著降低(P<0.05)；復(fù)合益生菌與APS對(duì)糞便樣品中乳桿菌屬相對(duì)豐度存在互作效應(yīng)趨勢(shì)(P=0.071)，與對(duì)照組相比，飼糧不添加APS時(shí)，復(fù)合益生菌組糞便樣品中乳桿菌屬相對(duì)豐度有下降趨勢(shì)(P=0.071)。

表6 生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物主要菌群屬水平上的相對(duì)豐度

圖1 生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物厚壁菌門和

2.4 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬糞中短鏈脂肪酸含量的影響

由表7可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加復(fù)合益生菌極顯著降低生長(zhǎng)育肥豬糞中乙酸和丙酸的含量(P<0.01)，同時(shí)顯著降低糞中丁酸的含量(P<0.05)。

表7 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬糞中短鏈脂肪酸含量的影響

3 討 論

3.1 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

研究表明，益生菌可提高動(dòng)物日增重和飼料轉(zhuǎn)化率[7]?？莶菅挎邨U菌可以分泌多種促進(jìn)消化的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶，并能夠在代謝過程中產(chǎn)生多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(維生素、蛋白質(zhì)、氨基酸、促生長(zhǎng)因子和有機(jī)酸等)，進(jìn)而促進(jìn)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[8]。乳酸菌可以通過發(fā)酵碳水化合物來形成乳酸，從而調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道的pH，并激發(fā)胃蛋白酶加強(qiáng)胃腸的蠕動(dòng)，以此來提高動(dòng)物機(jī)體的消化能力[9]。復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能互作效應(yīng)的研究目前未見報(bào)道，但岑路等[6]使用名為“索比亞益生菌”的益生菌制劑與APS在斷奶仔豬上的研究表明，索比亞益生菌對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)有良好的促進(jìn)作用，且添加APS與其具有明顯的協(xié)同作用。此外，李樹鵬[1]在雛雞上的研究表明，合生元對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的提高并不比單一添加效果好。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬各時(shí)間段生長(zhǎng)性能無互作效應(yīng)；第29～56天，飼糧添加復(fù)合益生菌通過提高生長(zhǎng)育肥豬ADFI，從而顯著提高其F/G。而李浩等[10]在生長(zhǎng)育肥豬的研究則發(fā)現(xiàn)，在85～104日齡階段，復(fù)合益生菌組的ADG和ADFI顯著低于對(duì)照組，這于本研究結(jié)果不一致。

圖2 生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物乳桿菌屬、 毛螺菌科XPB1014群屬和顫螺旋菌科 NK4A214群屬的相對(duì)豐度

3.2 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

白蛋白和球蛋白含量反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝情況。杜泓明等[11]通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在仔豬飼糧中添加益生菌能夠一定程度上提高仔豬血液中總蛋白和白蛋白的含量。膽汁酸分子內(nèi)既含親水性的羥基和羧基，又含疏水性的甲基及烴核，故具有兩親性，可以通過膠束的形成促進(jìn)腸道對(duì)食物中脂類和脂溶性維生素的消化吸收，從而對(duì)脂代謝發(fā)揮調(diào)控作用[12]。在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)，蛋白質(zhì)通過一系列代謝的最終產(chǎn)物是尿素氮，通常人們將血液尿素氮的指標(biāo)作為斷定機(jī)體蛋白質(zhì)代謝與氨基酸平衡的依據(jù)[13]。白雅綺[14]研究表明，各組育肥豬血清中白蛋白、尿素氮含量等生化指標(biāo)差異不顯著，說明飼糧可溶性纖維和益生菌不影響育肥豬血清生化指標(biāo)。本試驗(yàn)研究結(jié)果與前人研究結(jié)果一致。

3.3 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物和短鏈脂肪酸含量的影響

動(dòng)物腸道是動(dòng)物體內(nèi)的消化器官和免疫器官，腸道中定植的微生物在動(dòng)物消化吸收和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著巨大作用。添加中草藥、益生菌等可以改變宿主的腸道菌群結(jié)構(gòu)[15]，進(jìn)而影響動(dòng)物消化吸收和健康。

α多樣性指數(shù)可以反映樣品微生物群落的豐富度和多樣性。Shannon指數(shù)反映群落物種的多樣性；Simpson指數(shù)綜合考量樣本中物種的豐富性和均勻度；Ace指數(shù)用于估算還沒被發(fā)現(xiàn)的物種的數(shù)量；Chao1指數(shù)判斷群落的物種豐富度；coverage為各組測(cè)序時(shí)發(fā)現(xiàn)的OTU序列的覆蓋率[16]。本研究結(jié)果顯示，飼糧添加APS顯著降低生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物的Ace指數(shù)和Chao1指數(shù)，表明APS降低了糞便微生物的豐富度。這可能跟APS的抑菌功能有關(guān)，李樹鵬[1]的APS體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明，50、100和200 μL 0.1%的APS水溶液對(duì)2株益生菌(乳酸菌和芽孢桿菌)和3株致病菌(葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌)均有抑制作用。

本試驗(yàn)中，生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物門水平上的主要菌群為厚壁菌門和擬桿菌門，厚壁菌門與擬桿菌門主要通過酵解動(dòng)物體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)成分而參與機(jī)體新陳代謝。相對(duì)擬桿菌門，厚壁菌門能產(chǎn)生更多的短鏈脂肪酸和脂質(zhì)產(chǎn)物，從而促進(jìn)機(jī)體脂質(zhì)的沉積[17-18]，厚壁菌門/擬桿菌門值也是衡量動(dòng)物機(jī)體脂質(zhì)沉積和生產(chǎn)性能的標(biāo)志之一[19-21]。白雅綺[14]研究表明，在低可溶性纖維飼糧中添加益生菌可顯著提高試驗(yàn)豬糞便樣品中厚壁菌門相對(duì)豐度，降低擬桿菌門相對(duì)豐度，說明飼糧中添加益生菌可促進(jìn)育肥豬的脂質(zhì)沉積。但Koceak等[22]在研究了50個(gè)肥胖患者與30個(gè)正常人的腸道菌群后發(fā)現(xiàn)，肥胖患者的腸道菌群多樣性增加，而厚壁菌門/擬桿菌門值卻沒有明顯增加。本研究結(jié)果顯示，飼糧添加復(fù)合益生菌有降低厚壁菌門相對(duì)豐度和提高擬桿菌門相對(duì)豐度以及降低厚壁菌門/擬桿菌門值的趨勢(shì)，這與前人研究結(jié)果均不盡相同，由此看來，通過改變厚壁菌門與擬桿菌門的比值來影響肥胖或脂質(zhì)沉積的作用還需進(jìn)一步研究。

乳桿菌屬為腸道有益菌，可以促進(jìn)大分子蛋白和乳糖的分解，生成有利于機(jī)體的小分子肽、氨基酸和乳酸，還可抑制有害菌繁殖，維護(hù)腸道微生態(tài)平衡[14]。目前，益生菌制劑對(duì)動(dòng)物益生作用的主流觀點(diǎn)是益生菌可以增加動(dòng)物體內(nèi)有益菌數(shù)量，維持腸道菌群平衡，調(diào)節(jié)腸道免疫并提高生長(zhǎng)性能。本研究中，復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬糞便中乳桿菌屬相對(duì)豐度存在互作趨勢(shì)，表現(xiàn)在飼糧不添加APS時(shí)，復(fù)合益生菌組糞便樣品中乳桿菌屬相對(duì)豐度有下降趨勢(shì)，這與主流觀點(diǎn)不一致。李浩等[10]研究也發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)中果寡糖組的乳桿菌相對(duì)豐度最高，而復(fù)合益生菌組和合生元組的乳桿菌相對(duì)豐度則較低，并認(rèn)為其原因可能是復(fù)合益生菌的添加抑制了乳桿菌的生長(zhǎng)，但目前并無相關(guān)研究報(bào)道證實(shí)這一說法。筆者認(rèn)為，這與益生菌的不穩(wěn)定性有關(guān)。在益生菌制劑中，發(fā)揮作用的不止是活菌，死菌和益生菌的代謝產(chǎn)物也具有一定的生物學(xué)功能，不過目前專門針對(duì)這2種成分的研究較少。目前對(duì)于益生菌制劑有效成分含量的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)一般是出廠時(shí)的活菌數(shù)，但其中的活菌在保存和在動(dòng)物胃中消化時(shí)極易失活，從而導(dǎo)致真正到達(dá)腸道特定部位進(jìn)行定植的益生菌極少。此外，包括本研究在內(nèi)的關(guān)于益生菌的大量研究在添加益生菌時(shí)，為減少工作量，均通過在動(dòng)物基礎(chǔ)飼糧中添加一定量的益生菌進(jìn)行飼喂，而不是在每次飼喂時(shí)通過拌料的形式添加，因此由于混入飼糧益生菌的保存條件大打折扣，影響益生菌的活性，這就使得平均分布到每一口飼糧的益生菌雖通過長(zhǎng)期飼喂，其中的活菌、死菌、代謝產(chǎn)物對(duì)免疫、生長(zhǎng)性能存在一定的效果，但卻因?yàn)橥鈦砘罹鸁o法在短期內(nèi)達(dá)到一定數(shù)量以成為優(yōu)勢(shì)菌群，導(dǎo)致有幸進(jìn)入動(dòng)物腸道的外來活菌在腸道中定植困難，進(jìn)而也難以通過定植影響相應(yīng)的微生物結(jié)構(gòu)。顫螺旋菌科NK4A214群屬目前作用尚不明確，故在此不做討論。毛螺菌科對(duì)病原菌具有拮抗作用[23]，本研究結(jié)果顯示，飼糧單獨(dú)添加復(fù)合益生菌或APS時(shí)，復(fù)合益生菌組和APS組生長(zhǎng)育肥豬糞便中毛螺菌科XPB1014群屬相對(duì)豐度顯著提高，而與復(fù)合益生菌組和APS組相比，復(fù)合益生菌+APS組毛螺菌科XPB1014群屬相對(duì)豐度顯著降低，這表明飼糧單獨(dú)添加復(fù)合益生菌或APS可以通過提高毛螺菌科分類下XPB1014群屬的相對(duì)豐度來抑制有害菌的生長(zhǎng)，但復(fù)合益生菌和APS同時(shí)添加會(huì)引起反向的效果。

短鏈脂肪酸是未消化的食物殘?jiān)诤竽c經(jīng)微生物發(fā)酵產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物[24]，參與宿主的能量代謝和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化[25-26]，它們的主要產(chǎn)生菌為毛螺旋菌屬、真桿菌屬、瘤胃球菌屬、梭菌屬、乳桿菌屬和雙歧桿菌屬等[24，27]。王漢星等[28]研究表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌能顯著提高糞便中短鏈脂肪酸的含量和乳桿菌的相對(duì)豐度。本研究結(jié)果顯示，飼糧添加復(fù)合益生菌極顯著降低生長(zhǎng)育肥豬糞中乙酸和丙酸的含量，同時(shí)顯著降低生長(zhǎng)育肥豬糞中丁酸的含量，這與前人研究結(jié)果不一致，原因可能與本研究中梭菌屬、乳桿菌屬等短鏈脂肪酸產(chǎn)生菌的相對(duì)豐度降低有關(guān)。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下：

① 飼糧添加復(fù)合益生菌通過提高生長(zhǎng)育肥豬ADFI，從而顯著提高相應(yīng)F/G，同時(shí)降低糞便中厚壁菌門/擬桿菌門值及短鏈脂肪酸含量；

② 飼糧添加APS顯著降低了生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物的多樣性；

③ 復(fù)合益生菌與APS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)無互作效應(yīng)，對(duì)生長(zhǎng)育肥豬糞便微生物中的毛螺菌科XPB1014群屬的相對(duì)豐度存在互作效應(yīng)，但表現(xiàn)為拮抗作用。