李元鳳，王亞超，范明東，敖 翔，申小云*，何 健*

（1.西南科技大學生命科學與工程學院，四川綿陽 621000；2.四川鐵騎力士集團馮光德實驗室，四川綿陽 621000）

雞蛋是人們的日用食品，但由于膽固醇含量高，消費者對蛋及蛋制品消費產(chǎn)生了一定心里障礙[1]。辣木和諾麗果富含多種活性成分，可以提高機體抗氧化能力、降低膽固醇。辣木廣泛種植于熱帶和亞熱帶國家和地區(qū)，風干辣木葉中富含粗蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、多糖以及鈣、磷等多種營養(yǎng)成分，還含有較高的總黃酮[2]。諾麗果化學成分主要包括蒽醌類、黃酮類、糖苷類等物質(zhì)，具有抗菌、抗氧化、抗炎等功能[4]。辣諾提取物從辣木和諾麗果中提取，主要含有總黃酮（0.92%）、總皂苷（0.87%）和植物多糖（1.84%）等成分[3]，具有抗菌、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫等功能[4-6]。研究表明，產(chǎn)蛋高峰期蛋雞飼糧中添加辣諾提取物可以一定程度地改善料蛋比和蛋殼強度，還可以顯著降低蛋黃膽固醇，改善蛋黃顏色[3]，但對蛋形指數(shù)、蛋殼強度、哈氏單位等無影響[3]。辣諾提取物在蛋雞[3]、奶牛[7]和豬[8-9]上已取得了良好的應用效果，但有關產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞添加辣木和諾麗果的研究尚未見報道。本試驗旨在研究產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加辣諾提取物對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、血清抗氧化及生化指標的影響，為產(chǎn)蛋后期蛋雞健康養(yǎng)殖和蛋品質(zhì)提升提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 辣諾提取物（商品名：辣諾素，四川偉康生物科技有限公司）由25% 的辣木葉水提物、15%的諾麗果水提物和60% 的麥芽糊精組成[3]，其有效成分為總黃酮0.92%，總皂苷0.87%和植物多糖1.84%[3]。羅曼粉蛋雞由圣迪樂村梓潼養(yǎng)殖基地提供。

1.2 試驗設計 選取產(chǎn)蛋率相近、健康的60 周齡羅曼粉蛋雞300 只，隨機分為2 個組，每組10 個重復，每個重復15 只雞。對照組飼喂基礎飼糧，辣諾提取物組在基礎飼糧中添加500 mg/kg 辣諾提取物。預試期2 周，正試期8 周。飼糧組成和營養(yǎng)成分見表1。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理 動物試驗于2020 年3 月—5 月在四川鐵騎力士集團馮光德實驗室花荄試驗基地開展。試驗蛋雞飼養(yǎng)于2 層階梯式籠養(yǎng)設施中，1 個籠位飼養(yǎng)3 只蛋雞。自由采食和飲水，采用自然光照，不足16 h 時用人工光照補充。自然通風結合縱向負壓通風，雞舍日常飼養(yǎng)管理（如環(huán)控、消毒、飼喂、清糞以及免疫程序等）參照馮光德實驗室花荄試驗基地規(guī)定執(zhí)行。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 試驗期間每天以重復為單位收集雞蛋，稱重，統(tǒng)計產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、破蛋和異常蛋（畸形蛋、重量低于45 g 的小蛋等），計算產(chǎn)蛋量和平均蛋重。每周統(tǒng)計每個重復的采食量，計算平均日采食量，統(tǒng)計產(chǎn)蛋率和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì)和貨架期 試驗第14、28、42、56 天，每個處理隨機收集雞蛋15 枚，測定蛋白高度、哈氏單位、蛋形指數(shù)、蛋黃顏色、蛋殼強度以及蛋殼厚度等，取其平均值。蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色采用多功能蛋品質(zhì)分析儀（EMT-7300ΙΙ，日本TOUHOKU RHYTHM 公司）測定。蛋的縱徑、橫徑采用電子數(shù)顯卡尺（0.01 mm，桂林廣陸數(shù)字測控股份有限公司）測定，計算蛋形指數(shù)。蛋殼鈍端、中部和銳端的厚度采用電子游標卡尺分別測量，取其平均值。蛋殼強度采用蛋殼強度測定儀（RHDQ200 型，廣州潤湖儀器有限公司）測定。在正試期第28 天，每個處理隨機抽取15 枚雞蛋常溫儲藏7 d 后進行蛋品質(zhì)測定。

1.4.3 血清抗氧化和生化指標 試驗第28 和56 天早上，產(chǎn)蛋雞禁食12 h 后，從每個重復中隨機選取1 只體重相近的蛋雞，翅靜脈采血，3 600 r/min 離心10 min，用移液槍吸取上層血清，存于無菌的1.5 mL EP 管中，-80℃凍存。采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定血清谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）以及總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）含量。血清樣品送到成都揚克斯生物有限公司進行檢測，測定方法按照試劑盒說明書操作。

1.5 統(tǒng)計分析 采用Excel 2010 初步處理原始數(shù)據(jù)，用SPSS 17.0 進行獨立樣本t檢驗分析差異顯著性。結果以平均值± 標準誤表示，P＜0.05 表示差異顯著，0.05＜P＜0.10 表示有趨勢。

2 結果

2.1 辣諾提取物對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 從表2 可見，辣諾提取物組蛋雞試驗全期的平均日采食量高于對照組（P＜0.05），平均蛋重比對照組高1.59 g（絕對值，P=0.070）。

2.2 辣諾提取物對雞蛋蛋品質(zhì)和貨架期的影響 從表3可見，與對照組相比，辣諾提取物組第2 周和第4 周蛋白高度分別比對照組高9.70%（P=0.074）和8.27%（P=0.052），第6 周和第8 周蛋白高度分別比對照組高11.93%和12.12%（P＜0.05）。試驗第4 周的雞蛋儲藏1 周后蛋品質(zhì)下降較快，蛋白高度下降3 個百分點以上，哈氏單位下降25 個百分點以上，但2 個處理間差異不顯著。

表3 辣諾提取物對雞蛋蛋品質(zhì)和貨架期的影響

2.3 辣諾提取物對蛋雞血清抗氧化指標的影響 由表4可見，辣諾提取物組第4 周血清MDA 含量比對照組低17.17%（P=0.082）。試驗第8 周，2 個處理組GSH-Px、T-AOC、SOD 和MDA 差異均不顯著。

表4 辣諾提取物對蛋雞血清抗氧化指標的影響

2.4 辣諾提取物對蛋雞血清生化指標的影響 由表5 可見，辣諾提取物組第4 周血清TG 和LDL 分別比對照組低28.00% 和32.18%（P＜0.05）。試驗第8 周，2 個處理組TC、TG、LDL 和HDL 差異均不顯著。

表5 辣諾提取物對蛋雞血清生化指標的影響 mmol/L

3 討論

3.1 辣諾提取物對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 辣諾提取物主要活性成分是總黃酮、總皂苷和植物多糖。楊玉等[10]研究表明，在蛋雞飼糧中添加苜草素（主要成分為黃酮、皂苷和多糖）顯著提高了產(chǎn)蛋率，降低了料蛋比。陳志敏等[3]選用540 只22 周齡海蘭褐蛋雞，發(fā)現(xiàn)在飼糧中分別添加500、750 mg/kg 辣諾提取物有改善料蛋比的趨勢。Mansoub[11]研究發(fā)現(xiàn)，在36 周齡海蘭褐蛋雞飼糧中添加200 mg/kg 苜草素時產(chǎn)蛋率和產(chǎn)蛋量最高，而添加150 mg/kg 苜草素時料蛋比最低。謝泰華[12]分別在產(chǎn)蛋前期和產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加500 和1 000 mg/kg苜草素，發(fā)現(xiàn)蛋雞產(chǎn)蛋率有顯著提高，料蛋比則降低，但平均蛋重和日采食量不受影響。本試驗結果表明，添加辣諾提取物不影響蛋雞的產(chǎn)蛋率和料蛋比，但平均日采食量顯著提高，與Kakengi 等[13]的研究結果一致。本試驗全期蛋雞產(chǎn)蛋率均在90%以上，遠高于相同日齡蛋雞產(chǎn)蛋率水平[10]，可能是蛋雞繁殖性能受到辣諾提取物中黃酮的直接調(diào)控，從而延緩了高齡蛋雞的產(chǎn)蛋率下降。本試驗結果與前人研究有較大出入，可能與蛋雞品種、飼糧營養(yǎng)水平以及調(diào)控營養(yǎng)成分的利用率[14]等有關。

3.2 辣諾提取物對雞蛋蛋品質(zhì)和貨架期的影響 蛋形指數(shù)、蛋殼強度、蛋殼厚度、蛋白高度和哈氏單位等是衡量蛋品質(zhì)好壞主要常用指標[10]。哈氏單位可直接反映雞蛋的新鮮程度與蛋白品質(zhì)[15]。研究發(fā)現(xiàn)，苜草素可以一定程度增強蛋殼強度[10]，辣諾提取物不影響高峰期蛋雞蛋殼強度和蛋殼厚度[3]。侯永剛[16]研究發(fā)現(xiàn)，在400 日齡海蘭褐蛋雞飼糧中添加60 mg/kg 苜蓿皂苷，蛋黃和全蛋膽固醇含量降低，蛋殼厚度顯著提高。本試驗研究表明，在60 周齡的蛋雞飼糧中添加500 mg/kg辣諾提取物，雖然哈氏單位無顯著變化，但試驗第2 周雞蛋蛋白高度有所提高，第6 周達到顯著水平，說明辣諾提取物中的活性物質(zhì)增強了雞蛋蛋白質(zhì)代謝，從而使雞蛋中蛋白質(zhì)的沉積提高[17]。但儲藏7 d 后蛋品質(zhì)（蛋白高度和哈氏單位）下降很快，說明辣諾提取物雖然能改善鮮蛋蛋品質(zhì)，但不能延長雞蛋貨架期。

3.3 辣諾提取物對蛋雞血清抗氧化和生化指標的影響產(chǎn)蛋后期蛋雞機體氧化衰老速度加快，但持續(xù)產(chǎn)蛋蛋雞代謝依舊旺盛，導致大量活性氧自由基產(chǎn)生。積累的自由基會引起脂質(zhì)過氧化，從而細胞功能受到損傷[18]。動物健康極容易影響機體抗氧化能力，而GSH-Px、T-SOD、T-AOC 和MDA 是體內(nèi)反映機體抗氧化能力的主要指標[10]。研究表明，辣諾提取物中的活性物質(zhì)可以調(diào)節(jié)免疫、增強抗氧化能力[4-6]。在蛋雞飼糧中添加1 000 mg/kg 苜草素，血漿GSH-Px、T-SOD 和T-AOC活性顯著提高，血漿MDA 含量降低[10]。本研究結果表明，產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加500 mg/kg 辣諾提取物對血清GSH-Px、T-AOC、SOD 均無顯著影響；血清第4 周MDA 含量有一定程度降低，TG 含量顯著降低，表明辣諾提取物可能通過調(diào)控血清脂質(zhì)代謝相關因子提高了蛋雞的脂質(zhì)代謝能力，從而減少了其在體內(nèi)的沉積，改善了動物健康。LDL 是一種脂蛋白顆粒，在體內(nèi)運載膽固醇進入外周組織細胞后被氧化成氧化低密度脂蛋白。過量的氧化低密度脂蛋白攜帶的膽固醇積存在動脈壁上，長期積累后容易引起動脈硬化。本研究發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加500 mg/kg 辣諾提取物顯著降低了第4 周蛋雞血清的LDL，減少了血脂沉積，提高了蛋雞的健康水平；但試驗第8 周血清TG 和LDL差異均不顯著，說明辣諾提取物調(diào)控產(chǎn)蛋后期蛋雞脂質(zhì)代謝可能具有短期效應，還需進一步深入研究。

黃酮是一種很強的抗氧化劑，可以有效清除體內(nèi)的氧自由基，改善血液循環(huán)，降低膽固醇。皂苷具有抗腫瘤、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性。多糖具有免疫抑制作用，它能減少細胞毒性、機體抗感染能力下降、對骨髓造血細胞的繁殖抑制等副作用，還可以通過抑制病毒對細胞的吸附從而起到抗病毒作用，也能降低血糖。雖然黃酮、皂苷和多糖都具有獨特的生理功能，但因其來源及提取工藝差異，導致不同產(chǎn)品有效成分差異大，而且缺乏從辣諾提取物中單獨提純的研究報道，推測本研究效果是由辣諾提取物中總黃酮、總皂苷和多糖協(xié)同作用的結果，但還需進一步驗證。

4 結論

本試驗表明，在產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加辣諾提取物不影響蛋雞生產(chǎn)性能，但可以提高4 周內(nèi)雞蛋部分蛋品質(zhì)，改善蛋雞健康狀況。