劉珍妮，雷小文，孔智偉，譚東海，陳榮強(qiáng)，謝華亮，鐘云平，蘇 州

（贛州市畜牧研究所，贛南科學(xué)院，江西贛州 341401）

甜菊是一種多年生的灌木性植物，在巴西、巴拉圭、日本、中國(guó)、韓國(guó)、美國(guó)、加拿大等國(guó)家和歐洲部分地區(qū)被用作天然甜味劑，每年因提取甜菊糖或甜菊糖苷產(chǎn)生了大量甜菊渣[1]。目前，大量甜菊渣利用率低、處理不當(dāng)，不僅造成了甜菊渣資源的浪費(fèi)，更容易超出環(huán)境的自凈能力造成周邊環(huán)境質(zhì)量下降[2]。研究表明，經(jīng)提取后的甜菊渣中含有大量的粗蛋白質(zhì)、氨基酸、纖維素等物質(zhì)，這些成分可發(fā)揮特殊作用，因此甜菊渣可代替部分動(dòng)物的基礎(chǔ)日糧以實(shí)現(xiàn)資源的充分利用[3]。然而，甜菊渣中粗纖維水平較高，將甜菊渣作為飼料并大比例添加的使用效果并不理想[4]。利用混合微生物菌種進(jìn)行發(fā)酵處理甜菊渣，可降低甜菊渣的粗纖維水平，增強(qiáng)消化吸收利用效果，有助于提高發(fā)酵甜菊渣飼用價(jià)值[5]。已有關(guān)于羊和肉兔等動(dòng)物飼喂甜菊渣的試驗(yàn)報(bào)道，且取得良好效果[6-7]。而番鴨作為耐粗飼的品種之一，還未有這方面的研究報(bào)道。本研究選擇利用乳酸菌和酵母菌對(duì)甜菊渣進(jìn)行發(fā)酵，分析發(fā)酵甜菊渣營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及其對(duì)番鴨生長(zhǎng)性能、屠宰性能、血清生化指標(biāo)及番鴨糞便成分的變化，為甜菊渣在番鴨健康養(yǎng)殖和節(jié)糧養(yǎng)殖應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 15 日齡黑羽公番鴨購(gòu)于福建莆田溫氏集團(tuán)；試驗(yàn)甜菊渣為甜菊提取甜菊糖苷后經(jīng)干制后過(guò)40目篩的副產(chǎn)品，購(gòu)于贛州贛縣譜賽科生物技術(shù)有限公司；乳酸菌（固態(tài)粉末狀，活菌數(shù)≥1×1011CFU/kg）和酵母菌（固態(tài)粉末狀，活菌數(shù)≥2×1011CFU/kg）分別為鄭州中廣環(huán)?？萍加邢薰竞桶茬鹘湍腹煞萦邢薰井a(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)日糧 選取15 日齡、體重相近的公番鴨360 只，隨機(jī)分為4 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15 只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。試驗(yàn)組分別以10%、15%、20%發(fā)酵甜菊渣替代等比例基礎(chǔ)日糧。預(yù)試期7 d，正試期48 d。采用網(wǎng)上平養(yǎng)方式，番鴨自由采食，充足飲水，按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 發(fā)酵甜菊渣的制備及其常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定 在已干燥的甜菊渣中加水?dāng)嚢?，水分控制?0%～40%，隨后加入2‰復(fù)合菌劑（低糖高活性干酵母粉和乳酸菌比例為1:1）混勻發(fā)酵（30℃，72 h）。隨后從3 個(gè)完成發(fā)酵的呼吸袋各取甜菊渣50 g，采樣方式為5 點(diǎn)采樣法，測(cè)定樣品的粗蛋白質(zhì)（GB/T 6432-2018）、粗脂肪（GB/T 6433-2006）、粗纖維（GB/T 6434-2006）、水分（GB/T 6435-2014）、鈣（GB/T 6436-2018）、磷（GB/T 6437-2018）、灰分（GB/T 6438-2007）含量，并與發(fā)酵前甜菊渣進(jìn)行比較[8-14]。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能 分別于飼養(yǎng)的第1 天和第55 天測(cè)定番鴨的初始重及出欄重，并定時(shí)記錄其采食量，計(jì)算各處理組生長(zhǎng)性能[9]。

1.4.2 屠宰性能及器官指數(shù) 當(dāng)番鴨長(zhǎng)至70 日齡時(shí)（即飼養(yǎng)的第55 天），從翅靜脈取血樣，靜置析出血清后，3 000 r/min 離心15 min，取上清分裝，-20℃保存。隨后按照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語(yǔ)和度量計(jì)算方法》（ΝY/T 823-2020）進(jìn)行屠宰測(cè)定[15]。

1.4.3 血清生化指標(biāo) 參照李曼等[16]的步驟和方法將

1.4.2 中分離的血清以日立7600 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比（A/G）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、谷草/谷丙（AST/ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、乳酸脫氫酶（LDH）、甘油三酯（TG）、膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的水平。

1.4.4 番鴨糞便成分 于42 日齡、70 日齡每個(gè)重復(fù)按照五點(diǎn)取樣法分別取新鮮鴨糞60.0 g 左右，自然風(fēng)干，同一重復(fù)5 個(gè)取樣點(diǎn)樣品混合成1 個(gè)樣品，再把42 日齡、70 日齡2 個(gè)時(shí)間點(diǎn)2 個(gè)樣品混合均勻成1 個(gè)樣品，參考《復(fù)混肥料中游離水含量的測(cè)定 真空烘箱法》（GB/T 8576-2010）測(cè)定番鴨糞便的游離水含量，參考《有機(jī)肥料》（ΝY 525-2012）的方法檢測(cè)鴨糞中氮、磷、鉀、有機(jī)質(zhì)和pH 水平[17-18]。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)選擇Graphpad prism 8.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，結(jié)果采用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示，LSD 檢驗(yàn)法進(jìn)行各組組間的多重比較，以P＞0.05 表示差異不顯著，P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)酵前后甜菊渣營(yíng)養(yǎng)成分改變 如表2 所示，與發(fā)酵前甜菊渣相比，發(fā)酵后甜菊渣的粗蛋白、粗灰分及水分含量分別升高30.59%、176.57%、348.33%（P＜0.05），粗纖維含量降低22.39%（P＜0.05）。

表2 甜菊渣發(fā)酵前后的營(yíng)養(yǎng)成分分析 %

2.2.發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨生長(zhǎng)性能的影響 如表3 所示，10%、15%、20%發(fā)酵甜菊渣組的平均日增重、平均日采食量及耗料增重比與對(duì)照組的差異均不顯著；此外，各試驗(yàn)組的死亡率均下降。如表4 所示，相比于對(duì)照組，10%、15%、20%發(fā)酵甜菊渣組的增重成本分別下降12.01%、12.38%、8.94%。

表3 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨生長(zhǎng)性能及經(jīng)濟(jì)效益的影響

2.3 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨屠宰性能及器官指數(shù)的影響 如表4 所示，與對(duì)照組相比，10%、15%、20% 發(fā)酵甜菊渣組的腹脂率分別降低17.29%（P＞0.05）、56.39%（P＜0.05）、54.14%（P＜0.05），腿肌率分別提高4.07%（P＞0.05）、20.57%（P＜0.05）、35.95%（P＜0.05），肝臟指數(shù)分別提高18.58%（P＜0.05）、17.31%（P＜0.05）、19.32%（P＜0.05），肌胃指數(shù)分別提高20.21%（P＜0.05）、22.47%（P＜0.05）、29.94%（P＜0.05），腺胃指數(shù)分別提高8.25%（P＞0.05）、3.78%（P＞0.05）、28.52%（P＜0.05）。

表4 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨屠宰性能及器官指數(shù)的影響

2.5 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨血清生化指標(biāo)的影響 如表5 所示，15% 發(fā)酵甜菊渣組的TP 和GLB 及AST/ALT 低于對(duì)照組（P＜0.05）；10% 發(fā)酵甜菊渣組的ALB 及HDL-TC 水平，15%、20% 組的ALT、AST 及LDH 水平高于對(duì)照組（P＜0.05）。

表5 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨血清生化指標(biāo)的影響

2.6 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨糞便成分的影響 如表6 所示，各試驗(yàn)組番鴨糞便的總氮水平較對(duì)照組分別低23.21%（P＜0.05）、9.28%（P＞0.05）、10.97%（P＜0.05），水分含量較對(duì)照分別低21.38%（P＞0.05）、51.35%（P＜0.05）、52.83%（P＜0.05）。

表6 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨糞便成分的影響

3 討論

3.1 發(fā)酵甜菊渣營(yíng)養(yǎng)成分的變化 乳酸菌活菌內(nèi)及其代謝產(chǎn)物中含有較高的超氧化物歧化酶，能分解常溫下不易分解的木質(zhì)素和纖維素[19]。酵母菌含有較高的粗蛋白質(zhì)、氨基酸及多種維生素，還含有能夠降解粗纖維及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的酶（α-淀粉酶、纖維素酶、半纖維素酶等）。乳酸菌和酵母菌聯(lián)合應(yīng)用不僅能降解甜菊渣中的粗纖維，還能將降解產(chǎn)物及飼料中外源的無(wú)機(jī)氮源轉(zhuǎn)變?yōu)樽陨砭w蛋白[20]。因此，發(fā)酵后甜菊渣的粗蛋白質(zhì)顯著提高了30.59%，而粗纖維水平則顯著下降了22.39%。甜菊渣經(jīng)發(fā)酵后其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和飼用價(jià)值得到提高。

3.2 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨生長(zhǎng)性能和經(jīng)濟(jì)效益的影響 本研究結(jié)果表明，發(fā)酵后甜菊渣的粗蛋白質(zhì)水平低于基礎(chǔ)飼糧，而其粗纖維水平遠(yuǎn)高于基礎(chǔ)飼糧。因此，選擇用發(fā)酵甜菊渣替代部分基礎(chǔ)飼糧，不僅降低粗蛋白質(zhì)的攝入及減少能值水平，還能提高飼喂的粗纖維水平。而當(dāng)發(fā)酵甜菊渣替代10%、15% 基礎(chǔ)日糧時(shí)，其耗料增重比有下降趨勢(shì)，這是由于乳酸菌和酵母菌可通過(guò)自身產(chǎn)生的消化酶降解甜菊渣中大量的粗纖維，同時(shí)利用甜菊渣的降解產(chǎn)物合成了氨基酸、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[21]。而發(fā)酵甜菊渣替代基礎(chǔ)日糧的比例至20% 時(shí)，耗料增重比升高，抑制了動(dòng)物生長(zhǎng)，這與過(guò)多的乳酸菌和酵母菌進(jìn)入腸道耗費(fèi)了動(dòng)物額外的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)[22]。此外，各試驗(yàn)組的飼料成本及增重成本均下降，說(shuō)明飼喂發(fā)酵甜菊渣可提高番鴨養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。

3.3 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨屠宰性能及器官指數(shù)的影響 動(dòng)物的肉用性能可以選擇屠宰率和全凈膛率作為主要的參考標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)屠宰率大于80%、全凈膛率大于60% 時(shí)，認(rèn)為肉用性能良好[23]。使用發(fā)酵甜菊渣替代部分基礎(chǔ)日糧時(shí)，番鴨的屠宰率為82.14%～82.94%，全凈膛率為68.70%～70.03%，表明使用發(fā)酵甜菊渣后未影響番鴨肉用性能且表現(xiàn)良好。甜菊具有降血糖和抗高脂性質(zhì)的功效[24]。本研究結(jié)果顯示，15%和20%發(fā)酵甜菊渣組較對(duì)照組的腹脂率顯著降低，表明甜菊渣替代部分基礎(chǔ)日糧可顯著降低番鴨脂肪含量，符合大眾的消費(fèi)習(xí)慣。而使用發(fā)酵甜菊渣后番鴨腿肌率、肝臟指數(shù)、肌胃指數(shù)和腺胃指數(shù)的上升，表明發(fā)酵甜菊渣能夠一定程度上促進(jìn)番鴨肉用性能及其肝臟的代謝功能和消化系統(tǒng)功能。

3.4 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨血清生化指標(biāo)的影響 動(dòng)物血清生化指標(biāo)可反映動(dòng)物的生理代謝和健康情況[25]。TP 可分為ALB 和GLB，ALB 主要通過(guò)機(jī)體肝臟合成和小腸吸收而來(lái)，GLB 則主要由機(jī)體的免疫器官產(chǎn)生[26]。一般情況下，TP、ALB 或GLB 偏低均可代表動(dòng)物免疫能力不足[27]。本研究結(jié)果顯示，10% 發(fā)酵甜菊渣組的TP、ALB 及GLB 水平均略高于對(duì)照組；而15%、20%發(fā)酵甜菊渣組的TP、ALB 及GLB 水平則低于對(duì)照組，表明發(fā)酵甜菊渣替代10% 基礎(chǔ)日糧不影響番鴨的免疫功能，且具有一定的促進(jìn)趨勢(shì)，而當(dāng)替代量增加至15%和20%時(shí)，由于蛋白質(zhì)水平攝入降低導(dǎo)致TP、ALB 及GLB 水平下降。

當(dāng)肝臟功能受損時(shí)會(huì)導(dǎo)致肝細(xì)胞裂解，使肝細(xì)胞內(nèi)的ALT 和AST 釋放，從而導(dǎo)致機(jī)體血清中的ALT 和AST 水平升高[28]。本研究發(fā)現(xiàn)，15%、20% 發(fā)酵甜菊渣組ALT、AST 水平均顯著高于對(duì)照組，表明使用發(fā)酵甜菊渣替代15%、20% 基礎(chǔ)日糧可能會(huì)導(dǎo)致番鴨肝臟受損。此外，AST/ALT 升高往往代表肝功能受損，且比值越高，肝損傷越嚴(yán)重[29]。本研究結(jié)果顯示，15%發(fā)酵甜菊渣組的AST/ALT 較對(duì)照組顯著提高47.68%。由此可見，發(fā)酵甜菊渣替代15% 基礎(chǔ)日糧對(duì)番鴨肝臟功能影響最大，不適用于番鴨的健康養(yǎng)殖，其具體機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

番鴨血清ALP 降低從側(cè)面反映出機(jī)體對(duì)飼料中鈣、磷的充分吸收利用[30]。本研究中，10%發(fā)酵甜菊渣組ALP 水平顯著低于對(duì)照組，表明飼喂10%發(fā)酵甜菊渣有助于番鴨對(duì)飼料中鈣、磷的利用和轉(zhuǎn)化，能夠促進(jìn)番鴨生長(zhǎng)性能。

HDL-C 是血漿中體積最?。?～17 nm）、密度最大（1.063～1.210 kg/L）的脂蛋白，具有減少機(jī)體膽固醇沉積的作用[31]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，10% 發(fā)酵甜菊渣組血清中的HDL-C 含量顯著高于對(duì)照組，而LDL-C 含量則與對(duì)照組差異不顯著，這表明發(fā)酵甜菊渣替代10%基礎(chǔ)日糧有助于提高番鴨對(duì)膽固醇的代謝能力，且不會(huì)形成對(duì)機(jī)體有害的LDL-C[32]。而用15%和20%發(fā)酵甜菊渣替代基礎(chǔ)日糧不會(huì)影響番鴨的膽固醇代謝功能。

3.5 發(fā)酵甜菊渣對(duì)番鴨糞便成分的影響 檢測(cè)番鴨排泄物中各個(gè)成分水平的變化可以反映番鴨基礎(chǔ)日糧制備與搭配的合理性[33]。本研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，10%、20%發(fā)酵甜菊渣組番鴨糞便中的總氮水平，15%、20%發(fā)酵甜菊渣組的水分含量均顯著下降；各試驗(yàn)組的各個(gè)糞污成分含量均低于對(duì)照組，表明發(fā)酵甜菊渣替代部分基礎(chǔ)番鴨日糧能使番鴨機(jī)體對(duì)飼料進(jìn)行充分吸收利用，減少番鴨糞便對(duì)環(huán)境的污染作用[34]。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)酵甜菊渣替代10%基礎(chǔ)日糧有提高番鴨飼料轉(zhuǎn)化率的趨勢(shì)，并有助于提高番鴨飼養(yǎng)的經(jīng)濟(jì)效益和降低番鴨糞便污染物的排放；替代量增加至15%和20%時(shí)，對(duì)番鴨的免疫功能和肝臟功能均有一定損害，說(shuō)明過(guò)量的發(fā)酵甜菊渣可能存在有一定的亞毒性作用。