電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法檢測SCCA 輔助診斷相關(guān)組織鱗癌的價值

許傳剛

鱗狀細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCCA)最早于1977 年從子宮頸鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中分離的亞片段,以SCCA1 和SCCA2 兩種亞型共同存在［1］。已發(fā)現(xiàn)SCCA1 和SCCA2 在宮頸癌中表達(dá)水平升高,且還發(fā)現(xiàn)在肺、頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌(squamous cell cancer,SCC)中表達(dá)于中度和分化良好的腫瘤［2］。為此,需選擇最佳臨床靈敏度、測定方法檢測SCCA1和SCCA2 表達(dá)水平以提高對鱗癌患者的診斷。電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法是目前臨床常規(guī)檢測SCCA的方法,由于檢測原理及針對抗原表位的不同,其檢測結(jié)果存在差異,故本研究將探討電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法檢測SCCA 輔助診斷相關(guān)組織鱗癌的價值,結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2019 年11 月～2020 年10 月收治的99 例確診鱗癌患者的血清標(biāo)本。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床、影像學(xué)或病理證實為鱗癌［3］；②均為原發(fā)性腫瘤；③尚未接受相關(guān)(手術(shù)、放化療)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并全身鱗狀上皮組織病變者；②合并高血壓、糖尿病等基礎(chǔ)疾病者；③已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者。其中男40 例(40.40%),女59 例(59.60%)；年齡40～60 歲,平均年齡(53.54±9.25)歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn),患者及家屬簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器 流式熒光發(fā)光法：SCCA 檢測試劑盒(上海透景)和多功能流式點陣儀Luminex 200TM(上海透景)。電化學(xué)發(fā)光法：SCCA 檢測試劑盒及配套校準(zhǔn)品和定標(biāo)液(德國羅氏),羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀(型號：cobasE602)。均根據(jù)廠家原裝或附帶的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品進(jìn)行校準(zhǔn)和質(zhì)量控制。

1.2.2 檢查方法 采集研究對象清晨空腹肘靜脈血2 ml 置于含分離膠和促凝劑的真空采血管中,靜置30 min 后,以3500 r/min,離心5 min,取血清,置于零下20℃環(huán)境中保存。操作過程中需全程佩戴手套和口罩,防止外源性污染。標(biāo)本測定和分析由兩名高年資主治檢驗醫(yī)師完成。

1.3 觀察指標(biāo) 根據(jù)金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果,對比兩種方法在相關(guān)組織鱗癌(肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌)中的診斷符合率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理結(jié)果 9 例鱗癌患者病理檢查結(jié)果顯示,肺鱗癌41 例(41.41%),宮頸鱗癌34 例(34.34%),頭頸部鱗癌24 例(24.25%)。

2.2 兩種檢查方式的鱗癌診斷符合率對比 電化學(xué)發(fā)光法對肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌診斷符合率分別為63.41%、61.75、50.00%,均高于流式熒光發(fā)光法的41.46%、35.29%、20.83%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩種檢查方式的鱗癌診斷符合率對比(n,%)

3 討論

SCCA 是目前輔助診斷鱗癌特異性較好的腫瘤標(biāo)志物之一,在多種鱗狀上皮細(xì)胞來源的惡性腫瘤組織中呈高表達(dá)水平。SCCA 與宮頸癌分期、疾病復(fù)發(fā)、進(jìn)展等密切相關(guān)［4］；在肺癌中,SCCA 作為非小細(xì)胞癌標(biāo)志物,連續(xù)監(jiān)測該水平有助于評估療效［5］；在頭頸部鱗癌中,SCCA 水平可評估淋巴結(jié)受累程度,且該水平為頭頸部鱗癌患者獨立預(yù)后因子［6］?；赟CCA 水平在鱗癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物中具有較高的特異度和靈敏度,故檢測SCCA 水平是輔助鱗癌的早期診斷及治療監(jiān)測的有效手段。流式熒光發(fā)光法可通過靈活組合同時對多種目的分子進(jìn)行分析成為以往臨床較為常規(guī)采用的檢測手段,但既往研究表明,該檢測方式會因不同微球的光譜對產(chǎn)品性能造成影響,而導(dǎo)致對宮頸鱗癌、肺鱗癌診斷陽性符合率相對較低［7］。近年來,隨著檢驗技術(shù)的不斷發(fā)展,電化學(xué)發(fā)光法因儀器設(shè)備簡單、操作方便等逐漸受到重視。

電化學(xué)發(fā)光法包括化學(xué)發(fā)光和電發(fā)光兩個部分,是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。是將三聯(lián)吡啶釕和三丙胺作為電子供體,在電極表面發(fā)生進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移為原理。在電場中三聯(lián)吡啶釕可不斷向三丙胺提供電子,進(jìn)而周而復(fù)始發(fā)光,以增強(qiáng)信號強(qiáng)度,更準(zhǔn)確判斷標(biāo)記物的理化特性,提高對鱗癌的診斷價值。

本研究中,99 例鱗癌患者病理檢查結(jié)果顯示,肺鱗癌41 例(41.41%),宮頸鱗癌34 例(34.34%),頭頸部鱗癌24 例(24.25%),說明在SCCA 在肺、宮頸及頭頸部廣泛表達(dá)。因SCCA 屬于抑制型絲氨酸蛋白酶抑制劑,其編碼基因位于染色體18q21.3 上,分別與SCCA1和SCCA2 基因相連,SCCA1 可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞抗程序性死亡能力,而SCCA2 則主要對糜蛋白酶樣蛋白激酶介導(dǎo)的炎性反應(yīng)進(jìn)行抵抗［8,9］,肺、宮頸、頭頸部組織中含有大量鱗狀上皮細(xì)胞,故其發(fā)生鱗癌幾率相對較高。

流式熒光發(fā)光法和電化學(xué)發(fā)光法均可對外周SCCA 總水平進(jìn)行檢測,本研究將兩種檢測方式對鱗癌診斷符合率對比發(fā)現(xiàn),電化學(xué)發(fā)光法對肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌診斷符合率分別為63.41%、61.75、50.00%,均高于流式熒光發(fā)光法的41.46%、35.29%、20.83%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。提示電化學(xué)發(fā)光法可提高對肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌診斷符合率。因流式熒光發(fā)光法是基于編碼微球和流式技術(shù)的高通量發(fā)光檢測技術(shù),但因不同微球的光譜會產(chǎn)生相互干擾和拖帶,對產(chǎn)品性能造成不同程度的影響,其次熒光微球初始信號是依靠免疫復(fù)合物交聯(lián)的藻紅蛋白產(chǎn)生,將其交聯(lián)形成免疫復(fù)合物后會降低儀器對微球的檢出效率,進(jìn)而影響診斷價值。而電化學(xué)發(fā)光法將化學(xué)發(fā)光法和電化學(xué)方法的優(yōu)點相結(jié)合,一方面可通過光學(xué)和電化學(xué)對標(biāo)記物進(jìn)行更全面研究,另一方面其靈敏度僅取決于電極白面附近分析物的濃度,極大方便分離與富集。且該反應(yīng)中N-強(qiáng)基琥珀酰胺和三丙胺可同時失去電子而發(fā)生氧化反應(yīng),能在電極表面循環(huán)反應(yīng)中產(chǎn)生多個光子,以增強(qiáng)光信號,更準(zhǔn)確判斷標(biāo)記物的理化特性,提高腺癌診斷價值。劉彥明等［10］的研究中對236 例確診為鱗癌患者分別采用電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法檢測顯示,電化學(xué)發(fā)光法對肺鱗癌、宮頸鱗癌診斷符合率明顯高于流式熒光發(fā)光法(52.04%VS 40.82%)、(57.14% VS 36.14%),與本研究結(jié)果相符。

綜上所述,相較于流式熒光發(fā)光法,電化學(xué)發(fā)光法檢測SCCA 可提高相關(guān)組織鱗癌的診斷符合率。