肺結(jié)核病人行痰結(jié)核桿菌檢查的意義及必要性分析

許悅

【摘要】目的：肺結(jié)核病人行痰結(jié)核桿菌檢查的意義及必要性分析。方法：研究自醫(yī)院抽取的16869例入院疑似患者，時(shí)間段為2020年1月至2021年1月期間，所有患者接受涂片培養(yǎng)（金標(biāo)準(zhǔn)）后，其中12660例接受痰抗酸染色冷染法檢查，其中4209例結(jié)核DNA檢查;分析痰抗酸染色冷染法、結(jié)核DNA檢查的結(jié)果。結(jié)果：以涂片診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)下，對(duì)12660例患者行痰抗酸染色冷染法診斷，陽性患者為321例，其中217例與病理診斷結(jié)果相同，符合率90.07%，其敏感度為14.72%，特異度為99.07%，陽性率為67.60%，陰性率為89.91%。以結(jié)核DNA檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)下，對(duì)4209例患者行痰抗酸染色冷染法診斷，陽性患者為331例，其中267例與病理診斷結(jié)果相同，符合率99.41%，其敏感度為91.44%，特異度為98.37%，陽性率為80.66%，陰性率為99.36%。兩種檢查方式的特異度差異小，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），結(jié)合DNA檢查方法的符合率、敏感度、陽性率、陰性率均高于抗酸染色冷染，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：結(jié)核DNA檢查檢出率較高、能夠?qū)Y(jié)核病的判斷、藥物療效、控制感染有著實(shí)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】肺結(jié)核;痰結(jié)核桿菌檢;意義;必要性

現(xiàn)階段結(jié)核病已成為嚴(yán)重威脅人類健康的傳染病。肺結(jié)核痰液中結(jié)核分枝桿菌是臨床診斷肺結(jié)核或鑒別肺結(jié)核等其他疾病的關(guān)鍵條件。檢測(cè)的結(jié)核分枝桿菌方法以痰結(jié)核DNA、涂片檢測(cè)為主。涂片方法調(diào)整很簡單，準(zhǔn)確率也較高，但較低的陽性率培養(yǎng)時(shí)耗時(shí)較多，難以滿足臨床需要。痰結(jié)核DNA、痰抗酸染色冷染法的技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于結(jié)核病的診斷，但在實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中還存在部分問題，如敏感性和特異性可能因?yàn)闄z測(cè)中的污染問題受影響等，這些問題可能導(dǎo)致痰結(jié)核DNA、痰抗酸染色冷染法產(chǎn)物出現(xiàn)相互污染，出現(xiàn)假陽性效果。因此本次研究選取我院疑似肺結(jié)核患者運(yùn)用涂片、痰抗酸染色冷染法、痰結(jié)核DNA檢查，觀察檢查的精確度。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究自醫(yī)院抽取16869例入院疑似患者作為研究對(duì)象，時(shí)間段為2020年1月至2021年1月期間，所有患者接受涂片培養(yǎng)（金標(biāo)準(zhǔn)）后，其中12660例接受痰抗酸染色冷染法檢查，其中4209例結(jié)核DNA檢查;分析痰抗酸染色冷染法、結(jié)核DNA檢查的結(jié)果。痰抗酸染色冷染法，男6672例，女5988例，年齡20歲～75歲，平均年齡（47.5±4.17）歲。結(jié)核DNA檢查，男2193例，女2016例，年齡20歲～78歲，平均年齡（48.1±4.25）歲。兩組資料差異（P>0.05）。

1.2 方法

所有患者在清晨從肺深部咳出痰留于一次性塑料瓶或夾層燒杯內(nèi)。

1.2.1 12660例患者使用手工冷染法 選擇膿性痰液、干酪樣痰液，增等體2%NaH液化，放入渦旋器中震蕩，離心10min，速度3000r/min，再使用新?lián)芷饪s痰液30μl涂橢圓形大約2.5cm×1.5cm，共涂3片，干燥后使用火固定。不加熱靜置10 min，水洗。加脫色液，脫色到涂片無紅色為止，水洗，在使用復(fù)染液，復(fù)染0.5min～1min，水洗，等干燥后再實(shí)施鏡檢。使用試劑為珠海貝索生物有限公司的抗酸染色液（冷染法）作為染液，進(jìn)行測(cè)定。

1.2.2 結(jié)核DNA檢查4209例 提取試劑為圣湘生物科技股份有限公司的結(jié)核DNA提取試劑;擴(kuò)增試劑為圣湘生物科技股份有限公司的結(jié)核DNA擴(kuò)增試劑;擴(kuò)增儀為上海宏石醫(yī)療科技有限公司的SLAN-96P全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)。使用痰標(biāo)本進(jìn)行液化30 min再檢驗(yàn)。

1.3 效果判定

分析痰抗酸染色冷染法、結(jié)核DNA檢查的結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，進(jìn)行x²檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抗酸染色冷染法準(zhǔn)確率分析

以涂片診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)下，對(duì)12660例患者行痰抗酸染色冷染法診斷，陽性患者為321例，其中217例與病理診斷結(jié)果相同，符合率90.07%，其敏感度為14.72%，特異度為99.07%，陽性率為67.60%，陰性率為89.91%，見表1。

2.2 結(jié)核DNA檢查分析

以結(jié)核DNA檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)下，對(duì)4209例患者行痰抗酸染色冷染法診斷，陽性患者為331例，其中267例與病理診斷結(jié)果相同，符合率99.41%，其敏感度為91.44%，特異度為98.37%，陽性率為80.66%，陰性率為99.36%，見表2。

2.3 兩種檢查方法準(zhǔn)確率比較

兩種檢查方式的特異度差異小，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），結(jié)合DNA檢查方法的符合率、敏感度、陽性率、陰性率均高于抗酸染色冷染，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

3 討論

2020年結(jié)核病全球報(bào)告指出：結(jié)核?。═B）是一種傳染性疾病，是導(dǎo)致健康狀況不佳的主要原因，是全球十大死因之一，也是單一感染原的主要死因（居HIV/AIDS之上）。結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的，當(dāng)結(jié)核病患者將細(xì)菌排入空氣時(shí)，結(jié)核桿菌就會(huì)傳播，當(dāng)對(duì)特意效應(yīng)T淋巴細(xì)胞被機(jī)體感染結(jié)核桿菌后其活化分泌釋放γ-NF。對(duì)于肺結(jié)核的癥狀主要為結(jié)核痰桿菌診斷依據(jù)，臨床使用X射線診斷為輔助檢測(cè)條件，診斷準(zhǔn)確率較低，特異性不佳，對(duì)于肺結(jié)核患者而言，癥狀不典型，易診斷為同病異癥、同癥異病等。菌陰肺結(jié)核患者的細(xì)菌學(xué)診斷依據(jù)的敏感度較低，因此診斷效果不理想?，F(xiàn)階段結(jié)核患者的主要癥狀表現(xiàn)為：低熱、咳嗽、盜汗、咯血等，普遍只有輕微表現(xiàn)，有癥狀患者主訴表達(dá)中，大部分均與結(jié)合患者有密切接觸史，并且缺少癥狀證實(shí)。結(jié)核病診斷主要方式仍然是X線，需要與除肺炎、肺癌等疾病外，其他疾病一起閱片，包括放射科醫(yī)師和高級(jí)臨床工作人員。X線以片絮狀、結(jié)節(jié)狀陰影為主，空洞、干酪性病變少，病變位置小，通常在1個(gè)～2個(gè)肺野中。還能夠使用如血沉、PCR、PPD等實(shí)驗(yàn)進(jìn)行綜合分析判斷，進(jìn)行全面分析以支持診斷。如果在診斷確定之前X線發(fā)生變化，并將錯(cuò)誤診率降至最低，則也可使用10天左右的抗生素，以檢查癥狀是否有所改善。或者使用纖維支氣管鏡檢查、吸出物涂片、病理活檢、培養(yǎng)檢查、細(xì)胞檢查或者bactec培養(yǎng)和分子技術(shù)，可大幅度減少痰涂陰性患者醫(yī)療延遲。痰涂片是指將液體污染到玻璃片上進(jìn)行檢查。檢驗(yàn)科醫(yī)生難以使用酸性脫色劑實(shí)施脫色。提取痰標(biāo)本進(jìn)行涂片、染色并檢查在顯微鏡下檢測(cè)。如果痰中有細(xì)菌就易辨認(rèn)，甚至可粗略地判斷是哪種細(xì)菌。因此，痰涂片是一種簡單且經(jīng)濟(jì)有效方法，可快速獲得初步結(jié)果。

痰涂片陰性患者能夠檢測(cè)。冷染法：簡化工藝，降低液體消耗，改善染色用量能夠保護(hù)環(huán)境。在冷染法第一次染色時(shí)需要加3%碳酸復(fù)紅溶液，但又因?yàn)闇囟鹊?，菌體可能著色較淺而無法染色，再實(shí)施染色時(shí)，增加染色時(shí)間能夠增加著色率，但是著色可能不牢固，若是對(duì)陽性涂片不作出保護(hù)，在常溫下保存后，可能造成褪色。因此其檢出效果比結(jié)核DNA低。原因可能是結(jié)核分歧桿菌細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)，脂質(zhì)被肽聚糖包圍。脂質(zhì)主要由磷、脂肪酸和蠟組成。因此利用手工冷染法分枝桿菌菌體染色效果不佳，通過加熱和延長染色時(shí)間才能夠使其著色。但分枝桿菌的分枝菌酸在結(jié)合染料后，使用酸性脫色劑脫色困難。

在結(jié)核患者中可檢測(cè)到痰結(jié)核DNA，又因?yàn)楝F(xiàn)階段不可能快速診斷痰結(jié)核DNA，因此可通過熒光定量檢測(cè)結(jié)核患者實(shí)時(shí)檢測(cè)患者痰結(jié)核DNA。通過對(duì)4209例患者實(shí)施痰結(jié)核DNA檢測(cè)結(jié)果顯示，痰結(jié)核DNA指標(biāo)是一個(gè)有效性指標(biāo)?；颊叩奶到Y(jié)核DNA檢測(cè)為陽性說明，在結(jié)核病實(shí)施痰結(jié)核DNA能夠增加準(zhǔn)確率及診斷率，此外使用痰液標(biāo)本取材污染機(jī)會(huì)減少并能夠做到標(biāo)準(zhǔn)化定量，有著冷染法無法比擬的優(yōu)越性。在處理前不再需要相同樣本，標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量方法簡單，以后還可使用結(jié)核桿菌DNA和ADA生物特征進(jìn)行相關(guān)研究。對(duì)肺結(jié)核病人進(jìn)行痰液檢查，可診斷出抗酸桿菌，均能夠確診為傳染性肺結(jié)核疾病。如果患者表現(xiàn)癥狀為肺結(jié)核疾病的典型癥狀，但痰結(jié)檢查為無抗酸桿菌顯示，就可確定為疑似結(jié)核病患者。我國肺結(jié)核病人治療重點(diǎn)是對(duì)肺結(jié)核病人早期發(fā)現(xiàn)和治療，肺結(jié)核病人對(duì)肺結(jié)核疾病治療至關(guān)重要。痰結(jié)核DNA檢測(cè)方法具有精度高、成本低、檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。

本次研究結(jié)果顯示：以涂片診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)下，對(duì)12660例患者行痰抗酸染色冷染法診斷，陽性患者為321例，其中217例與病理診斷結(jié)果相同，符合率90.07%，其敏感度為14.72%，特異度為99.07%，陽性率為67.60%，陰性率為89.91%。以結(jié)核DNA檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)下，對(duì)4209例患者行痰抗酸染色冷染法診斷，陽性患者為331例，其中267例與病理診斷結(jié)果相同，符合率99.41%，其敏感度為91.44%，特異度為98.37%，陽性率為80.66%，陰性率為99.36%。兩種檢查方式的特異度差異小，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），結(jié)合DNA檢查方法的符合率、敏感度、陽性率、陰性率均高于抗酸染色冷染。此結(jié)果表明，痰結(jié)核DNA方法對(duì)肺結(jié)核可疑患者陽性檢出率較高，有較高的敏感度，所以在臨床診斷中，可對(duì)疑似肺結(jié)核患者實(shí)施痰培養(yǎng)檢測(cè)。

綜上所述，結(jié)核DNA檢查檢出率較高、能夠?qū)Y(jié)核病的判斷、藥物療效、控制感染有著實(shí)用價(jià)值。