• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      青磚毛茶對(duì)高脂飲食小鼠腸道微生物的影響

      2021-08-11 09:33:16龔自明劉盼盼鄭鵬程王雪萍高士偉桂安輝
      中國(guó)食品學(xué)報(bào) 2021年7期
      關(guān)鍵詞:低脂毛茶青磚

      馮 琳,龔自明,劉盼盼,鄭鵬程,鄭 琳,王雪萍,高士偉,桂安輝

      (湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)茶葉研究所 湖北省茶葉工程技術(shù)研究中心 武漢 430064)

      青磚茶是我國(guó)特有的一種黑茶,主產(chǎn)于鄂南、湘北茶區(qū),具有減肥、降脂,舒暢腸胃,抗氧化,降血糖等眾多生理功能,是西北等高脂、高熱飲食地區(qū)人民不可或缺的天然保健飲料[1-2]。青磚毛茶(老青茶)是加工青磚茶的原料,是決定青磚茶品質(zhì)和健康功能的重要因子;其加工工藝與綠茶較為類(lèi)似,通常以較為粗老的中、小葉種茶樹(shù)鮮葉為原料,經(jīng)殺青、揉捻、曬干等工藝加工而成[2]。眾所周知,云南大葉種茶樹(shù)鮮葉經(jīng)殺青、揉捻、曬干制成的曬青毛茶(滇青),再將其蒸壓制成普洱生茶,具有減肥、降脂、抗氧化等較多的生理、藥理功能[3]。叢濤等[4]研究表明飼料中添加6%的普洱生茶,在不影響機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況的條件下,能有效降低大鼠體重和甘油三酯水平;江新鳳等[5]研究表明普洱生茶能顯著調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠機(jī)體的血脂水平,有效預(yù)防高脂血癥,起到抗氧化等功能;郭剛軍等[6]研究認(rèn)為云南曬青毛茶提取物對(duì)DPPH 自由基、羥基自由基與超氧陰離子有較強(qiáng)的清除能力,具有較強(qiáng)的抗氧化活性。然而,目前關(guān)于加工工藝與普洱生茶類(lèi)似的青磚毛茶的減肥、降脂、抗氧化等健康功能相關(guān)研究報(bào)道較少。

      腸道菌群被認(rèn)為是肥胖、血脂異常和脂肪肝等代謝綜合癥發(fā)展的重要因素[7-9]。越來(lái)越多的研究表明茶葉中的有效成分能夠?qū)δc道中易失調(diào)菌群起到有效的調(diào)節(jié)作用,給動(dòng)物喂食茶多酚后,可以促進(jìn)糞便菌群中乳酸菌、雙歧桿菌的生長(zhǎng),進(jìn)而改善細(xì)菌微生態(tài)平衡[10-11]。高曉余[12]系統(tǒng)研究了普洱茶及其茶多酚、茶多糖、咖啡堿和沒(méi)食子酸等生物活性成分對(duì)基礎(chǔ)和高脂飲食小鼠的糖脂代謝、機(jī)體炎癥和腸道微生態(tài)的影響,結(jié)果表明:腸道微生物群在調(diào)節(jié)肥胖、炎癥、高血脂、高血壓、高血糖、非酒精脂肪肝等代謝性疾病中扮演著重要角色。Chen 等[13-14]利用高通量測(cè)序技術(shù)研究茯磚茶對(duì)小鼠腸道微生物、脂代謝、氧化應(yīng)激和炎癥的影響,結(jié)果表明:茯磚茶可能通過(guò)調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)脂代謝,緩解高脂飲食引起的肥胖。鑒于此,本研究通過(guò)對(duì)青磚毛茶干預(yù)高脂飲食誘導(dǎo)肥胖C57BL/6J 小鼠的主要生理、生化指標(biāo)分析,明確青磚毛茶的健康功能。利用高通量測(cè)序技術(shù)分析青磚毛茶對(duì)小鼠腸道微生物的影響,并結(jié)合相關(guān)生理、生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析,闡明青磚毛茶調(diào)節(jié)和改善腸道微生物以實(shí)現(xiàn)其健康功能的機(jī)理。

      1 材料與方法

      1.1 材料與試劑

      青磚毛茶(赤壁群體種,一芽五葉),赤壁趙李橋茶廠。

      SPF 級(jí)C57BL/6J 小鼠(雄性,6 周齡),南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所;高脂飼料(60%的熱量來(lái)自脂肪,TP26303)、低脂飼料(10%熱量來(lái)自脂肪,TP26332),江蘇南通特洛菲科技有限公司。

      總膽固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate aminotransferase,AST),南京建成生物工程研究所;β-巰基乙醇和HE(蘇木精-伊紅)染色試劑盒,北京索萊寶科技有限公司;水合氯醛、二甲苯、無(wú)水乙醇、甲醛等試劑,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

      1.2 儀器與設(shè)備

      SpectraMax M2 酶標(biāo)儀,美國(guó)Molecular Devices 公司;IKARA11 basic 分析研磨機(jī)、IKA Lab Dancer 渦旋振蕩器,德國(guó)IKA 集團(tuán);ML204 萬(wàn)分一電子天平,美國(guó)METTLER TOLEDO 公司;石蠟切片脫水機(jī)、包埋機(jī)、切片機(jī)及其刀片,德國(guó)Leica公司;Allegra 64R 臺(tái)式高速離心機(jī),美國(guó)Beckman Coulter 有限公司;血糖儀(活力型),德國(guó)Roche 公司;Milli-Q Reference 超純水機(jī),美國(guó)Millipore 公司;DHG-9240A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;DK-8D 電熱水槽,上海一恒科技有限公司。

      1.3 方法

      1.3.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 飼養(yǎng)環(huán)境:SPF 級(jí)動(dòng)物房,溫度20~25 ℃,相對(duì)濕度45%~65%,12 h 黑暗/12 h 光照(9:00-21:00)。SPF 級(jí)C57BL/6J 小鼠24 只(雄性,6 周齡)自由飲食、飲水,適應(yīng)1 周實(shí)驗(yàn)環(huán)境后,隨機(jī)分為3 組,每組8 只,并記錄每組小鼠的體重。低脂組飼喂低脂飼料,飲用純水;高脂組飼喂高脂飼料,飲用純水;青磚毛茶組飼喂高脂飼料,飲用青磚毛茶茶湯(茶水比1∶50),即稱(chēng)取3.0 g 青磚毛茶茶樣,加入150 mL 沸水,沖泡10 min,過(guò)濾。小鼠飲用的茶湯每天更換,并記錄飲用量和采食量。每周記錄小鼠體重,在第7,12,16 周時(shí)監(jiān)測(cè)小鼠的空腹血糖。茶湯干預(yù)16 周后,禁食12 h,每組隨機(jī)取出6 只小鼠進(jìn)行主要生理生化指標(biāo)測(cè)定和腸道微生物分析。

      1.3.2 樣品收集與處理 使用4%水合氯醛將小鼠麻醉,摘眼球取血后,脫頸處死,解剖后取小鼠肝臟、脂肪組織、血液、盲腸等實(shí)驗(yàn)所需樣品。血液:將獲得的全血在4 ℃下6 000×g 離心10 min,取血清-30 ℃保存。肝臟組織:取出后立即稱(chēng)重,生理鹽水漂洗,取少量放入4%中性甲醛溶液(甲醛∶0.1 mol/L PBS=1∶9,體積比)固定24 h 后,于70%的乙醇中保存,用于組織病理學(xué)研究;剩余肝臟于-80 ℃保存。脂肪組織:分類(lèi)取下附睪脂肪、腸系脂肪和腎周脂肪,稱(chēng)重后液氮速凍,-80 ℃保存。

      1.3.3 肝臟組織HE 染色分析 將保存在70%乙醇中的肝臟組織塊放置脫水機(jī)中脫水,用熔融的石蠟包埋,凝固后用切片機(jī)切片(厚度5 μm),取完整切片,將其貼附在載玻片上,55 ℃烘烤約8 h,完成石蠟切片制作。脫蠟、復(fù)水后,在蘇木精染料中染色10 min,流水沖洗后,再在0.2%伊紅酒精染液中浸泡60 s,95%乙醇分色10 s。分色后的切片迅速放于蒸餾水中搖洗3 次,每次5 min,自然晾干后,浸入二甲苯中透明3 min,滴加中性樹(shù)膠于載玻片,用蓋玻片封片后,放入55 ℃烘箱內(nèi)干燥6~8 h,完成切片染色。將切片置于顯微鏡下觀察組織形態(tài)并拍攝照片。

      1.3.4 血清相關(guān)生化指標(biāo)測(cè)定 血清中TC(COD-PAP 法)、TG(GPO-PAP 法)、HDL-C(直接法)、LDL-C(直接法)、ALT(賴(lài)氏法)和AST(賴(lài)氏法)均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟測(cè)定。

      1.3.5 小鼠腸道微生物分析 將每組小鼠盲腸取出后,立即收集盲腸內(nèi)含物,-80 ℃保存并用干冰送到深圳華大基因科技有限公司進(jìn)行腸道微生物檢測(cè)。小鼠盲腸內(nèi)含物DNA 根據(jù)提取試劑盒QiAamp DNA stool Mini Kit 說(shuō)明書(shū)提取,利用Illumina Miseq 高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)各實(shí)驗(yàn)組小鼠腸道中微生物16S rDNA 的V4 高變區(qū)的序列進(jìn)行測(cè)定,利用Usearch 軟件將有97%相似性的序列歸并到一個(gè)可操作分類(lèi)單元(Operational taxonomic unit,OTU),將其與16S 細(xì)菌RDP(Ribosomal database project)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)并注釋種屬信息。

      1.3.6 數(shù)據(jù)處理與分析 采用SPSS 17.0 軟件進(jìn)行方差、相關(guān)性分析;采用SIMCA-P 13 軟件進(jìn)行主成分分析(Principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判別分析(Orthogonal projections to latent structure-discriminant analysis,OPLS-DA)。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 青磚毛茶對(duì)小鼠體重、脂肪和肝臟組織的影響

      由圖1可知,實(shí)驗(yàn)16 周后低脂飲食小鼠的體重為(32.20±0.78)g,而高脂飲食小鼠的體重為(45.05±2.02)g,顯著高于低脂組小鼠體重;在喂食高脂飼料同時(shí)給予青磚毛茶干預(yù)后小鼠體重為(41.21±2.55)g,顯著降低了高脂引起小鼠體重的增加(P<0.01)。對(duì)各實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟質(zhì)量分析表明(圖1),高脂組小鼠的肝臟質(zhì)量顯著高于低脂組,而青磚毛茶干預(yù)16 周后能夠顯著降低高脂飲食小鼠肝臟的質(zhì)量(P<0.01)。為進(jìn)一步了解青磚毛茶對(duì)高脂飲食小鼠脂肪積累的影響,分析了腎周脂肪、腸系脂肪和附睪脂肪質(zhì)量,結(jié)果表明(圖1)高脂組小鼠的腎周脂肪、腸系脂肪和附睪脂肪質(zhì)量均明顯高于低脂組,且存在極顯著差異;青磚毛茶干預(yù)16 周后僅能夠顯著減少腸系脂肪質(zhì)量(P<0.05),而對(duì)腎周脂肪和附睪脂肪質(zhì)量無(wú)顯著性改變。

      圖1 小鼠體重、脂肪和肝臟組織質(zhì)量分析Fig.1 Analysis of body weight,fat and liver tissue mass of mice

      肝臟是人體重要的生命器官,在物質(zhì)代謝尤其是脂肪代謝、生物轉(zhuǎn)化上起重要作用,而高脂飲食極易引起脂質(zhì)代謝異常,形成脂肪肝等病變[15]。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)組小鼠的肝臟表觀形態(tài)的觀察表明(圖2a),低脂組小鼠肝臟形態(tài)規(guī)則,邊緣銳利,顏色暗紅而有光澤,無(wú)油膩感;高脂組小鼠肝臟腫大明顯,包膜緊張,邊緣較鈍,顏色多為發(fā)白,有油膩感;青磚毛茶組小鼠肝臟表觀形態(tài)介于高脂組和低脂組之間,對(duì)高脂飲食的小鼠肝臟有不同程度的恢復(fù)作用。為了進(jìn)一步研究青磚毛茶對(duì)高脂飲食小鼠肝臟組織形態(tài)的影響,采用HE 染色對(duì)小鼠肝臟切片進(jìn)行分析,HE 染色結(jié)果如圖2b 所示,低脂組小鼠肝細(xì)胞大小一致,細(xì)胞核清晰,胞漿均勻,而高脂組小鼠肝細(xì)胞大面積腫脹,細(xì)胞界限不清,脂肪溶解后的空泡明顯增加,并呈現(xiàn)出嚴(yán)重的肝損傷現(xiàn)象;青磚毛茶干預(yù)后可明顯看出脂肪空泡的體積和數(shù)量均明顯減少,一定程度上改善了高脂飲食引起的肝損傷。

      圖2 肝臟組織形態(tài)觀察Fig.2 Morphological observation of liver tissues

      2.2 青磚毛茶對(duì)小鼠血清中主要生理和生化指標(biāo)影響

      為了系統(tǒng)全面的評(píng)價(jià)青磚毛茶對(duì)高脂飲食小鼠脂代謝的影響,分析了各實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中TC、TG、HDL-C 和LDL-C 等4 個(gè)主要血脂指標(biāo)。由表1可知,高脂組小鼠血清中的TC、TG、HDLC 和LDL-C 含量均高于低脂組,其中僅TG 無(wú)顯著性差異,其余均存在極顯著差異(P<0.01);而青磚毛茶干預(yù)后能顯著降低小鼠TC、TG、HDL-C 和LDL-C 含量,其中HDL-C 存在顯著差異(P<0.05),TC、TG 和LDL-C 存在極顯著差異(P<0.01)。與低脂組相比,青磚毛茶干預(yù)后小鼠血清中僅TG 含量要低于低脂組,而無(wú)顯著性差異;TC、HDL-C 和LDL-C 含量均高于低脂組,其中HDL-C 無(wú)顯著性差異,TC 和LDL-C 有顯著性差異(P<0.05)。血清中LDL-C 的水平通常被作為衡量動(dòng)脈粥樣硬化的重要指標(biāo)[16],說(shuō)明青磚毛茶有降低動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病的能力。研究表明,當(dāng)肝細(xì)胞損傷時(shí),肝細(xì)胞內(nèi)的AST 和ALT 可進(jìn)入血液中,引起血AST 和ALT 含量升高[17]。為了進(jìn)一步分析青磚毛茶改善由高脂飲食引起的肝損傷或損傷程度的能力,對(duì)血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活力進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明(表1),高脂組小鼠血清中AST 和ALT 活力極顯著高于低脂組(P<0.01),而青磚毛茶干預(yù)后小鼠血清中AST 和ALT 活力顯著降低(P<0.01),且與低脂組無(wú)顯著差異。

      表1 青磚毛茶對(duì)小鼠血清中主要生理生化指標(biāo)的影響Table 1 Effects of Qingzhuan Maocha on the main physiological and biochemical indexes in serum of mice

      2.3 青磚毛茶對(duì)小鼠腸道微生物的影響

      2.3.1 腸道微生物菌群多樣性分析 高通量測(cè)序表明,18 只小鼠盲腸內(nèi)含物樣品的平均測(cè)序深度(Clean reads)為64 950 個(gè),共得到398 個(gè)不同的OTU。基于OTU 的相對(duì)豐度對(duì)各實(shí)驗(yàn)組小鼠腸道微生物進(jìn)行主成分分析表明(圖3a),低脂組、高脂組和青磚毛茶組被明顯分開(kāi),說(shuō)明3 組小鼠的腸道微生物在OTU 水平上存在較大差異;其次,明顯看出青磚毛茶組在Y 軸上的投影逐漸向低脂組移動(dòng),說(shuō)明青磚毛茶干預(yù)可以將高脂飲食小鼠的腸道微生物組成逐漸向正常狀態(tài)移動(dòng)。為了更好地展示不同實(shí)驗(yàn)組小鼠腸道微生物的差異,對(duì)獲得的398 個(gè)OTU 進(jìn)行維恩圖分析表明(圖3b),低脂組、高脂組和青磚毛茶組有292 個(gè)共有OTU,說(shuō)明各實(shí)驗(yàn)組小鼠腸道微生物種類(lèi)在OTU 水平上差異相對(duì)較小。然而,不同實(shí)驗(yàn)組間的腸道微生物種類(lèi)存在一定差異,如低脂組、高脂組和青磚毛茶組中分別有10,14,16 個(gè)特有OTU,說(shuō)明飲食能夠誘導(dǎo)小鼠腸道微生物種類(lèi)的變化。

      為進(jìn)一步了解低脂組、高脂組和青磚毛茶組小鼠腸道微生物的組成,從門(mén)和科水平上對(duì)小鼠腸道微生物菌群的相對(duì)豐度進(jìn)行分析。各實(shí)驗(yàn)組小鼠的腸道微生物菌群在門(mén)水平的影響如圖3c所示,小鼠腸道微生物主要是由厚壁菌門(mén)(Firmicutes)、變形菌門(mén)(Proteobacteria) 和擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)組成,與其它報(bào)道結(jié)果相似[18]。與低脂組相比,高脂能夠顯著增加厚壁菌門(mén)的相對(duì)豐度,并降低變形菌門(mén)和擬桿菌門(mén)的相對(duì)豐度,從而導(dǎo)致厚壁菌門(mén)/擬桿菌門(mén)比值顯著增加,進(jìn)而可能會(huì)導(dǎo)致宿主能量攝取的增強(qiáng),從而增加患代謝綜合征的風(fēng)險(xiǎn)[19];青磚毛茶干預(yù)后可以顯著降低厚壁菌門(mén)的相對(duì)豐度,增加變形菌門(mén)和擬桿菌門(mén)的相對(duì)豐度,從而降低厚壁菌門(mén)與擬桿菌門(mén)的比例,進(jìn)而降低患代謝綜合征的風(fēng)險(xiǎn)。小鼠的腸道微生物菌群在科水平的影響如圖3d 所示,與低脂組相比,高脂能夠顯著降低脫硫弧菌科(Desulfovibrionaceae)、理研菌科(Rikenellaceae)、S24-7 等相對(duì)表達(dá)豐度,增加毛螺菌科(Lachnospiraceae)、瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)、丹毒絲菌科(Erysipelotrichaceae)、紅蝽?xiàng)U菌科(Coriobacteriaceae)的相對(duì)豐度;青磚毛茶干預(yù)后可以增加脫硫弧菌科的相對(duì)豐度,降低毛螺菌科、丹毒絲菌科、紅蝽?xiàng)U菌科等的相對(duì)豐度。

      圖3 青磚毛茶對(duì)小鼠腸道微生物菌群組成的影響Fig.3 Effects of Qingzhuan Maocha on composition of gut microbiota of mice

      2.3.2 青磚毛茶誘導(dǎo)的關(guān)鍵差異OTU 分析 高脂、藥物等干預(yù)對(duì)同一個(gè)種屬的腸道微生物在OTU 水平上存在較大差異,在OTU 水平上分析腸道微生物的變化具有重要意義[20]。因此,利用SIMCA-P 13 軟件對(duì)低脂組、高脂組和青磚毛茶組的OTU 相對(duì)豐度進(jìn)行正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA),獲得大于1 的關(guān)鍵變量,同時(shí)結(jié)合相對(duì)豐度超過(guò)0.1%的OTU(P<0.05)進(jìn)行關(guān)鍵差異OTU 篩選。由圖4可知,共篩選出71 個(gè)關(guān)鍵差異OTU,主要為厚壁菌門(mén)/梭菌綱(Clostridia)/梭菌目(Clostridiales)的瘤胃球菌科和毛螺菌科的腸道微生物菌群;部分?jǐn)M桿菌門(mén)/擬桿菌綱(Bacteroidia)/擬桿菌目(Bacteroidales) 和少數(shù)放線菌門(mén)(Actinobacteria)/紅椿菌綱(Coriobacteriia)/紅椿菌目(Coriobacteriales)的腸道微生物菌群。與低脂組相比,高脂組增加了34 個(gè)OTU、降低了37 個(gè)OTU 的相對(duì)豐度,青磚毛茶干預(yù)增加了33 個(gè)OTU、降低了38 個(gè)OTU 的相對(duì)豐度。由圖4可知,共有46 個(gè)OTU 在高脂飲食后發(fā)生顯著改變,后又被青磚毛茶調(diào)節(jié)回來(lái),其中有25 個(gè)OTU 相對(duì)豐度因高脂飲食后發(fā)生顯著降低,而在青磚毛茶干預(yù)作用下增加;21 個(gè)OTU 相對(duì)豐度因高脂飲食后發(fā)生顯著增加,而在青磚毛茶干預(yù)作用下降低。

      圖4 關(guān)鍵差異OTU 熱圖分析(相對(duì)豐度標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)換)Fig.4 Analysis of key differentially OTU by heat map(normalized conversion of relative abundance)

      2.3.3 關(guān)鍵差異OTU 與生理生化指標(biāo)相關(guān)性分析 將青磚毛茶在高脂飲食小鼠中起顯著作用的46 個(gè)關(guān)鍵差異OTU 與小鼠的生理生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析(圖5)。結(jié)果表明,其中有39 個(gè)OTU與小鼠體重、肝臟質(zhì)量、腎周脂肪、腸系脂肪、附睪脂肪、TG、TC、LDL-C、HDL-C、ALT 和AST 中至少1 個(gè)指標(biāo)呈顯著正相關(guān)或負(fù)相關(guān)。相關(guān)研究表明,丹毒絲菌科、紅蝽?xiàng)U菌科、紅蝽?xiàng)U菌科和瘤胃球菌科均被報(bào)道與代謝綜合癥密切相關(guān)[21-23]。由圖5可知,OTU18、OTU7 屬于丹毒絲菌科;OTU8、OTU289 屬于紅蝽?xiàng)U菌科;OTU28、OTU34、OTU52、OTU55、OTU67、OTU86、OTU88、OTU134 和OTU265等9 個(gè)OTU 屬于紅蝽?xiàng)U菌科;OTU13、OTU14、OTU33、OTU47、OTU51、OTU62、OTU75、OTU91、OTU111 和OTU261 等10 個(gè)OTU 屬于瘤胃球菌科;因此推測(cè)這些OTU 可能是青磚毛茶在預(yù)防和治療代謝綜合征中起重要作用。此外,由圖5可知,有20 個(gè)OTU 與至少2 個(gè)小鼠生理生化指標(biāo)呈顯著正相關(guān),這些OTU 的相對(duì)表達(dá)豐度被青磚毛茶干預(yù)后顯著降低;主要包括Oscillospira(OTU14、OTU51、OTU33 和OTU47)、Dorea(OTU265)、Allobaculum(OTU7)、Adlercreutzia(OTU289)、Bac-注:○低脂組和青磚毛茶組OTU 相對(duì)豐度少于高脂組;●低脂組和青磚毛茶組OTU 相對(duì)豐度高于高脂組;★高脂導(dǎo)致變化的OTU被青磚毛茶恢復(fù)回來(lái)。熱圖顏色表示相關(guān)性系數(shù);* 和** 表示顯著性分別為P<0.05 和P<0.01。teroides_uniformis(OTU260)和Lactobacillus_reuteri(OTU49)。相反的,有9 個(gè)OTU 與至少2 個(gè)小鼠生理生化指標(biāo)呈顯著負(fù)相關(guān),這些OTU 的相對(duì)表達(dá)豐度被青磚毛茶干預(yù)后顯著增加;主要包括Bacteroides(OTU74)、Dorea(OTU52)和 Ruminococcus_gnavus(OTU265)。另外,有10 個(gè)OTU僅與小鼠TG 含量呈顯著負(fù)相關(guān),說(shuō)明這些OTU在青磚毛茶調(diào)節(jié)小鼠的TG 中起重要作用。綜上所述,青磚毛茶干預(yù)可以調(diào)節(jié)高脂誘導(dǎo)的腸道微生物菌群紊亂,并與低脂組有相似的健康腸道菌群組成。

      圖5 關(guān)鍵差異OTU 相對(duì)豐度和主要生理生化指標(biāo)相關(guān)性分析Fig.5 Correlation analysis of key differentially OTU relative abundance and the main physiological and biochemical indexes

      3 討論與結(jié)論

      肥胖、高血壓、高血脂、胰島素抵抗和高血糖癥為特征的代謝綜合癥已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)的一個(gè)重大公共衛(wèi)生問(wèn)題。近年來(lái),大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究均已經(jīng)證實(shí)了茶葉具有預(yù)防和緩解代謝綜合癥的功能。研究表明,綠茶具有顯著的減肥、降血脂、保護(hù)肝臟、降血糖的功能。廖素鳳等[24]研究認(rèn)為綠茶提取物能顯著降低、高脂飲食引起的體重增加和血清中TC、TG、ALT 和AST 的含量,具有顯著降血脂功能;Xu 等[25]研究結(jié)果表明綠茶多糖對(duì)體重增加和脂肪質(zhì)量升高有顯著的抑制作用,并可以改善大鼠血脂和肝臟氧化應(yīng)激水平。青磚毛茶通常以較為粗老的中、小葉種茶樹(shù)鮮葉為原料經(jīng)殺青、揉捻、曬干等工藝加工而成,在加工工藝和生化成分上與綠茶較為相似。本研究通過(guò)對(duì)青磚毛茶干預(yù)高脂飲食誘導(dǎo)肥胖C57BL/6J 小鼠的主要生理生化指標(biāo)分析表明,青磚毛茶可以顯著抑制高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠體重、腸系脂肪、肝臟質(zhì)量的增加以及血清中TC、TG、HDL-C 和LDL-C 的增加,與前人的研究結(jié)果較為類(lèi)似。肝臟是機(jī)體脂肪合成和脂質(zhì)代謝最主要的場(chǎng)所,高脂飲食極易引起脂質(zhì)代謝異常,形成脂肪肝等病變[15]。通過(guò)對(duì)肝臟表觀形態(tài)的觀察發(fā)現(xiàn),青磚毛茶能夠有效緩解高脂飲食小鼠肝臟腫大、肝臟病變等癥狀;肝臟HE 染色結(jié)果表明青磚毛茶干預(yù)后可明顯降低高脂飲食誘導(dǎo)的脂肪空泡的體積和數(shù)量增加。AST、ALT 是反映肝損傷或損傷程度一個(gè)重要指標(biāo),當(dāng)肝細(xì)胞損傷時(shí),肝細(xì)胞內(nèi)AST 和ALT 可進(jìn)入血液中,引起血AST 和ALT 含量升高[17]。青磚毛茶干預(yù)后小鼠血清中AST、ALT 含量顯著降低,且與低脂組無(wú)顯著差異。因此,青磚毛茶具有緩解高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟損傷或病變,保護(hù)肝臟的功能。

      越來(lái)越多的研究表明腸道微生物在茶葉健康功能上扮演著重要的角色。普洱茶、茯磚茶和茶多酚、茶多糖、咖啡堿和沒(méi)食子酸等茶葉中的主要生物活性成分可能通過(guò)調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)來(lái)調(diào)節(jié)脂代謝,緩解高脂飲食引起的肥胖[12,20]。本研究利用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)低脂組、高脂組和青磚毛茶組小鼠腸道微生物多樣性進(jìn)行分析表明,3 組小鼠腸道微生物結(jié)構(gòu)和組成在OTU 水平上存在較大差異,且青磚毛茶干預(yù)可以將高脂飲食小鼠的腸道微生物組成逐漸向低脂組移動(dòng)。肥胖與正常人或小鼠的厚壁菌門(mén)/擬桿菌門(mén)比值顯著不同,厚壁菌門(mén)/擬桿菌門(mén)的比值增加可能會(huì)導(dǎo)致宿主能量攝取的增強(qiáng),從而增加代謝綜合征的風(fēng)險(xiǎn)[19]。青磚毛茶干預(yù)后可以顯著降低厚壁菌門(mén)的相對(duì)豐度,增加擬桿菌門(mén)的相對(duì)豐度,降低厚壁菌門(mén)與擬桿菌門(mén)的比值,進(jìn)而降低代謝綜合征的風(fēng)險(xiǎn)。在科水平上,青磚毛茶干預(yù)后可以增加脫硫弧菌科的相對(duì)豐度,降低紅蝽?xiàng)U菌科、丹毒絲菌科、紅蝽?xiàng)U菌科等的相對(duì)豐度。本研究共篩選出71 個(gè)關(guān)鍵差異OTU,其中有46 個(gè)OTU 在高脂飲食后發(fā)生顯著改變,后又被青磚毛茶調(diào)節(jié)回來(lái)。在46 個(gè)關(guān)鍵OTU 中有39 個(gè)OTU 與小鼠主要生理生化指標(biāo)中至少1 個(gè)指標(biāo)呈顯著正相關(guān)或負(fù)相關(guān),這些OTU主要屬于丹毒絲菌科、紅蝽?xiàng)U菌科、紅蝽?xiàng)U菌科和瘤胃球菌科。飲食誘導(dǎo)肥胖宿主的腸道中比普通個(gè)體含有更高豐度的丹毒絲菌科和紅蝽?xiàng)U菌科。丹毒絲菌科可能會(huì)增加宿主對(duì)食物中能量的提取,并且丹毒絲菌科的相對(duì)豐度與宿主中的血脂呈顯著的正相關(guān)[26]。Martínez 等[21]發(fā)現(xiàn)在倉(cāng)鼠腸道中丹毒絲菌科和紅蝽?xiàng)U菌科的相對(duì)豐度與膽固醇代謝物顯示出顯著的相關(guān)性。與此同時(shí),越來(lái)越多的研究表明紅蝽?xiàng)U菌科和瘤胃球菌科與代謝綜合癥密切相關(guān)[22-23]。綜上所述,青磚毛茶可以調(diào)節(jié)高脂誘導(dǎo)的腸道微生物菌群紊亂,并與低脂組有相似的健康腸道菌群組成;同時(shí),推測(cè)青磚毛茶可能是通過(guò)調(diào)節(jié)厚壁菌門(mén)/擬桿菌門(mén)的比值和丹毒絲菌科、紅蝽?xiàng)U菌科、紅蝽?xiàng)U菌科、瘤胃球菌科等菌群的相對(duì)豐度來(lái)緩解高脂飲食引起的代謝綜合癥。

      猜你喜歡
      低脂毛茶青磚
      劉嘉怡作品
      ——增城毛茶制作技藝插畫(huà)
      大觀(2023年8期)2023-09-25 06:21:14
      仁化紅山鎮(zhèn)白毛茶亮相央視《新聞直播間》
      源流(2022年5期)2022-06-30 01:31:44
      泥灰雕塑:青磚黛瓦上的技藝傳承
      古建筑青磚墻體修復(fù)施工技術(shù)研究
      全球無(wú)負(fù)擔(dān)餐桌
      青磚茶 良心做——湖南偉仁永巨茶業(yè)股份有限公司
      湖南不同等級(jí)黑毛茶品質(zhì)分析
      茶葉通訊(2018年3期)2018-11-08 07:01:56
      低脂無(wú)糖酸奶的研制
      “低脂”未必健康
      燕麥糊精脂肪替代品在低脂奶油中的應(yīng)用
      潮安县| 青河县| 华宁县| 渝北区| 南康市| 广丰县| 怀化市| 白山市| 伊宁市| 龙州县| 临城县| 镇江市| 北宁市| 高邮市| 东至县| 鹤庆县| 平塘县| 昌乐县| 阿拉善左旗| 舞阳县| 天峨县| 营口市| 车险| 商水县| 平乐县| 江油市| 昌吉市| 许昌市| 云和县| 宁夏| 宝丰县| 绍兴县| 航空| 桦甸市| 利津县| 平阳县| 白银市| 靖江市| 巨鹿县| 阜平县| 桦甸市|