王寶菊，劉承軍，李 瑩

(聊城市動物疫病預防與控制中心，山東 聊城 252000)

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種人畜共患的慢性消耗性傳染病，我國將其列為二類動物疫病。奶牛是家畜中最容易感染結(jié)核病的動物[1]，奶牛結(jié)核病的臨床癥狀多為低熱、咳嗽、漸進性消瘦、生產(chǎn)性能下降。剖檢變化都是在各組織器官形成肉芽腫和干酪樣壞死灶。近年來，我國奶牛結(jié)核病感染率呈上升趨勢，奶牛結(jié)核病已成為制約奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展和危害人類健康的重要因素。對奶牛場實施結(jié)核病凈化，有利于保障我國的公共衛(wèi)生安全，促進奶牛業(yè)健康發(fā)展，對振興奶業(yè)具有重大意義。奶牛場結(jié)核病凈化成功的關(guān)鍵因素在于：

1 政府財政的支持

按照《山東省動物疫病防控財政支持政策實施方案》，奶牛撲殺補償經(jīng)費為6000元/頭，省級以上財政補助65%，市縣級財政補助35%，每頭奶牛市縣級承擔的補償經(jīng)費為2100元，假設(shè)一地市共有奶牛5萬頭，結(jié)核病流行率為0.1%，那么陽性奶牛的數(shù)量應該為50頭，相應的撲殺補償經(jīng)費30萬元，而市縣級財政需支付10.5萬元。另外檢測試劑費用為15萬-25萬/次，陽性場每年至少檢測4次，陰性場每年至少檢測2次，僅檢測費用每年至少30萬。財政撥付不了這部分專項資金，結(jié)核病的凈化工作根本無法開展。

2 奶牛場場主的配合

雖然奶牛場場主是結(jié)核病凈化的最終受益者，不過就短期經(jīng)濟效益來說對他們的影響不小。一方面奶牛的補償標準與市場價格之間存在巨大差距，現(xiàn)行標準下奶牛的補償經(jīng)費是6000元/頭，而奶牛的市場價格在2萬元/頭左右。按照存欄1000頭的奶牛場，假設(shè)結(jié)核病流行率為0.5%，那么陽性奶牛應該有5頭，撲殺補償經(jīng)費僅3萬，而這5頭奶牛的市值在10萬元左右，這中間的7萬差價很多奶牛場場主就無法接受。另一方面，由于結(jié)核病是一種高感染率，低發(fā)病率的慢性病，只有約5%-10%的感染者發(fā)展成為臨床結(jié)核病，具有典型的病理變化：結(jié)核結(jié)節(jié)。因此現(xiàn)在很多奶牛場檢測出來的陽性牛，臨床癥狀不明顯，同時對產(chǎn)奶量影響也不大，很難說服奶牛場場主對陽性牛進行撲殺。尤其對于一些結(jié)核病陽性率較高的奶牛場，凈化的意義不大，只能全群淘汰。結(jié)核病的凈化過程中勢必會有一些實力不夠雄厚的奶牛場將會被淘汰。

3 引種管理

控制好奶牛引進是杜絕結(jié)核病從場外傳入的重要途徑。相對于其他畜禽，奶牛飼養(yǎng)周期較長，流動性較差，建場時引進奶牛較頻繁，后期對于沒有種公牛的奶牛場來說引進精液比較頻繁。引進奶牛時應該單獨隔離飼養(yǎng)，飼養(yǎng)42 d后，結(jié)核病檢測陰性后方可混群飼養(yǎng)，購買精液時一定要通過正規(guī)途徑購買，嚴禁購買來自疫區(qū)的精液，精液的供體結(jié)核病檢測陰性。

4 牧草管理

牧草也是導致奶牛場結(jié)核病感染的風險因素之一。不少已經(jīng)凈化了結(jié)核病的奶牛場復染結(jié)核病的流行病學調(diào)查結(jié)果最后都指向疫區(qū)的牧草。例如：張啟龍等對北京市密云區(qū)某奶牛場結(jié)核病現(xiàn)場流行病學調(diào)查，推測該場36頭結(jié)核病病牛是由于飼喂從內(nèi)蒙古赤峰市購入的牧草引起的[2]。因此奶牛場要科學搭配飼料，嚴禁從疫區(qū)購買牧草。

5 制定適合本場的凈化方案

嚴格按照凈化方案開展凈化工作。奶牛場在開展結(jié)核病凈化之前首先要進行一次全覆蓋的結(jié)核病檢測，計算本場結(jié)核病陽性率，然后根據(jù)陽性率制定結(jié)核病凈化方案。根據(jù)奶牛場檢測的陽性率，一般可以將奶牛場分為四個種群：未控制群(有疫情發(fā)生或陽性率≥0.5%)、控制群(連續(xù)兩年無臨床病例，且陽性率<0.5%)、穩(wěn)定控制群(無臨床病例，連續(xù)兩年陽性率<0.1%)、凈化群(無臨床病例，連續(xù)兩年監(jiān)測無陽性牛)。未控制群、控制群、穩(wěn)定控制群成年牛一般每三個月監(jiān)測一次，凈化群成年牛一般每半年監(jiān)測一次。初生犢牛20日齡首次檢測，100-120日齡進行第二次檢測，兩次檢測都是陰性，以后可以每半年檢測一次。一旦檢測結(jié)果有陽性犢牛，其它陰性犢牛以后每三個月檢測一次，直到連續(xù)兩次檢測結(jié)果全部為陰性，可以每半年檢測一次。一旦檢測出結(jié)核病陽性牛，立即開展流行病學調(diào)查，查找傳染源，切斷傳播途徑。另外與陽性牛具有流行病學關(guān)聯(lián)的陰性牛42 d后復檢一次，其它陰性?？梢悦咳齻€月檢測一次(圖1)。在監(jiān)測過程中要嚴格按照監(jiān)測頻率開展檢測工作，不漏檢，檢測出陽性奶牛立即按規(guī)定上報有關(guān)獸醫(yī)主管部門，對陽性奶牛撲殺無害化處理，對環(huán)境進行消殺。

圖1 奶牛場凈化路線圖

6 做好消毒滅源工作

消毒設(shè)備是養(yǎng)殖場做好消毒滅源工作的硬件設(shè)施保障，除此之外，奶牛場還應制訂完善的消毒制度，并嚴格遵照執(zhí)行。絕大部分養(yǎng)殖場的消毒設(shè)備都很齊全，墻上也都掛著消毒制度，但就具體執(zhí)行情況往往不到位，達不到消滅病原菌的目的。具體表現(xiàn)在以下幾個方面：一是消毒設(shè)備等同虛設(shè)，完全沒有利用起來，二是消毒劑使用錯誤，由于牛結(jié)核分枝桿菌細胞壁含有大量蠟質(zhì)物質(zhì)，高度疏水性，與普通細菌相比，它具有很強的抗物理和化學消毒和滅菌方法。在自然環(huán)境中生存能力較強，對燥、冷、酸、堿的抵抗力很強，但對酒精、濕熱和紫外線的抵抗力差，75%酒精作用數(shù)分鐘、60 ℃ 30 min、日光照射數(shù)小時即可殺死。消毒劑在使用過程中要注意消毒劑的濃度和作用時間，濃度過低、作用時間短都達不到消滅病原菌的目的。三是消毒之前沒有進行清理，影響消毒效果。四是同一人員在不同圈舍之間工作，進入下一個圈舍之前不消毒，造成結(jié)核病在不同圈舍之間傳播。因此奶牛場在消毒過程中要避免以上四條，做到先清理后消毒，合理選擇交叉使用消毒劑，嚴格配制消毒劑濃度，作用時間要達標。

7 人員防護和管理

奶牛場工作人員必須做好個人防護工作，進入生產(chǎn)區(qū)必須穿工作服、戴口罩，人員嚴格按照分區(qū)工作，不得串崗。由于結(jié)核病是人畜共患病，亦可以由人傳染給奶牛，所以需要加強養(yǎng)殖場內(nèi)的人員管理，避免交叉感染。新入職人員必須做結(jié)核病檢測，無結(jié)核病感染者方可聘用，此外，每年還應對全體工作人員進行1-2次結(jié)核病檢測。

8 選擇合適的檢測方法

按照《2020年國家動物疫病監(jiān)測與流行病學調(diào)查計劃》奶牛結(jié)核病的檢測方法有兩種:一是結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應試驗(動物結(jié)核病診斷技術(shù)GB/T18645-2002)，二是外周血λ-干擾素體外釋放ELISA試驗(牛結(jié)核病診斷體外檢測λ-干擾素法GB/T 32945-2016)[3]。第一種方法，成本低(檢測試劑成本大概在3元/頭份)、試驗環(huán)境儀器設(shè)備要求較低，奶牛場技術(shù)員就可以操作，但工作量大、耗時耗力、特異性差，而且對牛的應急反應較大[4]。第二種方法耗時短、敏感性高、特異性強，而且能診斷出亞臨床癥狀的感染奶牛，不過成本較高(國內(nèi)檢測試劑成本大概在50元/頭份，國外檢測試劑成本大概在90元/頭份)，而且采集的全血樣品必須36 h內(nèi)送實驗室進行刺激培養(yǎng)，試驗環(huán)境儀器設(shè)備要求較高，必須由獸醫(yī)實驗室專業(yè)技術(shù)人員操作完成[5]。綜合考慮個人認為：企業(yè)自檢可以采用結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應試驗，獸醫(yī)主管部門監(jiān)督檢測可以采用牛結(jié)核病λ-干擾素ELISA試驗，對于犢牛和泌乳期奶牛應選用刺激性較小的牛結(jié)核病λ-干擾素ELISA試驗。