○劉洋生
精氨酸是一種功能性氨基酸,是魚(yú)類機(jī)體內(nèi)一種必需氨基酸。目前,精氨酸的研究主要集中在哺乳動(dòng)物繁殖性能方面。研究表明,精氨酸在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)可以參與蛋白質(zhì)的沉積于代謝;其代謝產(chǎn)物一氧化氮和多胺會(huì)參與機(jī)體細(xì)胞的增殖與分化,并能調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。精氨酸及其代謝產(chǎn)物一氧化氮、瓜氨酸及鳥(niǎo)氨酸可以增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞的殺菌和吞噬能力;提高免疫球蛋白含量,進(jìn)而提高動(dòng)物機(jī)體的免疫功能。在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面的研究結(jié)果表明,精氨酸可以顯著提高叉尾鮰機(jī)體內(nèi)一氧化氮的含量,提高機(jī)體抵抗有害菌的能力;精氨酸可以顯著提高紅魚(yú)和條紋鱸機(jī)體內(nèi)溶菌酶活性,增強(qiáng)了機(jī)體的免疫功能。鯉魚(yú)原產(chǎn)亞洲,屬于溫帶淡水魚(yú),雜食性、生長(zhǎng)較快、肉質(zhì)鮮美,是我國(guó)淡水魚(yú)養(yǎng)殖主要品種之一。目前,精氨酸在鯉魚(yú)養(yǎng)殖中的應(yīng)用較少,因此本試驗(yàn)以鯉魚(yú)為研究對(duì)象,探討日糧添加不同水平的精氨酸對(duì)其免疫功能的影響,以期為精氨酸科學(xué)、合理地應(yīng)用于鯉魚(yú)的養(yǎng)殖生產(chǎn)中提供參考。
試驗(yàn)所用精氨酸購(gòu)自臺(tái)灣MDbio公司,含量大于90%。試驗(yàn)鯉魚(yú)購(gòu)自當(dāng)?shù)厮a(chǎn)養(yǎng)殖基地。
試驗(yàn)選取120尾體重相近、健康的鯉魚(yú)按照隨機(jī)分組原則,將鯉魚(yú)分成4個(gè)試驗(yàn)組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10尾。試驗(yàn)1組為對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)2組、3組、4組依次在基礎(chǔ)日糧中添加1%、2%、3%的精氨酸。試驗(yàn)周期為8周。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分含量如表1所示。
表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分含量
試驗(yàn)期間,每天飼喂4次,一周調(diào)整一次飼喂量,每天換水1/3,保證水溫在25℃,氨氮濃度小于0.01mg/L,溶解氧大于5.5mg/L。
試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天,鯉魚(yú)禁食24小時(shí),每組挑選健康的10尾鯉魚(yú),麻醉尾靜脈采血,4℃靜止24小時(shí)后離心取上層血清,-20℃保存,用于測(cè)定血液中補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4含量。試驗(yàn)鯉魚(yú)解剖后去除頭腎和脾臟,-20℃保存,用于測(cè)定溶菌酶和一氧化氮活性。以上試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。檢測(cè)方法參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel2015進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)后,再采用SPSS22.0進(jìn)行單因素的方差分析,并用LSD法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,P<0.05作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn),結(jié)果用平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤呈現(xiàn)。
日糧不同水平的精氨酸對(duì)鯉魚(yú)機(jī)體免疫功能的影響見(jiàn)表2。由表2數(shù)據(jù)可知,在鯉魚(yú)日糧中添加精氨酸對(duì)鯉魚(yú)頭腎中的溶菌酶活性和血液中補(bǔ)體C4含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。與對(duì)照組相比,添加2%的精氨酸可以顯著提高頭腎中一氧化氮活性(P<0.05),1%和3%精氨酸組頭腎中一氧化氮活性有升高趨勢(shì),但差異不顯著(P>0.05)。2%精氨酸組脾臟中溶菌酶活性較對(duì)照組顯著提高(P<0.05),1%和3%精氨酸組脾臟中溶菌酶活性有升高趨勢(shì) ,但 差異 不 顯著(P>0.05)。1%、2%、3%精氨酸組的脾臟中一氧化氮活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。2%精氨酸組血清中補(bǔ)體C3含量較對(duì)照組顯著提高(P<0.05),1%和3%精氨酸組血清中補(bǔ)體C3含量有升高趨勢(shì),但差異不顯著(P>0.05)。
表2 日糧不同水平的精氨酸對(duì)鯉魚(yú)機(jī)體免疫功能的影響
本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),在鯉魚(yú)日糧中添加一定劑量的精氨酸可以顯著提高提高頭腎中一氧化氮活性、脾臟中溶菌酶活性、血清中補(bǔ)體C3含量、脾臟中一氧化氮活性,說(shuō)明,精氨酸可以有效地調(diào)節(jié)鯉魚(yú)機(jī)體的免疫功能,提高機(jī)體抗病力。廖英杰等研究表明,在團(tuán)頭魴幼魚(yú)日糧中補(bǔ)充一定劑量的精氨酸可以顯著提高血清中補(bǔ)體C3含量,有效地提高了機(jī)體的抗病原菌感染能力。程鎮(zhèn)燕等研究發(fā)現(xiàn),隨著精氨酸濃度的提高,鯉魚(yú)血清和肝胰臟中一氧化氮含量顯著提高。精氨酸提高鯉魚(yú)機(jī)體免疫功能的主要原因可能是精氨酸在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的一氧化氮可以殺死鯉魚(yú)機(jī)體內(nèi)的細(xì)菌、寄生蟲(chóng)、病毒等有害物質(zhì),并能有效地抑制癌癥細(xì)胞的增殖,進(jìn)而提高鯉魚(yú)機(jī)體的免疫力和抗病能力。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加2%的精氨酸可以顯著提高頭腎中一氧化氮活性、脾臟中溶菌酶活性、血清中補(bǔ)體C3含量,1%、2%、3%精氨酸組的脾臟中一氧化氮活性均顯著提高,研究表明,在鯉魚(yú)日糧中添加一定劑量的精氨酸可顯著提高機(jī)體的免疫功能,且最適添加水平為2%。
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