李莉 劉苗苗 丁宗博 王海波 張興龍 魏亦山
摘 要:本研究在標(biāo)準(zhǔn)方法《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》(NY/T 1725—2009)的基礎(chǔ)上,省掉凈化步驟,通過提取與濃縮,建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中的滅蠅胺分析方法。結(jié)果表明,采用簡(jiǎn)化后的前處理方法測(cè)定7種不同種類的樣品,在0.01~1.00 mg/L范圍內(nèi),加標(biāo)回收率為78%~107%,標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.8%~5.5%,其回收率和精密度都能達(dá)到分析檢測(cè)要求。運(yùn)用該方法對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行分析,操作簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確度高,可為蔬菜中滅蠅胺的批量快速檢測(cè)方法研究提供數(shù)據(jù)參考。
關(guān)鍵詞:液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法;蔬菜;滅蠅胺
滅蠅胺(Cyromazine)是一種三嗪類化合物,屬于強(qiáng)內(nèi)吸性昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,極性強(qiáng),具有觸殺和胃毒作用。目前,滅蠅胺被廣泛用于豇豆、菜豆、黃瓜和茄子等農(nóng)作物的雙翅目昆蟲病蟲害防治中[1]。
《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》(GB 2763—2019)[2]規(guī)定,滅蠅胺殘留量指定的檢驗(yàn)方法為《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》(NY/T 1725—2009)[3](以下簡(jiǎn)稱標(biāo)準(zhǔn)方法),但該方法的前處理步驟煩瑣、溶劑消耗量大,耗時(shí)長(zhǎng),不適用于大批量檢測(cè)工作。因此,本研究通過簡(jiǎn)化前處理步驟,建立了快速檢測(cè)滅蠅胺殘留的樣品前處理方法,并采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析測(cè)定,為不斷探尋更優(yōu)質(zhì)、更快速的檢測(cè)方法具有重要的指導(dǎo)意義[4-5]。
1 材料與方法
1.1 儀器和試劑
Agilent technologies 6460 Triple Quad LC/MS,配有ESI源,美國安捷倫公司;電子天平,奧豪斯有限公司;高速組織搗碎機(jī),德國IKA公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,德國KNF。
滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)品,濃度為1 000 μg/mL,購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(天津);乙腈、甲醇、乙酸銨、甲酸、甲酸銨(色譜純);實(shí)驗(yàn)用水為屈臣氏蒸餾水。
大白菜、番茄、蔥、蒜、香菇、西葫蘆和山藥,均購自于市場(chǎng),經(jīng)檢測(cè)均為陰性樣品;結(jié)球甘藍(lán)為能力驗(yàn)證剩余樣品(已知添加濃度)。
1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
①滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:移取1 000 mg/L滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL于100 mL容量瓶中,用乙腈稀釋至刻度,濃度為10 mg/L。②滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)中間液:移取1 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液加入乙腈,定容至10 mL,配制成1 mg/L標(biāo)準(zhǔn)中間液。③滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)工作液:吸取100 μL標(biāo)準(zhǔn)中間液,加入900 μL空白基質(zhì),配制成0.1 mg/L的基質(zhì)標(biāo)液。
1.3 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀器條件
1.3.1 色譜條件
色譜柱:Infinity Lab Proshell 120 EC -C18(2.7 μm,3.0×100 mm);流動(dòng)相:A-水(含5 mmol/L甲酸銨+0.1%甲酸)、B-甲醇;梯度洗脫程序見表1,流速為0.4 mL/min,進(jìn)樣體積2 μL,柱溫40 ℃。
1.3.2 質(zhì)譜條件
離子源:AJS-ESI;掃描方式:正離子掃描;干燥氣溫度:285 ℃;干燥氣流速:10 L/min;鞘氣溫度:375 ℃;
鞘氣流速:12 L/min;霧化器35 psi;監(jiān)測(cè)模式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM);定量/定性離子對(duì):167.1/85.1、167.1/68.1。
1.4 樣品前處理
準(zhǔn)確稱取粉碎混勻后的試樣20 g(精確到0.01 g),加入乙酸銨-乙腈(1+4)溶液均質(zhì)、沖洗、過濾,并定容至100 mL具塞比色管中。用移液管準(zhǔn)確移取10 mL提取液至圓底燒瓶中,旋蒸濃縮至只含水的溶液(冷凝裝置無液滴滴下)。將只含水的溶液轉(zhuǎn)移至帶刻度線的10 mL樣品小管,加水定容至5 mL,混勻過0.22 μm濾膜,上液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。
與標(biāo)準(zhǔn)方法相比,省去了凈化步驟,僅保留提取和濃縮步驟。
1.5 加標(biāo)回收試驗(yàn)
選取大白菜、番茄、蔥、蒜、香菇、西葫蘆和山藥7種空白基質(zhì),添加0.1 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液,平行測(cè)定6份,按上述前處理方法處理后上機(jī)測(cè)定,計(jì)算回收率和精密度。
2 結(jié)果與分析
2.1 線性范圍
研究分析發(fā)現(xiàn),滅蠅胺在0.01~1.00 mg/L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,線性方程為y=16.311 8x(其中,y為響應(yīng)值;x為滅蠅胺的濃度,mg/L),線性相關(guān)系數(shù)r為0.999 4。
2.2 定量限
選取大白菜、香菇、蒜空白基質(zhì),添加濃度為0.010 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液,用上述方法平行測(cè)定6次,測(cè)得其平均回收率分別為92%、72%、75%,RSD分別為4.6%、5.4%、7.6%,其準(zhǔn)確度和精密度符合檢測(cè)要求,因此,將0.01 mg/L作為此方法滅蠅胺的定量限。
2.3 回收率和精密度
7種不同基質(zhì)的加標(biāo)回收和精密度結(jié)果見表2。從表2可以看出,在7種不同種類的基質(zhì)中,滅蠅胺的回收率比較穩(wěn)定,在78%~107%范圍內(nèi),符合準(zhǔn)確度要求;同時(shí),RSD在2.8%~5.5%,符合精密度要求,滿足檢測(cè)分析要求。
2.4 實(shí)際樣品分析
將能力驗(yàn)證的樣品結(jié)球甘藍(lán)(已知添加滅蠅胺的濃度為0.140 mg/L)用上述方法進(jìn)行前處理后上機(jī)測(cè)定,測(cè)得其結(jié)果為0.147 mg/L。
3 結(jié)論
本研究通過改進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)方法中的前處理步驟,僅通過提取和濃縮,省略了凈化步驟,建立了測(cè)定蔬菜中滅蠅胺殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法。該方法簡(jiǎn)單,快速、準(zhǔn)確可靠,既可滿足蔬菜中滅蠅胺殘留的技術(shù)要求,又可用于大量樣品的快速檢測(cè)。但是,由于省掉了凈化步驟,提取出的基質(zhì)會(huì)比標(biāo)準(zhǔn)方法更復(fù)雜,對(duì)色譜柱和儀器的污染程度會(huì)更高一些。因此,在平時(shí)的檢測(cè)過程中,要更加注意色譜柱的沖洗和儀器的維護(hù)保養(yǎng)。
參考文獻(xiàn)
[1]劉瑛,余晟,于峰,等.滅蠅胺的毒性研究[J].農(nóng)藥,2000,39(9):25-33.
[2]國家衛(wèi)生健康委員會(huì),中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部,國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量: GB 2763—2019[S].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2019.
[3]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法:NY/T 1725-2009[S].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2009.
[4]趙馨.QuEChERS方法在HPLC測(cè)定豇豆中滅蠅胺殘留量的應(yīng)用研究[J].福建農(nóng)業(yè)科技,2020(8):7-12.
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