朱震 高聰芬

摘要：通過溫室盆栽試驗(yàn)和應(yīng)用刺激性試驗(yàn)對30%（5%+25%）快速釋放型高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑的藥效和刺激性進(jìn)行研究。藥效結(jié)果表明，該藥劑對油菜蚜蟲和油菜菌核病的防效較好，對這2種油菜主要病蟲害能起到兼防的作用。首次報道通過兔子皮膚刺激性和大棚打藥刺激性試驗(yàn)，綜合評估藥劑應(yīng)用刺激性，結(jié)果表明，使用微囊包裹后可以明顯降低高效氯氟氰菊酯引起的刺激性，PDII從2.8降低至0.7，大棚打藥刺激性評分從3.2降低至0.9。

關(guān)鍵詞：油菜;蚜蟲;菌核病;微囊;刺激性

中圖分類號：S436.34 ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A ?文章編號：1002-1302（2021）13-0104-04

油菜是我國種植面積最大，地區(qū)分布最廣的重要油料作物。蚜蟲是油菜的主要害蟲，防治不當(dāng)一般可造成油菜產(chǎn)量損失10%～20%，嚴(yán)重的可達(dá)30%以上[1]。由核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum）引起的菌核病是油菜的主要病害之一，該病在我國油菜主產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，能夠?qū)е?0%～70%的產(chǎn)量損失[2]。菌核病和蚜蟲已經(jīng)成為近幾年油菜生產(chǎn)威脅最大的病蟲害，嚴(yán)重影響了油菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[3-4]。油菜種植過程中，蚜蟲和菌核病在整個生育期都可發(fā)生，它們主要通過侵染葉片對作物造成損傷。隨著用藥次數(shù)和用藥量的不斷增加，病蟲害的抗性也在不斷提高，因而使用具有緩釋性能的復(fù)配藥劑進(jìn)行防治顯得十分必要[5]。

高效氯氟氰菊酯殺蟲譜廣，同時具有較強(qiáng)的觸殺和胃毒作用，是擬除蟲菊酯中毒力最高的品種之一，但存在持效期短和易引起打藥者皮膚瘙癢、紅腫等缺點(diǎn)[6]。戊唑醇是一種高效、廣譜、內(nèi)吸性三唑類殺菌劑，具有保護(hù)、治療和鏟除作用，對油菜菌核病防效較好，還具有抗倒伏、增產(chǎn)等作用[7]。在田間作業(yè)過程中，勞動者通過農(nóng)藥霧滴在皮膚上的沉積、滲透和吸收作用接觸農(nóng)藥，由于部分農(nóng)藥本身的特性，可引起刺激性或過敏性皮膚疾病，造成勞動者無法長時間打藥甚至能引起一定程度的皮膚損傷。將高效氯氟氰菊酯用具有快速釋放特性的微膠囊包裹，特殊的微囊形式賦予了高效氯氟氰菊酯良好的速效性和較低的皮膚刺激性，進(jìn)一步提高施藥者的安全，再與戊唑醇一起加工制成微囊懸浮-懸浮劑，開發(fā)獲得的藥劑兼具殺蟲和殺菌功效，并且搭配緩釋劑型既提高了防治效果又有利于延緩靶標(biāo)的抗性發(fā)展[8]。

本研究主要是在高效氯氟氰菊酯+戊唑醇復(fù)配組合的基礎(chǔ)上，結(jié)合快速釋放型微囊加工技術(shù)，制得30%（5%+25%）高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑產(chǎn)品，通過測試產(chǎn)品對油菜蚜蟲和油菜菌核病的防治效果，評估不同配方產(chǎn)品的藥效，探索最佳的使用方式;再通過測定產(chǎn)品對兔子皮膚的刺激性以及大棚打藥過程中對人體皮膚的刺激性，綜合評估產(chǎn)品刺激性的改善程度;進(jìn)而篩選獲得藥效較高并且刺激性較低的理想產(chǎn)品，以期為后期的田間推廣應(yīng)用提供技術(shù)支持和數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)中使用的30%（5%+25%）高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑為筆者所在實(shí)驗(yàn)室制備，10%高效氯氟氰菊酯水乳劑，山東禾宜生物科技有限公司生產(chǎn);10%高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑快速釋放型，先正達(dá)作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)，普通釋放型，南通聯(lián)農(nóng)農(nóng)藥制劑研究開發(fā)有限公司生產(chǎn);43%戊唑醇水懸浮劑，江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司生產(chǎn)。所有藥劑均來自市購。

1.2 主要測試方法

1.2.1 產(chǎn)品對病蟲害防治的盆栽試驗(yàn)

1.2.1.1 對油菜蚜蟲防治效果的測定 試驗(yàn)于2019年4—5月在江蘇省昆山市玉葉蔬食產(chǎn)業(yè)基地進(jìn)行。將油菜蚜蟲接到油菜苗上，大約5～7 d，待油菜蚜蟲在油菜上種群穩(wěn)定后（油菜蚜蟲有下代產(chǎn)生），調(diào)查種群基數(shù)。然后將不同處理的藥劑按推薦使用劑量進(jìn)行稀釋，并噴灑葉面，同時以清水處理作為對照，每隔一定時間統(tǒng)計(jì)油菜蚜蟲種群數(shù)，計(jì)算防蟲效率。每個處理3次重復(fù)，每次重復(fù)2盆。

防蟲效率=（對照蚜蟲種群數(shù)-處理蚜蟲種群數(shù)）/對照蚜蟲種群數(shù)×100%。

1.2.1.2 對油菜菌核病防治效果的測定 試驗(yàn)于2019年4—5月在江蘇省昆山市玉葉蔬食產(chǎn)業(yè)基地進(jìn)行。將帶有菌核病的菌絲塊接種到油菜葉片上，然后保溫保濕，促使病原菌侵染和發(fā)病。接種24 h后，將不同處理的藥劑按推薦使用劑量進(jìn)行稀釋，并噴灑葉面，同時以清水處理作為對照，每隔一定時間統(tǒng)計(jì)發(fā)病面積，計(jì)算防病效率。每個處理3次重復(fù)，每次重復(fù)10個接種點(diǎn)。

防病效率=（對照病斑面積-處理病斑面積）/對照病斑面積×100%。

1.2.2 產(chǎn)品應(yīng)用的刺激性測試

1.2.2.1 兔子皮膚刺激性試驗(yàn) 試驗(yàn)委托蘇州合測生物技術(shù)有限公司進(jìn)行。3只健康成年家兔經(jīng)過檢疫期和適應(yīng)期后單籠飼養(yǎng)用于皮膚刺激試驗(yàn)。飼養(yǎng)動物房環(huán)境溫度維持穩(wěn)定。由于預(yù)計(jì)供試品無腐蝕性僅可能有刺激性，先選擇1只動物準(zhǔn)備去毛皮膚用于初始試驗(yàn)（右側(cè)未處理皮膚為自身對照），染毒4 h，皮膚腐蝕性現(xiàn)象未發(fā)生。染毒皮膚于去除供試品后1、24、48、72 h，7、14 d等時間點(diǎn)繼續(xù)進(jìn)行觀察和皮膚反應(yīng)評分。初始試驗(yàn)未見皮膚腐蝕性反應(yīng)，另外準(zhǔn)備 2 只動物用于確證試驗(yàn)。動物左側(cè)去毛皮膚染毒4 h，右側(cè)皮膚為自身對照。于去除并清洗殘余供試品后1、24、48、72 h，7、14 d進(jìn)行觀察和皮膚反應(yīng)評分。染毒后每天上午、下午各觀察1次動物臨床癥狀，并詳細(xì)記錄皮膚反應(yīng)恢復(fù)過程。根據(jù)皮膚反應(yīng)評分和反應(yīng)可逆性進(jìn)行綜合評價。

1.2.2.2 大棚打藥的刺激性測試 試驗(yàn)于2019年9月在江蘇省昆山市玉葉蔬菜基地大棚進(jìn)行。將藥劑稀釋到使用濃度，分別在溫度、大小相同的大棚中進(jìn)行打藥，根據(jù)打藥者對樣品的刺激性感覺進(jìn)行評分，評估打藥過程中不同樣品產(chǎn)生的臉部刺激性和上身刺激性。

1.3 數(shù)據(jù)處理

對不同處理的防效調(diào)查數(shù)據(jù)，利用SPSS進(jìn)行鄧肯氏新復(fù)極差法統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 產(chǎn)品的藥效測試

試驗(yàn)考察了具備快速釋放性能的30%高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑樣品（30%LAM+TEB ZC）對油菜主要病蟲害的防效，同時以10%高效氯氟氰菊酯水乳劑（10%LAM EW），10%高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑快速釋放型（10%LAM CS1）和普通釋放型（10%LAM CS2），43%戊唑醇水懸浮劑（43%TEB SC）作為比較，研究不同性能樣品的藥效差異。

2.1.1 不同處理對油菜蚜蟲的防效 從表1可以看出，2種快速釋放型的微囊產(chǎn)品處理對油菜蚜蟲的速效性和持效性相當(dāng)，整體防效略低于高效氯氟氰菊酯水乳劑處理，統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異不顯著;微囊包裹后影響了高效氯氟氰菊酯藥效的發(fā)揮，因而普通釋放型高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑（10%LAM CS2）處理的藥效要明顯低于其他處理。試驗(yàn)中施藥后7 d蚜蟲數(shù)回升，因此在正常季節(jié)防治蚜蟲時可考慮藥后7 d進(jìn)行2次噴藥?？紤]到高效氯氟氰菊酯以觸殺性作用為主，施藥時要注意正反面均勻施藥。

2.1.2 不同處理對油菜菌核病的防效 不同處理對油菜菌核病的防治效果見表2。試驗(yàn)中不同劑量的藥劑對油菜菌核病的防治效果相當(dāng)，其中高劑量的藥劑防治效果略優(yōu)于低劑量處理，處理間差異不顯著。高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑對油菜菌核病的防治效果較好，具有與戊唑醇水懸浮劑同等的藥效。

2.2 產(chǎn)品的刺激性測試

分別通過兔子皮膚刺激性和大棚打藥刺激性試驗(yàn)考察了30%高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑樣品（30%LAM+TEB ZC）以及不同釋放性能的高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑樣品[快速釋放型（10%LAM CS1）和普通釋放型（10%LAM CS2）]的刺激性，同時以未使用微囊技術(shù)的高效氯氟氰菊酯水乳劑樣品（10%LAM EW）作為參照，研究微囊包裹后對高效氯氟氰菊酯刺激性的改善程度。

2.2.1 兔子皮膚刺激性的測試結(jié)果 原發(fā)性皮膚刺激性指數(shù)（PDII）是一種根據(jù)在皮膚上單次使用制劑時觀察到的急性毒性反應(yīng)將局部制劑分為不同類別的方法[9]。根據(jù)PDII評分，該制劑可分為嚴(yán)重刺激性、中等刺激性、輕度刺激性、輕微可忽略的刺激性和無刺激性（表3）。本試驗(yàn)使用兔子皮膚進(jìn)行測試，不同處理的兔子皮膚反應(yīng)照片見圖1。綜合評價觀察到的反應(yīng)的性質(zhì)和可逆性，加權(quán)計(jì)算得到各處理的PDII評分，結(jié)果見表4，試驗(yàn)中10% LAM CS2和30% LAM+TEB ZC的PDII評分分別為0.3、0.7，為輕微可忽略的刺激性，明顯低于其他處理;10% LAM EW的PDII評分最高，其次為10% LAM CS1。綜合來看，使用微膠囊技術(shù)包裹高效氯氟氰菊酯原藥，可以降低其對皮膚的刺激性;同時，高效氯氟氰菊酯釋放速率越快，皮膚刺激性也越高。

2.2.2 大棚打藥刺激性的測試結(jié)果 結(jié)合兔子皮膚刺激性試驗(yàn)測試結(jié)果，選取具有快速釋放性能的微囊產(chǎn)品30% LAM+TEB ZC和10% LAM CS1以及水乳劑10% LAM EW作為研究對象，分別讓10名打藥者在（35±2） ℃溫室大棚內(nèi)噴施1桶藥液，體驗(yàn)不同藥劑的刺激性，并對樣品的刺激性情況進(jìn)行打分（以臉部刺激性和上身刺激性評分的總和作為樣品刺激性的綜合評分），根據(jù)藥劑的綜合評分和單項(xiàng)評分確定刺激性分類（表5），結(jié)果見表6。

試驗(yàn)中，使用30%LAM+TEB ZC（高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑）稀釋液進(jìn)行打藥，1桶水施完，打藥者皮膚接觸刺激不明顯。同樣的情況，使用10%LAM CS1（高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑快速釋放型）稀釋液，在大棚里就感覺有較強(qiáng)的刺激性，特別是10%LAM EW（高效氯氟氰菊酯水乳劑）稀釋液，在連續(xù)噴施1桶水后，刺激性較明顯，打藥者上身感覺到明顯瘙癢，不愿意繼續(xù)使用該藥劑。

綜上所述，通過微囊化技術(shù)包裹后可以顯著降低樣品的打藥刺激性，打藥刺激性綜合評分從3.2降低到0.9，產(chǎn)品的刺激性有了很大的改善，施藥者的用戶體驗(yàn)明顯變好。

3 討論與結(jié)論

本研究通過盆栽試驗(yàn)測試了不同藥劑對2種油菜主要病蟲害（油菜蚜蟲和油菜菌核?。┑姆佬?，驗(yàn)證了30%高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑的藥效，發(fā)現(xiàn)對高效氯氟氰菊酯原藥進(jìn)行微膠囊包裹，會在一定程度上降低產(chǎn)品的藥效;高效氯氟氰菊酯的釋放速率越快，防效越好。30%高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑推薦應(yīng)用于防治油菜蚜蟲，藥后7 d應(yīng)進(jìn)行2次噴藥，考慮到高效氯氟氰菊酯以觸殺性作用為主，施藥時要注意正反面均勻施藥;該藥劑對油菜菌核病同樣具有很好的防效，在田間應(yīng)用時，可以在病蟲害多發(fā)期有效防治病害的同時降低蚜蟲對作物的侵害。

本研究設(shè)計(jì)了兔子皮膚刺激性和大棚打藥刺激性試驗(yàn)，用來綜合評價藥劑的實(shí)際應(yīng)用體驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)經(jīng)過微囊包裹后，可以顯著降低由高效氯氟氰菊酯原藥引起的刺激性（PDII從2.8降低至0.7，大棚打藥刺激性評分從3.2降低至0.9，刺激性分類從中度刺激性降低至輕微可忽略刺激性），使用微囊化技術(shù)來改善部分原藥的刺激性是可行的。結(jié)合防效試驗(yàn)結(jié)果，微囊化的藥劑防效越高，刺激性也越高;反之，刺激性低的藥劑，防效會變差，需要根據(jù)藥效和刺激性合理設(shè)計(jì)產(chǎn)品配方。30%LAM+TEB ZC被證明是優(yōu)選的目標(biāo)產(chǎn)品，它藥效較好并且在實(shí)際打藥過程中，施藥者對該藥劑的刺激性感覺不明顯，可以連續(xù)施藥，用戶體驗(yàn)良好。

高效氯氟氰菊酯和戊唑醇的復(fù)配組合兼具殺蟲和殺菌功效，二者混配可以提高藥劑對靶標(biāo)害蟲的防效，具有明顯的協(xié)同增效作用。并且微囊懸浮-懸浮劑這一劑型制備過程污染較少，屬于緩釋性能的水基化、環(huán)境友好型產(chǎn)品[10-11]。因此30%（5%+25%）高效氯氟氰菊酯+戊唑醇微囊懸浮-懸浮劑是一款兼具良好藥效和較低皮膚刺激性的優(yōu)良產(chǎn)品，特別適合于農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化的應(yīng)用要求，具有廣闊的應(yīng)用前景和較高的市場價值。

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