郭欣碩，徐小雅，黃萍萍，關 麗，羅 靳，郭 楠

(遼寧省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)基地建設工程中心，遼寧 沈陽 110032)

2.弧菌的鑒定結(jié)果

將分離得到的202株弧菌菌株通過分子生物學(PCR)的方法分析鑒定出21個弧菌種類，其中有45株分析鑒定結(jié)果為弧菌屬，詳見表4。分離結(jié)果顯示，大菱鲆弧菌的檢出占弧菌總數(shù)的33.7%，在總菌群中占的比例最高；托蘭宗弧菌、溶藻弧菌、魚腸道弧菌、嗜環(huán)弧菌、燦爛弧菌也均有檢出量，分別占到6.4%、4%、5.9%、5.9%、4.5%；哈維弧菌、副溶血弧菌、緩慢弧菌、大西洋弧菌、巨大弧菌等也均有檢出，但數(shù)量相對較少。對202株弧菌的鑒定表明，葫蘆島地區(qū)養(yǎng)殖大菱鲆應重視優(yōu)勢弧菌的病害防治。

表4 遼寧葫蘆島地區(qū)202株弧菌菌株的分離鑒定結(jié)果

3.弧菌屬對抗菌藥物的總體感受性

目前世界上對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)危害最大的主要疾病之一是弧菌病，據(jù)報道，弧菌侵染范圍廣的案例已經(jīng)很多，涉及人工養(yǎng)殖和野生魚。本試驗經(jīng)過分離鑒定，從202株弧菌中選取了86株弧菌，并對8種抗菌藥物進行藥物敏感性試驗，各種抗菌藥物對弧菌屬的最小抑菌濃度(MIC)區(qū)間及藥物的敏感率、耐藥率對比結(jié)果如表5所示。

從表5和圖1可以看出，供試菌株對各種抗菌藥物的總體感受性各有不同，恩諾沙星MIC偏向分布于0.1～3.13微克/毫升，表現(xiàn)出高度敏感性，敏感率為100%；鹽酸多西環(huán)素、硫酸新霉素MIC偏向分布0.1～25微克/毫升，敏感率分別為93.0%、48.8%；氟苯尼考MIC偏向分布于0.78～100微克/毫升，敏感率為64%；磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶MIC分別分布于1～512和1/0.2～512/102，最小抑菌濃度相對集中在1～32、1/0.2～32/6.4，敏 感 率 分 別 為83.7%、77.9%；甲砜霉素和氟甲喹MIC值分布具有相似性，最小抑菌濃度相對偏高，耐藥率分別為52.3%和57.0%，表明弧菌對兩類藥物的敏感程度較低。

圖1 弧菌的敏感率和耐藥率結(jié)果

表5 抗菌藥物對弧菌的MIC值區(qū)間及敏感率、耐藥率結(jié)果(n＝86)

三、討論

在大菱鲆養(yǎng)殖的過程中，常常因為養(yǎng)殖環(huán)境的惡化、致病性弧菌數(shù)量達到一定水平，導致了弧菌病害的發(fā)生。同時，養(yǎng)殖魚本身的抗病性下降也是由多種因素引起的。因此，及時防控和及時用藥可以有效減少養(yǎng)殖魚的大面積死亡。大菱鲆弧菌的耐藥性試驗對有效預防和控制大菱鲆弧菌感染具有重要指導意義。

根據(jù)分離鑒定結(jié)果，弧菌廣泛存在于該地區(qū)養(yǎng)殖的大菱鲆體內(nèi)，不同大菱鲆養(yǎng)殖場、不同日期均有檢出，春季和秋季分離出的弧菌數(shù)量比夏季多。在分離培養(yǎng)出的202株弧菌中，大菱鲆弧菌的檢出率最高，托蘭宗弧菌、大西洋弧菌、嗜環(huán)弧菌、魚腸道弧菌、燦爛弧菌、溶藻弧菌，巨大弧菌、緩慢弧菌、哈維弧菌、細小弧菌、副溶血弧菌、輪蟲弧菌、苜?；【⒒【鶫1309、卡那羅弧菌、異源弧菌、沙氏弧菌等也均有檢出。藥敏分析結(jié)果表明，弧菌種屬對恩諾沙星、鹽酸多西環(huán)素表現(xiàn)出高度敏感性，其次為磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶、氟苯尼考、硫酸新霉素，而對甲砜霉素和氟甲喹的耐藥性最強。

有學者認為，上述現(xiàn)象的原因與多種因素密切相關，例如，在大菱鲆養(yǎng)殖地區(qū)，養(yǎng)殖戶常常使用單一藥物、漁藥劑量不合理、給藥途徑不當以及耐藥菌株通過媒介傳播等(喬毅等，2015)。因此，根據(jù)試驗分析結(jié)果，建議將抑制作用明顯的恩諾沙星、氟苯尼考作為首選藥物，用于本地區(qū)弧菌類疾病的治療和預防。另外，也有一些藥物表現(xiàn)出了部分敏感，例如磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶等，在一定程度上也抑制了菌株的生長和繁殖。而對甲砜霉素和氟甲喹表現(xiàn)出大部分耐藥，說明本地弧菌菌株可能已經(jīng)對此類藥物產(chǎn)生了抗藥性，需要根據(jù)實際情況進行合理使用。筆者認為不合理地使用或者濫用水產(chǎn)藥物，不僅不能有效地預防和治療水產(chǎn)動物疾病，而且會導致養(yǎng)殖環(huán)境中耐藥菌株數(shù)量的增加，建議養(yǎng)殖者在保證良好養(yǎng)殖環(huán)境的條件下，根據(jù)藥物敏感性及發(fā)病癥狀合理選擇有效治療劑量，達到合理用藥的目的。此外，本研究樣品采集局限于遼寧省葫蘆島地區(qū)，雖然分離菌株耐藥性較高，但結(jié)果并非代表遼寧省的整體情況，之后仍需要進行大量的監(jiān)測普查，廣泛地進行取樣，提出更科學的、區(qū)域性的用藥建議。

(全文完)