官丁明 永安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 福建永安 366000

雞傳染性支氣管炎是由雞傳染性支氣管炎病毒引起的一種急性、高度接觸性傳染病，主要侵害雞的呼吸道、消化道和生殖系統(tǒng)，任何年齡、品種的雞均易感，給養(yǎng)雞業(yè)造成較大經(jīng)濟(jì)損失。目前，疫苗免疫是防治該病的最有效方法，但由于該病為單鏈RNA病毒，極易發(fā)生突變，導(dǎo)致自然界不斷出現(xiàn)新的血清型和基因型，同時(shí)不同毒株間缺乏有效的交叉保護(hù)，給該病的有效防控帶來了極大的壓力?，F(xiàn)將一起雞傳染性支氣管炎的綜合防治報(bào)道如下。

1 發(fā)病情況

某養(yǎng)殖場(chǎng)于2021年2月中旬引進(jìn)雛雞1 800羽，飼養(yǎng)到26日齡時(shí)陸續(xù)出現(xiàn)伸頸張口呼吸、甩頭、咳嗽、打噴嚏和死亡。畜主隨即對(duì)患雞進(jìn)行隔離，并使用泰樂菌素對(duì)全場(chǎng)雞群進(jìn)行預(yù)防，病情沒有得到有效控制，雞只死亡數(shù)進(jìn)一步增加。

2 臨床癥狀

雞群整體表現(xiàn)為咳嗽、打噴嚏，眼角流淚，鼻流黏性液體，羽毛松亂、雙翅下垂、食欲及精神不佳，患雞由于體溫升高而出現(xiàn)畏寒怕冷，表現(xiàn)聚集性取暖。病重雞呼吸困難、張口呼吸、食欲廢絕。

3 病理變化

剖檢病死雞見支氣管中有大量黃色分泌物，氣管及支氣管黏膜增厚、充血，并且附著黏性滲出物。

4 實(shí)驗(yàn)室檢查及診斷

4.1 引物的設(shè)計(jì)合成 根據(jù)S1基因片段的保守性，在其內(nèi)部設(shè)計(jì)引物，P上游：5'-GCGGAATTCGCTAATTTGTATGATAATG-3'，p下游：5'-ATCCTCGAGATAACTAACATAAGGGCA-3'，預(yù)期擴(kuò)展片段長度為1 600 bp。

4.2 病料采集 無菌采集患雞的氣管及喉頭部位病料，剪碎后研磨，加入5倍無菌生理鹽水混勻后，-20℃反復(fù)凍融3次，4℃6 000 r/min離心10 min，取上清液，加入雙抗。

4.3 雞傳染性支氣管炎總RNA提取及S1基因的RT-PCR擴(kuò)增 取上清液按照RNA提取試劑盒的要求進(jìn)行RNA提取。取提取的RNA 11μL，引物P下游1μL，70℃水浴10 min，冰浴5 min后，加入5×buffer 4μL，dNTP 2μL，AMV逆轉(zhuǎn) 錄酶2μL，ddH2O補(bǔ)至25μL，42℃水浴60 min，得到cDNA。取模版cDNA 3μL，Taq酶0.5μL，上下游引物各1μL，10×PCR buffer 5μL,Mg2+2μL，ddH2O補(bǔ) 至25μL。反應(yīng)程序：94℃預(yù)變性5 min；94℃變性45 s，50℃退火45 s，共進(jìn)行35個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸10 min。反應(yīng)結(jié)束后，取5μL PCR產(chǎn)物，加入上樣緩沖液，在混有GoldView的瓊脂糖凝膠上電泳，紫外燈下觀察結(jié)果。結(jié)果顯示，待測(cè)樣品可擴(kuò)增得到一條1 600 bp的特異性條帶（見圖1），表明測(cè)試樣品為陽性。

4.4 診斷 根據(jù)臨床癥狀、剖檢病變及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果可診斷該病為雞傳染性支氣管炎。

5 防治措施

5.1 隔離接種 將患雞與健康雞隔離，健康雞群更換場(chǎng)地并緊急接種新支120二聯(lián)活疫苗，對(duì)病死雞全部集中深埋處理。

5.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理 嚴(yán)格的飼養(yǎng)管理能有效預(yù)防該病的發(fā)生?？刂骑曫B(yǎng)密度，保持雞舍通風(fēng)干燥，雞舍及其周邊打掃干凈后，用過氧乙酸每天消毒2次。由于時(shí)值春季，當(dāng)?shù)貧鉁卦缤頊夭钶^大，濕度高，為減少應(yīng)激，在飲水中適當(dāng)添加多維以提高機(jī)體抵抗力。

5.3 治療 目前對(duì)該病尚無十分有效的治療措施，對(duì)于輕癥的雞只使用麻杏石甘散、金銀花抗病毒治療，有一定效果。

6 結(jié) 語

隨著雞養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，應(yīng)該結(jié)合自場(chǎng)的實(shí)際情況和本地區(qū)疫病流行特點(diǎn)制定相關(guān)的免疫和飼養(yǎng)管理措施，從根本上做好雞傳染性支氣管炎等呼吸道疾病的防治工作?？茖W(xué)、合理、適時(shí)地開展免疫，嚴(yán)格飼養(yǎng)管理，適時(shí)調(diào)整養(yǎng)殖密度，保證雞舍通風(fēng)干燥，減少應(yīng)激，提供富含電解多維的飼料等是有效防控傳染性支氣管炎等的有效手段。