豆清液不同超濾組分體外抗氧化活性研究

□ 吳 靜 陳才霞 劉晶晶 胡萌萌 尹樂斌 邵陽學院食品與化學工程學院

豆清液是指點漿工藝中蛋白質(zhì)變性沉淀時析出的上清液或豆腐倒腦時產(chǎn)生的廢水，據(jù)統(tǒng)計，每加工1 t大豆可排放出2～5 t豆清液[1]。豆清液所含營養(yǎng)物質(zhì)豐富，化學需氧量、生物化學需氧量分別約為1 800～2 400 mg/L、4 000～ 6 000 mg/L，直接排放會造成嚴重的環(huán)境問題。大豆多肽具有高營養(yǎng)價值，具有抗氧化、降低膽固醇、抗肥胖和促進免疫功能等[2]，有關(guān)豆清液的高值化利用是目前的研究熱點。本文以豆清液為研究對象，將其通過不同濾膜進行超濾，評價不同超濾組分的抗氧化活性，為豆清液的綜合利用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 樣品與試劑

豆清液：實驗室自制；過硫酸鉀、三水合醋酸鈉：西隴化工股份有限公司；DPPH、TPTZ、ABTS：上海如吉生物科技發(fā)展有限公司；其他試劑均為常見分析純。

1.2 儀器設(shè)備

MSM2013超濾機組：上海摩速科學器材有限公司；分析光度計：上海舜宇恒平科學儀器有限公司；分析天平：梅特勒托利多儀器有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 豆清液超濾處理

對已經(jīng)粗過濾后的豆清液采取分別經(jīng)過10 kDa、5 kDa、3 kDa、800 Da、300 Da超濾膜截留分離，分別收集滲透液作為樣品液。依次制備分子量為110 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa、800 Da的不同組分濾液，然后測定各組分溶液的抗氧化活性。

1.3.2 抗氧化活性測定

DPPH自由基清除率測定參考Moyo B[3]等的方法；OH自由基清除率測定參考Smirnoff N[4]等的方法；ABTS自由基清除率測定參考Re R等[5]的方法。

2 結(jié)果與分析

2.1 豆清液不同超濾組分對DPPH自由基清除能力的測定結(jié)果

豆清液不同超濾組分對DPPH自由基的清除率如下表1，經(jīng)方差分析可知，按照顯著性水平P＜0.05分成了5個層次（a、b、c、d與e），10 kDa、3 kDa超濾膜處理前所得到的分子量組分之間的差異不顯著，其清除率最高為91.81%±3.43%。5 kDa膜前和膜后得到的分子量清除率差異不顯著。10 kDa膜后與800 Da膜后的組分差異不顯著，但清除率最低，為38.12%±3.12 %?？偟膩碚f，10 kDa、3 kDa、800 Da膜前與膜后的DPPH清除率組分差異顯著（P＜0.05）。

2.2 豆清液不同超濾組分對羥基自由基（OH）清除能力的測定結(jié)果

豆清液不同超濾組分對OH自由基清除率見表2，經(jīng)方差分析，9組樣品液按顯著性水平P＜0.05羥基清除率分成了4個層次（a、b、c、d）。10 kDa膜后、5 kDa膜前、3 kDa膜前與膜后、800 Da膜后這5個樣品組清除率較高，且差異不顯著。分別過膜的超濾方式得到的樣品液在10 kDa膜后的清除率最高，為94.72%±3.36 %。10 kDa、5 kDa、800 Da膜前與膜后組分差異顯著。

2.3 豆清液不同超濾組分對ABTS自由基清除能力的測定結(jié)果

豆清液不同超濾組分對ABTS自由基清除率如下表3。

表1 豆清液不同超濾組分對DPPH自由基清除率（單位：%）

表2 豆清液不同超濾組分對OH自由基清除率（單位：%）

表3 豆清液不同超濾組分對ABTS自由基清除率（單位：%）

經(jīng)方差分析可知，豆清液用分別過膜得到的組分ABTS自由基清除率按顯著性水平P＜0.05呈現(xiàn)出4個層次（a、b、c與 d）。10 kDa、5 kDa與800 Da膜前與膜后的組分清除率差異顯著，10 kDa膜后組分最高，為99.58%±0.08 %；而3 kDa膜前與膜后的組分清除率差異。

3 結(jié)論

將豆清液分別過膜通過孔徑110 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa與800 Da的濾膜，其DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基清除率非常高，說明豆清液原液是一種具有極強抗氧化活性的原料，為其高值化利用提供了理論數(shù)據(jù)。