劉曉,孫楠,王閆宇,王學(xué)梅通信作者,馮 坤,張海文
(1.海南大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,海南 ???570000;2.遵義醫(yī)科大學(xué)珠海校區(qū),廣東 珠海 519000)
脂類(lèi)是脂肪和類(lèi)脂的總稱(chēng),它是機(jī)體的能量來(lái)源,也是必需脂肪酸的提供者。但機(jī)體過(guò)多的脂肪沉積,明顯降低肉禽胴體品質(zhì)[1]。因此,開(kāi)發(fā)安全、綠色的飼料添加劑以增強(qiáng)畜禽的代謝能力對(duì)畜禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要意義[2]。
近年來(lái)我國(guó)中藥開(kāi)發(fā)利用逐漸實(shí)現(xiàn)規(guī)模化、工業(yè)化[3],但隨之產(chǎn)生的中藥渣產(chǎn)量也日益增加,而大量中藥渣被銷(xiāo)毀丟棄[4]。中藥生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生大量的中藥渣,其中包含多糖、蛋白質(zhì)、脂類(lèi)、黃酮、生物堿以及多種微量元素等大量可再利用的成分[5]。
隨著綠色養(yǎng)殖的發(fā)展,諸多學(xué)者研究發(fā)酵中藥渣作為飼料添加劑取代抗生素的可行性,因?yàn)橥ㄟ^(guò)生物發(fā)酵技術(shù)可以促進(jìn)中藥渣中活性成分的釋放,使中藥渣的生物質(zhì)資源得以充分利用。本試驗(yàn)旨在探討飼料中添加不同水平發(fā)酵中藥渣對(duì)文昌雞脂類(lèi)代謝的影響,為中藥渣資源在畜禽業(yè)的進(jìn)一步利用提供理論基礎(chǔ)。
基礎(chǔ)日糧由海南大學(xué)熱帶動(dòng)物繁育與營(yíng)養(yǎng)學(xué)實(shí)驗(yàn)室加工生產(chǎn)。添加發(fā)酵中藥渣成分及處理方式:黨參藥渣22%、黃芪藥渣22%、皇竹草44%、麥麩11%、生石膏1%、含水量65%,高壓滅菌,靈芝菌有氧發(fā)酵培養(yǎng)30 d所得發(fā)酵產(chǎn)物烘干粉碎。
由譚牛文昌雞華僑農(nóng)場(chǎng)提供生長(zhǎng)狀況良好、體重相近(p<0.05)的45日齡文昌母雞192只,按照單因子4水平試驗(yàn)設(shè)計(jì)隨機(jī)分為4個(gè)處理,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6只,CK、T1、T2、T3組發(fā)酵中藥渣的添加水平分別為0%、0.5%、1.0%、1.5%,飼養(yǎng)時(shí)間為4周。
恒溫水浴鍋、震蕩攪拌器、組織勻漿機(jī)、冷凍高速離心機(jī)、分光光度計(jì)、1 cm比色皿、酶標(biāo)儀、移液槍、離心管。生理鹽水、雙蒸水、0.1 m MPBS試劑購(gòu)于江蘇科特生物科技有限公司??偰懝檀?T-CHO)試劑盒、甘油三酯(TG)測(cè)試盒、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測(cè)試盒、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測(cè)試盒均購(gòu)自南京建成生物科技有限公司。
第4周對(duì)試驗(yàn)文昌雞進(jìn)行屠宰,每重復(fù)屠宰2只,分離血清,于-20℃保存,備用。另將肝臟分離,準(zhǔn)確稱(chēng)取部分組織重量,按照重量(g):體積(mL)=1:9的比例,加入生理鹽水,冰水條件下機(jī)械勻漿,制備成10%的組織勻漿,2 500 r/min離心10 min,取上清液,-20℃保存(10倍生理鹽水稀釋可制備1%的組織液)。血清和肝臟組織液中LDL-C、HDL-C、TG、T-CHO含量的測(cè)定按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
用SAS 9.2軟件ANOVA法對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,組間差異顯著性檢驗(yàn)用 Duncan’s 法進(jìn)行多重比較,結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
發(fā)酵中藥渣對(duì)文昌雞血清脂類(lèi)代謝的影響如表1所示。與CK相比T2、T3組TG顯著降低(p=0.011 0);T1、T2、T3組LDL-C/HDL-C相比對(duì)照組有極顯著降低(p=0.000 6),且隨著發(fā)酵中藥渣添加量的增加TG、T-CHO、LDL-C/HDL-C呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。
表1 發(fā)酵中藥渣對(duì)文昌雞血清脂類(lèi)代謝的影響
發(fā)酵中藥渣對(duì)文昌雞肝臟脂類(lèi)代謝的影響如表2所示。與CK相比T3組HDL-C顯著升高(p=0.019 7);T1、T2、T3組LDL-C/HDL-C極顯著降低(p=0.000 5);T3組TG顯著降低(p=0.014 7)且隨著發(fā)酵中藥渣添加量的增加LDL-C、TG、LDL-C/HDL-C呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),HDL-C呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)。
表2 發(fā)酵中藥渣對(duì)文昌雞肝臟脂類(lèi)代謝的影響
肝臟是異源物質(zhì)在機(jī)體進(jìn)行轉(zhuǎn)化和代謝的主要器官,是藥源性組織損傷的主要靶器官之一[5],研究肝臟的分泌功能和組織結(jié)構(gòu)是評(píng)價(jià)肝臟營(yíng)養(yǎng)代謝功能的重要內(nèi)容。文昌雞合成膽固醇的主要器官是肝臟和卵巢。血清中的膽固醇對(duì)維持機(jī)體的正常生理功能有著重要的作用,也是細(xì)胞膜及神經(jīng)髓鞘的重要組成成分之一。血清中的TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量與肉雞的脂類(lèi)代謝與脂類(lèi)沉積息息相關(guān),HDL-C主要轉(zhuǎn)運(yùn)血液中的TC、TG及載脂蛋白等到肝臟進(jìn)行再循環(huán)或轉(zhuǎn)化為膽汁酸排出體外,也就是說(shuō)能把機(jī)體內(nèi)組織中過(guò)多的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)到需要膽固醇的地方,再將過(guò)剩的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟,由膽汁途徑排泄至腸道進(jìn)而排出體外,從而使機(jī)體內(nèi)的膽固醇含量維持穩(wěn)定,以防止體內(nèi)多余的膽固醇沉積于組織細(xì)胞。LDL-C是TC含量最高的脂蛋白,它可將TC轉(zhuǎn)運(yùn)到外周組織,同時(shí)能夠?qū)C(jī)體自身合成的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至機(jī)體全身,促進(jìn)脂類(lèi)沉積[6],同時(shí)攝取在血漿中形成的膽固醇酯。
本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)發(fā)酵中藥渣的添加量為1.5%時(shí),肝臟中HDL-C的含量極顯著升高,肝臟和血清中TG含量極顯著降低,表明經(jīng)過(guò)靈芝菌發(fā)酵過(guò)的中藥渣可以促進(jìn)膽固醇的分解代謝,調(diào)節(jié)文昌雞的脂肪代謝,降低脂類(lèi)在體內(nèi)的沉積。張利娟等用黃芪多糖等飼喂江漢雞,發(fā)現(xiàn)其可以顯著降低 TG 含量,這與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果一致[7]。
在基礎(chǔ)日糧中添加發(fā)酵中藥渣可提高文昌雞營(yíng)養(yǎng)代謝能力,且以1.5%的添加量相對(duì)合適。