摘 要:為提高鮮棗貯藏保質(zhì)期,試驗(yàn)選取采后鮮棗貯藏期發(fā)生的侵染性病害青霉屬為研究對(duì)象,用幾種低殘留的化學(xué)藥劑來篩選對(duì)青霉屬的抑制效果。結(jié)果表明,ASM對(duì)青霉屬具有很好的抑制效果。
關(guān)鍵詞:鮮棗;青霉菌;抑制效果
鮮棗維生素C含量充足,是我國優(yōu)良的水果品種,但在貯藏期病害嚴(yán)重,這嚴(yán)重制約著棗業(yè)的健康、可持續(xù)發(fā)展。由細(xì)菌病原和真菌病原及其復(fù)合侵染引起的采后病害是鮮棗腐爛的重要原因。通過采用物理、化學(xué)或生物的方法誘導(dǎo)果蔬的抗病性已成為控制或減輕鮮棗采后病害的新手段。
1.1 材料與設(shè)備
試驗(yàn)材料:鮮棗。
試驗(yàn)試劑:硅酸鈉、氯化鈣、硝普鈉、過氧化氫、苯丙噻重氮、PDA培養(yǎng)基。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1病原菌的分離與純化。挑取發(fā)病后的棗果,切取其發(fā)病組織4~5平方毫米,無菌水沖洗后用70%酒精浸泡30秒,移至1%次氯酸鈉溶液浸泡1分鐘,取出用滅菌水沖洗3遍,移至普通PDA培養(yǎng)基上28℃培養(yǎng)。待長出菌落,根據(jù)菌落形態(tài)、顏色等分別挑取菌落轉(zhuǎn)接于PDA培養(yǎng)基28℃培養(yǎng),采用單菌落分離法純化培養(yǎng),4℃保存。
1.2.2純化菌種形態(tài)學(xué)鑒定。鏡檢確定病原菌的種類,鑒定到屬。鑒定結(jié)束挑取青霉屬病菌制成菌懸液,滴1滴于PDA培養(yǎng)基上,28℃恒溫培養(yǎng)72小時(shí),備用。
1.2.3化學(xué)藥劑對(duì)青霉屬的抑菌效果初篩。用直徑為13毫米的打孔器在青霉屬的平板菌絲體上切取菌餅,接種到0.5%(v/v)的化學(xué)藥劑的培養(yǎng)皿中央,設(shè)定3個(gè)平行,不含藥劑的PDA平板為對(duì)照,28℃培養(yǎng)。當(dāng)對(duì)照的菌體長至培養(yǎng)皿邊緣時(shí),用十字交叉法測量菌落直徑。抑菌率計(jì)算公式:
抑菌率(%)=(對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對(duì)照菌落直徑-原菌餅直徑)×100% 1.2.4較好效果化學(xué)藥劑對(duì)青霉屬菌絲生長的影響。PDA培養(yǎng)基高壓滅菌后冷卻至60~80℃時(shí),加入無菌水配置的化學(xué)藥劑,藥劑含量分別為0.125%、0.250%、0.375%、0.500%(v/v),不含藥劑的PDA平板為對(duì)照,將菌餅接種到培養(yǎng)皿中,28℃恒溫培養(yǎng)5天后,測定菌落直徑,計(jì)算抑菌率。以抑菌劑有效成分含量的對(duì)數(shù)值(x)與菌絲生長抑菌率的機(jī)率值(y)計(jì)算獨(dú)立回歸方程及EC50(抑菌率為50%時(shí)所需化學(xué)藥劑的有效濃度)。
1.2.5 數(shù)據(jù)分析。采用 Microsoft Excel 2010統(tǒng)計(jì)分析、Origin 8.0繪圖。
2.1 幾種化學(xué)藥劑對(duì)青霉屬的抑菌效果
從表1可得過氧化氫和苯丙噻重氮對(duì)青霉屬病菌的抑制率均達(dá)到90%以上,硝普鈉的抑菌效果次之,硅酸鈉和氯化鈣對(duì)青霉屬的抑制率較低。過氧化氫、硝普鈉和苯丙噻重氮處理間差異顯著(p<0.05)。綜上,挑選苯丙噻重氮藥劑進(jìn)行下一步試驗(yàn)。
2.2 不同濃度的苯丙噻重氮對(duì)青霉屬的抑制效果
如圖1所示,苯丙噻重氮處理能有效抑制菌屬菌絲的生長,且抑制效果明顯。在0.125%(v/v)濃度下,抑菌率高達(dá)74%,當(dāng)濃度為0.5%(v/v)時(shí),青霉屬菌絲的生長幾乎被完全抑制。
化學(xué)藥劑對(duì)青霉屬的抑制率與藥劑濃度呈正相關(guān),以抑菌劑有效成分含量的對(duì)數(shù)值(x)與菌絲生長抑菌率的機(jī)率值(y)計(jì)算獨(dú)立回歸方程及EC50。苯丙噻重氮的回歸方程為:y=7.3809x-19.3560,擬合度達(dá)到96.53%,說明方程具有良好的可靠性、可行性。依據(jù)方程計(jì)算得出青霉屬有效抑制的生長濃度 EC50為0.20%。
從本次試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),病棗果實(shí)中分離鑒定得到的主要病原菌青霉屬病菌是棗果霉腐病的主要發(fā)病菌株,不同化學(xué)藥劑對(duì)青霉屬病菌的抑制試驗(yàn)表明,苯丙噻重氮能明顯抑制菌絲生長,且當(dāng)EC50為0.20%時(shí)對(duì)病果青霉屬的抑制效果顯著,藥劑殘留危害最低。鮮棗采收后儲(chǔ)藏加工可考慮采用0.20%的苯丙噻重氮來提高其保質(zhì)期。
■作者簡介:孟文芬(1993.6-),女,碩士在讀,從事草地生態(tài)研究。