張 霞,王中凱,鄭 佳,劉多濤,雷學俊,陳小文
(宜賓五糧液股份有限公司,四川宜賓 644000)
濃香型白酒的發(fā)酵是多種微生物和酶系共同作用的一個非常復雜的過程,其中發(fā)酵過程中酒醅的主要理化參數(shù)包括水分、酸度、淀粉和殘?zhí)呛康壤砘笜?。酒醅理化指標的檢測是各大濃香型白酒企業(yè)在釀造生產(chǎn)過程中用于監(jiān)控日常生產(chǎn)的重要環(huán)節(jié),是生產(chǎn)任務能否順利完成的保障。在實際生產(chǎn)過程中,需要保證酒醅理化指標在一定數(shù)值范圍內(nèi),酒醅發(fā)酵才能達到最佳效果[1-2]。濃香型白酒酒醅的研究多數(shù)是針對入窖糟和出窖糟理化數(shù)據(jù)的監(jiān)控[3],而窖內(nèi)發(fā)酵過程中酒醅卻研究得很少,這就導致了無法了解窖內(nèi)發(fā)酵過程“物系、酶系、菌系”發(fā)生了什么變化,更無法通過有限的數(shù)據(jù)找到
發(fā)酵過程中各項理化指標之間的關聯(lián)關系。如果能夠結合入窖、出窖酒醅和發(fā)酵過程中酒醅各項理化參數(shù)的數(shù)據(jù),加以分析就能夠為后續(xù)的生產(chǎn)操作提供決策的依據(jù),將生產(chǎn)異常的風險遏制在萌芽階段[4]。本研究目的在于探索窖池整個發(fā)酵過程酒醅各項理化指標的變化規(guī)律,揭示濃香型白酒的發(fā)酵規(guī)律和機理,在實際生產(chǎn)中利用理化指標數(shù)據(jù)更加精確的指導工藝操作,從而達到提高出酒率和酒質(zhì),實現(xiàn)優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)、低消耗的目的。
樣品采集:在釀酒車間選取兩口窖池作為平行取樣,分別取入窖、入窖后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、42 d、56 d 和出窖的酒醅樣品,樣品檢測指標取兩口窖池的平均值。將取得的酒醅樣品放入無菌袋并密封,及時送實驗室進行理化指標的檢測和蒸餾液醇酯分析。
試劑:酚酞、氫氧化鈉、基準苯二甲酸氫鉀、鹽酸、葡萄糖、次甲基蘭、硫酸銅、丙三醇等,均為市售分析純。
儀器設備:酒類分析儀(安東帕),奧地利安東帕(中國)有限公司;AVC-4D1 垂直流超凈工作臺、HWS26 型電熱恒溫數(shù)字水浴鍋、電熱鼓風干燥箱、電子天平,梅特勒-托利多儀器上海有限公司等。
1.2.1 水分的檢測[5]
用已烘至恒重的坩堝稱取混勻試樣10 g,105~110 ℃烘3 h,取出,放入干燥器中冷卻后稱重,再烘30 min,直至前后2次重量差不超過0.001 g為止。含水量計算公式:f=(w-w1)/w×l00%。
1.2.2 酸度的檢測[5]
稱取樣品20 g 于250 mL 燒杯中,加入200 mL水攪勻,于室溫下浸泡30 min,前15 min 充分攪拌,后15 min靜置。吸取20 mL上清液于250 mL三角瓶中,再環(huán)繞瓶壁加入約25 mL水。加入酚酞指示劑2滴,以0.1 mol/L氫氧化鈉標準溶液滴定至微紅色為其終點,平行試驗滴定允許誤差不得超過0.1 mL。
1.2.3 淀粉的檢測[5]
①水解:稱取試樣10 g 于250 mL 三角瓶中,加入1∶4 鹽酸溶液,輕輕搖動三角瓶,在瓶口裝上回流管,于電爐上回流水解30 min;取出,迅速冷卻,并用20 %氫氧化鈉溶液中和至微酸性;用脫脂棉過濾,濾液定容至250 mL。
②定糖:用斐林試劑滴定糖液,平行試驗滴定允許誤差不超過0.1 mL。
1.2.4 殘?zhí)堑臏y定[5]
吸取5 mL 已測酸度的酒醅液于三角瓶中,用斐林試劑滴定,平行試驗滴定允許誤差不超過0.1 mL,同時做平行空白試驗。
水參與白酒發(fā)酵所有生化反應,是細菌、霉菌、酵母生長代謝不可缺少的重要物質(zhì),微生物的生長和代謝與其存在的微環(huán)境的物質(zhì)循環(huán)、能量流動和信息傳遞的“三流運轉(zhuǎn)”,離不開水的直接或間接參與[6]。
由圖1 可見,無論是上層還是下層,中心還是邊緣,入窖酒醅水分均在54%~56%之間,酒醅水分總體趨勢都是隨著發(fā)酵天數(shù)的增多而逐漸升高,但是上升幅度卻有不同,整個發(fā)酵周期水分總體來說相差不大。發(fā)酵前期,窖池上層水分含量略大于邊緣酒醅水分含量,上層水分含量高于下層;發(fā)酵中后期,下層水分含量逐漸超過上層,發(fā)酵7 d 時上層中心酒醅水分含量急劇上升,14 d 變化幅度不明顯,上層邊緣酒醅水分在發(fā)酵7~21 d 也有個急劇上升階段,隨后略微下降,28 d 后逐漸升高,下層水分逐漸升高,7~14 d 升高速率較快。這是因為發(fā)酵初期窖池上層酒醅性狀疏松、氧氣充足,耗氧微生物繁殖迅速,代謝旺盛,使得上層水分略大于下層,而發(fā)酵中后期,隨著酒醅下層厭氧和兼性厭氧微生物的生長代謝,加上水分逐漸向下層滲透,導致發(fā)酵中后期下層水分含量逐漸增多;窖池邊緣水分要略大于窖池中心水分,我們猜測這應該是由于窖池邊緣更靠近窖壁,窖壁泥內(nèi)微生物更加豐富,其生長代謝能力更加旺盛,呼吸產(chǎn)生水分略多一些。
圖1 發(fā)酵過程中酒醅水分變化規(guī)律
酒醅窖內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)酒主要是微生物代謝過程,微生物生長代謝需要適宜的酸度,酸度過高或過低都不利于糖化和發(fā)酵,尤其是酒醅酸度過高,就會嚴重影響正常的生產(chǎn)過程。因此,發(fā)酵過程中酒醅酸度監(jiān)控也需要格外重視[7]。
由圖2 可見,無論是上層還是下層,中心還是邊緣,酒醅酸度總體趨勢都是隨著發(fā)酵天數(shù)的增多而逐漸升高,但是上升幅度卻明顯不同。發(fā)酵21 d前,窖池內(nèi)不同位置酒醅酸度幾乎沒有差別,上升幅度也很小,維持在2.5 左右,這應該是窖池內(nèi)微生物處于繁殖狀態(tài),代謝產(chǎn)酸還不夠多。發(fā)酵21 d 之后,窖池不同層次酒醅的酸度發(fā)生明顯變化,下層酒醅酸度急劇上升,上層酒醅酸度也略有上升,但上升幅度沒有下層酒醅大,同一層次中心和邊緣酒醅酸度相差不大。這是因為發(fā)酵中后期,微生物生長繁殖速度減緩,主要是進行代謝,代謝產(chǎn)酸導致酒醅酸度升高,隨著發(fā)酵的進行,下層厭氧和兼性厭氧微生物代謝逐漸旺盛,這應該是發(fā)酵中后期下層酒醅酸度急劇升高的原因之一。
圖2 發(fā)酵過程中酒醅酸度變化規(guī)律
淀粉是發(fā)酵過程中微生物繁殖所需的主要碳源,淀粉在釀酒過程中,在微生物的作用下水解成葡萄糖等單糖,然后糖化過程中,在各種酶的參與下轉(zhuǎn)化成乙醇,因此濃香型白酒殘淀和殘?zhí)堑暮块g接反映了白酒發(fā)酵過程的情況[8]。
由圖3 可知,無論是窖池上層還是下層,中心還是邊緣,酒醅淀粉含量都是隨著發(fā)酵天數(shù)的增多而逐漸降低,這符合微生物繁殖代謝消耗淀粉的規(guī)律。發(fā)酵前期,酒醅性狀疏松、有利于微生物利用淀粉用于自身生長或?qū)⒌矸坜D(zhuǎn)化為其他物質(zhì),此階段淀粉消耗量大,淀粉含量下降幅度較大。發(fā)酵第14 天,上層中心酒醅淀粉含量急劇下降,隨后變化幅度不明顯,這和水分變化規(guī)律比較一致,這應該是因為隨著發(fā)酵的進行,水分不斷增加的同時,酒醅中不斷積累著不利于微生物生長的代謝副產(chǎn)物,微生物利用淀粉的能力減弱[9]。而且,發(fā)酵后期酒醅中酸度增高,參與釀酒發(fā)酵過程的淀粉酶和糖化酶會受到一定程度的抑制,限制了微生物對于淀粉的利用[10]。結合圖1 和圖3,窖內(nèi)發(fā)酵過程中,酒醅水分與淀粉的變化規(guī)律呈相反關系,而結合圖2 和圖3 可知,釀酒發(fā)酵過程中部分微生物代謝淀粉的同時會產(chǎn)酸,此規(guī)律也符合微生物代謝的機理,同樣能為我們判斷酒醅淀粉利用程度提供依據(jù),再結合酒醅水分與酸度變化規(guī)律一致性的關系,有助于生產(chǎn)現(xiàn)場的快速判斷和決策。
圖3 發(fā)酵過程中酒醅淀粉含量變化規(guī)律
由圖4 可知,總體來說,窖池中酒醅殘?zhí)呛侩S著發(fā)酵過程的進行而逐漸降低,不同層次不同位置降低幅度和速率不同,這是因為,微生物生長代謝消耗淀粉的同時,淀粉分解產(chǎn)生糖,而微生物生長又需要糖類作為碳源,此消彼長,使得殘?zhí)呛砍孰A段式下降趨勢。發(fā)酵第3 天下層酒醅殘?zhí)呛窟_到最高值,隨后下降,到第21 天時,又達到一個頂峰,隨后逐漸降低;而上層酒醅殘?zhí)窃诎l(fā)酵第7 天達到頂峰,比下層晚了幾天,隨后逐漸下降直至出窖。這應該是因為發(fā)酵初期微生物主要處于生長繁殖階段,淀粉分解產(chǎn)生的糖類遠大于微生物消耗的糖類,使酒醅在發(fā)酵前期殘?zhí)呛可?,隨著發(fā)酵的進行,微生物代謝加快,消耗糖類速度大于淀粉分解產(chǎn)生糖類的速度,因此,發(fā)酵后期殘?zhí)呛恐饾u降低。而發(fā)酵前期主要是上層酒醅的耗氧微生物的生長繁殖,上層酒醅微生物消耗糖類要大于下層酒醅糖類的消耗量,使得上層酒醅殘?zhí)呛窟_到最高值晚于下層酒醅。
圖4 發(fā)酵過程中酒醅殘?zhí)呛孔兓?guī)律
通過對濃香型白酒發(fā)酵過程中酒醅理化指標變化規(guī)律的研究,分析整個發(fā)酵周期酒醅的水分、酸度、殘淀和殘?zhí)堑淖兓闆r,發(fā)現(xiàn)不同層次、不同位置的理化指標呈現(xiàn)一定的規(guī)律。窖內(nèi)發(fā)酵過程中:(1)窖池不同層次,不同位置的酒醅水分含量和酸度隨發(fā)酵逐漸升高,而殘淀和殘?zhí)呛縿t逐漸降低,不同層次、不同位置各指標變化幅度不同;(2)酒醅水分和酸度的增加量均與酒醅淀粉的消耗量正相關。由此可見,發(fā)酵過程中,可通過這些理化指標之間的規(guī)律來判定酒醅發(fā)酵的情況,為生產(chǎn)過程控制提供數(shù)據(jù)和理論支持。