呂雙燕，羅鵬飛，舒 展

（新疆阿勒泰地區(qū)動物疾病控制與診斷中心，新疆 阿勒泰 836500）

布魯氏菌?。˙rucellosis）是由布魯氏菌（Brucella）引起的一種人畜共患傳染病[1]。人類布魯氏菌病的流行病學(xué)與家畜布魯氏菌病的發(fā)病率直接相關(guān)。OIE將其定為B類傳染病，我國列為二類疫病[2-3]。該病的主要病癥為母畜不孕、流產(chǎn)，公畜不育、關(guān)節(jié)炎等其他組織的局部病灶[4-5]。人被感染后會發(fā)生波浪熱、渾身關(guān)節(jié)疼痛、乏力等臨床癥狀，布魯氏菌病的病程反復(fù)而漫長[6]。該病在世界各地170多個地區(qū)廣泛流行，每年報告的病例超過50萬，特別是發(fā)生在地中海、非洲和拉丁美洲部分地區(qū)以及西亞、南亞和東亞。在我國人、畜間布魯氏菌病仍有發(fā)生，嚴重危害人類健康和畜牧養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。近年來，國內(nèi)、國外的布魯氏菌病疫情呈現(xiàn)上升的趨勢，并發(fā)現(xiàn)新的流行特征[7]。世界各國均相繼開展防治清除布魯氏菌病的相關(guān)防控計劃，但布魯氏菌病的防控將會是一個復(fù)雜而漫長的過程[8-9]。

本次試驗選擇新疆福?？h6 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)作為調(diào)查點，對福?？h域利用虎紅平板凝集試驗（RBT）的進行初篩，進一步通過試管凝集試驗（SAT）進行確診的方式，對福海縣牛羊的布魯氏菌病發(fā)生情況進行流行病學(xué)調(diào)查，為防控布魯氏菌病提供相關(guān)流行病學(xué)參數(shù)。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2019～2021年，以福海縣6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)為調(diào)查點，采集血樣14 080 份。其中，牛血樣8 455 份，羊血清5 625 份。分離血清，標記編號、年齡。-20 ℃冷凍保存，待檢。

1.2 試劑及儀器

布魯氏菌虎紅平板凝集抗原、布魯氏菌試管凝集抗原、布病標準陰陽性血清，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

DIGICEN20-R 高速低溫離心機（西班牙ORTOALRESA 公司）、臺式低速離心機（AXTD5A）、賽默飛世爾MK3（Thermo Fisher）、試管（北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司）。

1.3 結(jié)果判定

布魯氏菌病臨床檢測依據(jù)GB/T 18646—2018《動物布魯氏菌診斷技術(shù)》方法[10]，RBT 初篩，疑似樣品進行SAT確診。

RBT：試驗陰陽性成立的前提下，受檢血清在4 min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性（+），呈均勻粉紅色且無凝集現(xiàn)象者判為陰性（-）。

SAT：試驗陰陽性成立且抗原對照無自凝的前提下，牛1∶100 血清稀釋度，羊1∶50 血清稀釋度，出現(xiàn)“++”及以上凝集現(xiàn)象時，判定為陽性；牛1∶50 血清稀釋度，羊1∶25血清稀釋度，出現(xiàn)“++”以上凝集現(xiàn)象時，判定為可疑。試驗結(jié)果可疑的家畜經(jīng)30 d 后采血重檢，如果仍為可疑，該牛、羊判為陽性。

2 結(jié)果與分析

2.1 2019～2021年牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果（見表1）

由表1可知，采集牛血清8 455份；RBT初篩陽性血清111 份，將其進行SAT 檢測，確認陽性血清104 份，確診的牛布魯氏菌病總陽性率為1.23%。其中，2019～2021 年牛布魯氏菌病感染率分別為1.47%、1.15%及0.70%。

表1 2019～2021年牛羊布魯氏菌病感染檢測結(jié)果Tab.1 Detection results of brucellosis infection in cattle and sheep of 2019～2021

采集羊血清5 625份；RBT初篩陽性血清64份，將其進行SAT檢測，確認陽性血清60份，確診的羊布魯氏菌病總陽性率為1.07%。其中，2019～2021年羊布魯氏菌病感染率分別為1.39%、1.12%及0.59%。各年份感染率均呈現(xiàn)下降趨勢。

2.2 不同地區(qū)牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果（見表2）

由表2 可知，各地區(qū)牛布魯氏菌病陽性率分別為福海鎮(zhèn)0.76%、解特阿熱勒鎮(zhèn)1.66%、科克阿尕什鄉(xiāng)0.88%、齊干吉迭鄉(xiāng)0.80%、喀拉瑪蓋鎮(zhèn)1.96%、阿爾達鄉(xiāng)1.56%。

表2 不同地區(qū)牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果Tab.2 Results of detection of brucellosis in cattle and sheep in different regions

各地區(qū)羊布魯氏菌病陽性率分別為福海鎮(zhèn)0.77%、解特阿熱勒鎮(zhèn)1.42%、科克阿尕什鄉(xiāng)1.03%、齊干吉迭鄉(xiāng)0.92%、喀拉瑪蓋鎮(zhèn)1.17%、阿爾達鄉(xiāng)1.18%。其中，福海鎮(zhèn)牛羊感染率均最低。

2.3 不同年齡牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果（見表3）

由表3可知，試驗共計采集牛血清8 455份，其中，牛布魯氏菌病的感染年齡段從高到低分別為：2≤X<3、3≤X<6、0≤X<2 及X≥6，感染率分別為1.52%、1.17%、0.96% 及0.83%。

表3 不同年齡牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果Tab.3 Results of detection of brucellosis in cattle and sheep of different ages

共計采集羊血清5 625 份，羊布魯氏菌病的感染年齡段從高到低分別為：3≤X<6、2≤X<3、X≥6及0≤X<2，感染率分別為1.18%、1.09%、0.98%及0.93%。

3 討論

本研究中，采用RBT進行初篩，并進一步通過SAT 復(fù)測，2個試驗的顯示陽性率基本一致。在流行病學(xué)研究中，建議使用兩種測試方法，最大限度地提高測試結(jié)果的準確性[11]。RBT是一種高度敏感的測試，可以很容易地在現(xiàn)場條件下篩選，而SAT 是高度特異和敏感的試驗，通常在布魯氏菌病的診斷中用作檢測布魯氏菌抗體的確診試驗[12-13]。本試驗RBT 初篩、SAT 復(fù)測的結(jié)果顯示，牛布魯氏菌病總陽性率為1.23%，羊布魯氏菌病總陽性率為1.07%。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的感染率略有不同。其中，牛布魯氏菌病感染率為0.76%～1.96%，羊布魯氏菌病感染率為0.77%～1.42%。

不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)的較高流行率可能與牧區(qū)養(yǎng)殖模式有關(guān)。家庭式養(yǎng)殖與牧區(qū)中的畜群聚集在一起。該地區(qū)大部分以放牧為主，公共草場地多且面積大。不同畜種、畜群規(guī)模、牧場和供水點等因素促進了疾病的傳播，特別是在流產(chǎn)后增加共同喂養(yǎng)和飲水點的接觸促進了布魯氏菌生物的傳播[14]。牧群的頻繁遷徙可能會增加與不同鄰近地區(qū)的其他潛在感染畜群接觸的機會，尤其是大量未經(jīng)檢疫外縣牲畜被帶牧人帶入本地[15-17]。

全球動物產(chǎn)品貿(mào)易的不斷增加也是導(dǎo)致各種病原體傳播的原因。我國采取檢測和屠宰政策以根除動物布魯氏菌病，可以有效降低布魯氏菌病的發(fā)病率和流行率。但是，難以實時確定布魯氏菌病感染的動物、無法控制牧場動物的遷徙、購買動物時未進行布魯氏菌病檢測以及部分牧民對布魯氏菌病缺乏教育等多種原情況均導(dǎo)致無法根除該疾病。

因此，新疆阿勒泰地區(qū)在該病的防控中做了一系列改進工作。每年定期對該病進行檢測篩查，一旦發(fā)現(xiàn)病畜，立即進行撲殺、焚燒等無害化處理，避免不必要的傳播。外來引進的牛羊，均檢測無布魯氏菌病且隔離觀察45 d，再次確認布病為陰性的牛羊方可混入大群；陽性病例立即撲殺并做無害化處理，徹底消滅傳染源。飼養(yǎng)圈舍定期清理，動物糞便進行統(tǒng)一處理[18]。在牛羊生長旺季，必須保證棚舍干凈、通風(fēng)、保暖。有母畜生產(chǎn)時要進行隔離飼喂，隨時檢測群體身體質(zhì)量，待穩(wěn)定后才能混養(yǎng)飼喂[19]。對于有流產(chǎn)史或生殖器官有明顯臨床變化的動物，最好先分開飼養(yǎng)，并對其實驗室檢查，做好流產(chǎn)原因調(diào)查，無傳染性風(fēng)險后再合群飼養(yǎng)。通過不斷努力，可以看出，近3年的牛羊布魯氏菌病的感染率均呈現(xiàn)下降趨勢。

4 結(jié)論

福海縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)均存在牛羊布魯氏菌病，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的感染率略有不同；部分感染率較高的地區(qū)，應(yīng)加強該地區(qū)的檢疫撲殺工作。