文 /黃志卓
我國肝癌(HCC)患病率占全球一半左右,全球新發(fā)HCC病例約為40萬,我國占20萬左右,且每年11萬人中死亡率占50%左右,占全球HCC死亡率45%左右[1-2]。該疾病主要是機體肝內(nèi)膽管細胞及肝細胞受到多種因素影響而產(chǎn)生癌變,若未對其實施針對性治療,可嚴(yán)重危及患者生命安全[3]。相關(guān)研究顯示[4],HCC在惡性腫瘤可極易誘發(fā)患者死亡,且多見于男性患者,年齡主要集中在40歲左右,同時具有預(yù)見性差、發(fā)病快等癥狀,因此針對性對該疾患者實施早治療、早診斷具有重要意義。由于病因眾多,發(fā)病機制復(fù)雜,只有在早期檢測診斷中及時發(fā)現(xiàn)問題,采取相關(guān)治療措施,才能保證患者存活率和生活質(zhì)量。臨床檢測中對于原發(fā)性肝癌的診斷通常以影像學(xué)檢查、肝穿刺、血清甲胎蛋白(AFP)檢測為主。取活體組織進行肝臟疾病的診斷,但肝臟穿刺比較痛苦,常常出現(xiàn)患者不愿配合、感染、出血等諸多問題[5-6]。目前采用血清進行肝功能檢查逐漸成為臨床上常用的診斷方式,具有無創(chuàng)性、重復(fù)性好、準(zhǔn)確性高、患者配合程度高、能反映不同肝病患者的肝功損害程度等優(yōu)點[7]。雖然基本可以有效檢測患者的腫瘤情況,但是檢測結(jié)果詳細情況和準(zhǔn)確率仍有待提高。
AFP在結(jié)構(gòu)上與人類的血清蛋白十分相似,是由胎兒發(fā)育早期肝臟與卵黃囊組成的一種血清蛋白,在肝細胞受損后,肝功能下降,其數(shù)值也會出現(xiàn)增高,肝癌細胞產(chǎn)生的AFP具有促進腫瘤生長的作用,并抑制免疫系統(tǒng)作用,因此AFP水平可反映腫瘤生長情況是臨床診斷肝癌重要參考指標(biāo)[8-9]。目前AFP是國際上公認的用于篩查肝癌的最好的腫瘤標(biāo)記物,若患者的AFP水平長時間持續(xù)高于400~500 ug/L時,采用肝臟超聲與AFP的聯(lián)合檢測可以有效地早期診斷早期肝癌[10]。
血清GGT與AFP均有癌胚特性,GGT是一種質(zhì)膜糖蛋白,血清中的GGT主要來自肝臟,主要存在于人體肝腎腸道等組織中,當(dāng)肝內(nèi)阻塞時,能誘導(dǎo)肝細胞分泌大量的GGT[11-12]。當(dāng)肝臟實體腫瘤組織生長時,細胞腫脹、壓迫肝細胞,肝細胞受到擠壓的刺激,使得正常肝細胞受激產(chǎn)生大量GGT,合成和分泌GGT增加,同時肝癌細胞本身也能產(chǎn)生大量GGT,釋放到外周血液中,故血清GGT水平明顯增加,有時甚至高達600IU/L以上[13]。
透明質(zhì)酸是一種氨基葡萄糖聚糖,它由一系列重復(fù)的二糖組成,β-dN-乙酰葡糖胺和β-d-葡萄糖醛酸通過β-1,4和β-1,3糖苷結(jié)合連接,肝臟是合成透明質(zhì)酸的重要器官。在肝臟中,透明質(zhì)酸被竇狀內(nèi)皮細胞降解,血清透明質(zhì)酸水平可能受肝細胞損傷和炎癥反應(yīng)誘導(dǎo)的星狀細胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞的影響,因此透明質(zhì)酸在肝內(nèi)的半衰期非常短(2-5分鐘),當(dāng)發(fā)生肝癌時,肝細胞清除及降解透明質(zhì)酸的能力下降,血清透明質(zhì)酸濃度升高,因此透明質(zhì)酸濃度升高可能和肝細胞受損相關(guān)。
HSP70在正常細胞中表達較低,但在應(yīng)激后表達明顯增加。寡核苷酸芯片被用于檢測人類肝細胞癌及其鄰近組織,結(jié)果顯示,95個基因可區(qū)分早期肝癌及其周圍組織,92個基因可區(qū)分早期肝癌和晚期肝癌,實時RT-PCR和免疫組化證實HSP70表達上調(diào),因此,HSP70可能是鑒別肝臟良惡性疾病一個潛在的組織分子標(biāo)志物[14]。
GS催化腫瘤細胞主要能量來源于谷氨酰胺的合成,GS在癌前病變、早期肝癌和晚期肝癌中的陽性率分別為1/23、4/31、19/149。GS、HSP70的敏感性和特異性分別為72%和100%。因此,聯(lián)合檢測GS、HSP70是肝癌早期診斷的理想指標(biāo)[15]。
DNA甲基化是腫瘤中最常見的分子改變之一,采用甲基化敏感性隨機擴增PCR技術(shù)對92個HCC基因的甲基化譜進行研究后發(fā)現(xiàn),有32個基因的甲基化頻率有變化,其中與早期肝癌相關(guān)的基因有14個,如CSPG2、OXCT、cyclin和RASSF1A等;與晚期肝癌相關(guān)的基因有9個,如DBCCR1、PENK、IRF7等[16]。這些基因的甲基化變化有待進一步驗證,其中一些可能是診斷肝癌的潛在分子。
MiRNA作為單鏈非編碼的小分子RNA,能夠與靶基因mRNA發(fā)生結(jié)合,從而引發(fā)降解或者翻譯抑制效果,進一步對靶蛋白表達水平進行影響,同時在信號通路中具有意義。MiRNA異常的表達水平與多種腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),研究發(fā)現(xiàn)MiRNA與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移微環(huán)境形成、浸潤甚至治療耐受等有密切關(guān)系[17]。近年來,眾多研究表明MiRNA與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切,主要是通過下調(diào)抗腫瘤免疫反應(yīng)而發(fā)揮作用,由于相關(guān)的靶基因?qū)δ[瘤的作用不同,不同MiRNA在腫瘤中表達情況也存在差異,因而可以根據(jù)這種表達差異來判斷MiRNA對腫瘤的調(diào)控作用[18]。
新的分子標(biāo)記物在研究人員的不懈努力下不斷被發(fā)現(xiàn),分子標(biāo)記物作為在肝細胞肝癌中起調(diào)控作用的非編碼小分子,在肝癌的診斷、治療和預(yù)后中都有一定的價值[19-20],可以為腫瘤的早期診斷、靶向治療、預(yù)后評估等提供新思路和新方法,已成為研究熱點[21-22]。但每種腫瘤標(biāo)記物在具體的臨床應(yīng)用當(dāng)中均會受到不同條件的限制,因此,需要對多種腫瘤標(biāo)記物進行臨床檢測,聯(lián)合檢測可在一定程度上提高診斷準(zhǔn)確率,進而指導(dǎo)臨床的針對性治療,改善預(yù)后[23-25]。