雷莉輝 張 浩 曹金元
北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院,北京102442
滑液囊支原體病,又稱滑膜炎,是由雞滑液囊支原體(Mycoplasma synoviae,MS)引起的一種傳染病?;耗抑гw病的主要特征為雞關(guān)節(jié)、腱鞘和爪墊腫脹,病雞常見胸部囊腫、氣囊有干酪物,其他臟器無(wú)明顯病變。近年來(lái),該病對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的危害越發(fā)嚴(yán)重,給養(yǎng)雞場(chǎng)帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
2020年4月,北京市房山區(qū)某肉雞養(yǎng)殖戶,11周齡肉母雞存欄800 只,肉公雞存欄200 只。從2020年4月16日起,該養(yǎng)殖戶陸續(xù)發(fā)現(xiàn)雞群中有100余只雞出現(xiàn)精神不振、縮脖呆立、久臥不起、關(guān)節(jié)和爪墊腫脹等癥狀,雖然將這部分病雞及時(shí)進(jìn)行了隔離,并用氟苯尼考與強(qiáng)力霉素拌料治療連續(xù)5 d后,病情并未得到抑制。截至2020年5月8日,仍有20 余只又先后出現(xiàn)類似癥狀,且最初發(fā)病的肉雞中有40余只出現(xiàn)癱臥而無(wú)法站立等現(xiàn)象,有12只肉雞死亡[1]。
在隔離病雞群中肉雞主要表現(xiàn)為精神不振、羽毛松亂、縮脖呆立、站立不穩(wěn)而喜臥、消瘦、雞冠蒼白,且采食量明顯下降;病程略長(zhǎng)的雞發(fā)育不良;病情較重的雞跗關(guān)節(jié)和跖關(guān)節(jié)有明顯的腫脹,站立和行走時(shí)以跗關(guān)節(jié)著地,跛行呈“八”字狀,行走困難甚至久臥不起,胸骨有囊腫,囊腫部位的皮膚呈現(xiàn)紫紅色。
對(duì)病雞剖檢可見典型的病變有:跗關(guān)節(jié)腫脹,觸診有明顯熱感,大部分病雞的跗關(guān)節(jié)和跖底腫脹部位切開后可見黃色或灰色黏性滲出物,病情嚴(yán)重的呈干酪狀;病雞翅關(guān)節(jié)腫脹、積液呈索狀,切開翅關(guān)節(jié),內(nèi)有膿性分泌物,個(gè)別雞翅關(guān)節(jié)剖開呈干酪樣;病雞胸肌和腿肌有出血斑和瘀血;肝與脾略有腫大、顏色發(fā)暗、質(zhì)硬,肌胃內(nèi)有綠色黏液狀內(nèi)容物,膽囊充盈脹滿。
綜合肉雞群發(fā)病情況及臨床診斷結(jié)論,初步懷疑為滑液囊支原體病。
該病根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀和剖檢變化可做出初步診斷,但最終確診還需進(jìn)一步進(jìn)行病原分離和鑒定[2]。
1)培養(yǎng)基的選擇。病原分離鑒定是滑液囊支原體病確診的金標(biāo)準(zhǔn),但病原分離培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)要求很高,并且分離培養(yǎng)需要的時(shí)間較長(zhǎng),且分離條件的選擇和優(yōu)化需要較長(zhǎng)的周期,通常采用改良Frey氏培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng)5~7 d。
改良Frey 氏培養(yǎng)基按說(shuō)明書配方要求加熱溶解后,經(jīng)116 ℃高壓滅菌30 min,冷至45 ℃左右時(shí)加入100 mL無(wú)菌馬血清、輔酶I 0.1 g、L-半胱氨酸0.1 g、精氨酸0.4 g和青霉素80萬(wàn)單位,用20%的NaOH 調(diào)節(jié)pH 值到7.8,然后過(guò)濾除菌,4 ℃冰箱冷藏備用。
2)病料的采集。隨機(jī)選取發(fā)病周期較長(zhǎng)的、癥狀典型的病雞4只,用棉拭子從喉支氣管采樣,并直接放入盛有5 mL 培養(yǎng)基的試管中,邊攪動(dòng)邊擠壓,以確保棉拭子上采集的病料盡可能多的移入培養(yǎng)基中;然后將棉拭子置入消毒缸中處理后棄去,并將培養(yǎng)基試管保存于冰盒中,在24 h 之內(nèi)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,移至37 ℃培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
3)菌落鑒定。將采集的病料在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3 代后,劃線分離到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),7 d 左右可在顯微鏡線觀察到“油煎蛋”樣的菌落,即可證明此為典型的支原體菌落。
采集病雞全血,分離獲得血清,進(jìn)行平板凝集反應(yīng)。即將分離得到的血清與滑液囊支原體染色抗原做平板凝集試驗(yàn),充分?jǐn)嚢杌靹蚝螅^察發(fā)現(xiàn)在2 min 內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀、絮狀凝集陽(yáng)性反應(yīng),據(jù)此,確定為雞滑液囊支原體病。
對(duì)發(fā)病隔離的雞群采用支原體敏感藥物來(lái)進(jìn)行治療,可選用泰樂(lè)菌素和金霉素進(jìn)行拌料飼喂5 d、停藥1 周的用藥方式連用2 個(gè)療程;對(duì)病情嚴(yán)重的雞群,用恩諾沙星注射劑連續(xù)注射2次,同時(shí)雞群飲水中添加電解多維。經(jīng)過(guò)治療,發(fā)現(xiàn)雞群有明顯好轉(zhuǎn),采食量逐漸恢復(fù)。對(duì)沒(méi)有發(fā)病的雞群,也用第一個(gè)方案進(jìn)行拌料飼喂1個(gè)療程[3]。
1)藥物預(yù)防。因商品化MS活疫苗價(jià)格高,需超低溫保存,對(duì)運(yùn)輸條件和儲(chǔ)存環(huán)境要求高,導(dǎo)致MS活疫苗暫時(shí)難以在肉雞臨床上廣泛推廣應(yīng)用。所以目前針對(duì)發(fā)病雞群要進(jìn)行全群用藥處理,可采用低劑量金霉素持續(xù)飲水來(lái)預(yù)防,及早淘汰無(wú)飼養(yǎng)價(jià)值的病雞。
2)疫苗預(yù)防。使用含MS 的支原體油苗,免疫效果不確定。使用無(wú)特定病原胚源的凍干苗,種雞場(chǎng)進(jìn)行支原體凈化,效果較好,可控制垂直傳播。
3)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。進(jìn)行支原體凈化,在引進(jìn)雞苗時(shí)進(jìn)行全群血清學(xué)檢測(cè);迅速處理病雞,防止感染其他雞舍;要加強(qiáng)生物安全意識(shí),進(jìn)出雞場(chǎng)要注意更衣、消毒鞋底或穿鞋套;降低飼養(yǎng)密度,改善雞舍通風(fēng)換氣條件,同時(shí)控制好雞舍溫度,避免各種可能造成應(yīng)激反應(yīng)的因素出現(xiàn);雞群定期消毒,必要時(shí)加強(qiáng)消毒頻次,阻斷該病水平傳播。
滑液囊支原體病在種雞、蛋雞、肉雞等不同階段均有發(fā)生,主要是通過(guò)人工授精或種蛋進(jìn)行垂直傳播,同時(shí)也可以經(jīng)呼吸道或傳播媒介進(jìn)行水平傳播。感染嚴(yán)重的種雞群發(fā)病率可達(dá)100%,群內(nèi)病死率可達(dá)30%。
雞群若飼養(yǎng)管理不當(dāng)、飼養(yǎng)管理?xiàng)l件突然改變,如冷空氣引起的應(yīng)激、雞舍通風(fēng)換氣不良、疫苗免疫不當(dāng)造成應(yīng)激較大時(shí),雞群發(fā)病率會(huì)明顯增加。糞便清理不及時(shí)造成的墊料污染、飲水不潔或飼料衛(wèi)生較差時(shí),會(huì)增加雞群水平傳播速度。
雞滑液囊支原體具有傳染性,目前對(duì)MS 的防控主要靠敏感抗生素和疫苗免疫2 種方式。而含MS 的支原體油苗免疫效果不確定,目前臨床上治療效果較好的為泰樂(lè)菌素、泰妙菌素、沃尼奧林等。如果能篩選出優(yōu)勢(shì)毒株研發(fā)出可推廣使用的疫苗,將會(huì)是肉雞MS 防控的主要方向。同時(shí)肉雞MS 防控關(guān)鍵是阻斷垂直傳播,在購(gòu)買雞苗時(shí)一種要注意種源問(wèn)題,盡量購(gòu)買大品牌廠家生產(chǎn)且做過(guò)該病種雞凈化的雛雞雞苗,從而避免造成該病的傳播。
在臨床生產(chǎn)中,因血清平板凝集試驗(yàn)(SPA)簡(jiǎn)便易操作、價(jià)格低廉、高敏感性而最受臨床歡迎。該方法在MS 感染的5~7 d 就能檢測(cè)出血清中的IgM 抗體。因此,血清學(xué)診斷是我國(guó)動(dòng)物防疫相關(guān)部門優(yōu)先選用的、容易向基層推廣的一種檢測(cè)方法。