Xpert MTB/RIF檢測(cè)對(duì)淋巴結(jié)結(jié)核的診斷價(jià)值

柯 薈，桂徐蔚，顧 瑾

同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院結(jié)核科，上海 200433

結(jié)核病被列為我國(guó)重大傳染病之一。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)計(jì)，我國(guó)是全球22個(gè)結(jié)核病流行嚴(yán)重的國(guó)家之一，同時(shí)也是全球27個(gè)耐多藥結(jié)核病流行嚴(yán)重的國(guó)家之一［1］。我國(guó)結(jié)核病年發(fā)病人數(shù)約為130萬(wàn)，占全球發(fā)病人數(shù)的14.3%，位居全球第2位。肺外結(jié)核占結(jié)核病患者的10%～20%［2］，其中淋巴結(jié)結(jié)核是臨床最常見(jiàn)的肺外結(jié)核。淋巴結(jié)結(jié)核中，以頸部淋巴結(jié)核最常見(jiàn)，占肺外結(jié)核的80%～90%［3-4］。頸淋巴結(jié)結(jié)核易與其他疾病引起的淋巴結(jié)炎相混淆［5］，誤診及不及時(shí)診治常導(dǎo)致疾病遷延不愈。另外，初治耐藥結(jié)核比例正在逐年升高，2018年的全球數(shù)據(jù)顯示，約有3.4%的初治結(jié)核為利福平耐藥或多耐藥結(jié)核［6］。因此，早期診斷、早期評(píng)估患者耐藥情況、早期治療是控制該病的重要手段。

相較于外科手術(shù)切除后病理活檢，超聲引導(dǎo)下淋巴結(jié)穿刺或活檢是一種簡(jiǎn)單易行的快速診斷技術(shù)，創(chuàng)傷性小，目前已廣泛應(yīng)用于頸部淋巴結(jié)結(jié)核的診斷中。但淋巴結(jié)穿刺或活檢所取標(biāo)本量相對(duì)較少，同時(shí)淋巴結(jié)結(jié)核分枝桿菌菌量較少，臨床結(jié)核分枝桿菌涂片陽(yáng)性率低；結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)的陽(yáng)性率雖然稍高，但常需要2個(gè)月左右，可能導(dǎo)致診治延誤［3］。淋巴結(jié)穿刺標(biāo)本較少，病理學(xué)檢測(cè)也常常缺乏特異性，從而難以確診。

利福平耐藥實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增技術(shù)（rifampicin resistantMycobacterium tuberculosissemi-nested multiple real-time fluorescence quantitative system，Xpert MTB/RIF）是一種診斷結(jié)核病和耐藥結(jié)核病的更快、更敏感的分子測(cè)試技術(shù)；與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室方法相比，它在提高診斷準(zhǔn)確性和縮短診斷時(shí)間上優(yōu)勢(shì)明顯，且可同時(shí)對(duì)利福平耐藥情況進(jìn)行檢測(cè)［7］。Xpert MTB/RIF檢測(cè)是在一個(gè)封閉的系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR），以rpoB基因?yàn)榘谢?，能夠? h內(nèi)診斷結(jié)核病并同時(shí)檢測(cè)利福平耐藥性。世界衛(wèi)生組織建議將Xpert MTB/RIF檢測(cè)作為疑似肺外結(jié)核患者的初始診斷試驗(yàn)［8］。目前，Xpert MTB/RIF檢測(cè)在肺結(jié)核的診斷中應(yīng)用較廣［9］，但對(duì)于其在診斷淋巴結(jié)結(jié)核方面的應(yīng)用效果，相關(guān)研究較為缺乏。本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)Xpert MTB/RIF檢測(cè)在診斷淋巴結(jié)結(jié)核時(shí)的準(zhǔn)確率與結(jié)核分枝桿菌涂片、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)及病理學(xué)檢測(cè)等進(jìn)行比較，分析聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)是否能提高淋巴結(jié)結(jié)核的診斷率。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

回顧性分析2016年1月至2018年12月在同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院初次診斷為頸淋巴結(jié)結(jié)核并接受淋巴結(jié)穿刺的351例患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18歲，臨床考慮淋巴結(jié)結(jié)核可能，進(jìn)行淋巴結(jié)細(xì)針穿刺或淋巴結(jié)活檢術(shù)送檢結(jié)核分枝桿菌涂片、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)、病理學(xué)檢測(cè)及Xpert MTB/RIF檢測(cè)。②淋巴結(jié)穿刺物送檢至少有1項(xiàng)陽(yáng)性結(jié)果。排除合并其他淋巴結(jié)疾病的患者。

收集患者性別、年齡、結(jié)核感染干擾素釋放試驗(yàn)（QuantiFERON-TB Gold，QFT）結(jié)果、合并癥［肺結(jié)核、人類(lèi)免疫缺陷病毒（human immune deficiency virus，HIV）感染、糖尿病等］情況、腫大淋巴結(jié)個(gè)數(shù)等臨床基本資料。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法

1.2.1 超聲引導(dǎo)下淋巴結(jié)穿刺或活檢 穿刺部位消毒、鋪單，在超聲引導(dǎo)下穿刺進(jìn)入病灶區(qū)，保持負(fù)壓狀態(tài)并使針尖在淋巴結(jié)內(nèi)反復(fù)進(jìn)行5～10次抽吸，立即抹片3～4張，選取2～3張投入95%乙醇中固定15m in后行蘇木精-伊紅（H-E）染色。取1張干片做瑞氏染色，便于觀察細(xì)胞量，細(xì)胞量少者需重復(fù)取材。針管內(nèi)剩余材料或重新穿刺獲取標(biāo)本分別留取送結(jié)核分枝桿菌涂片、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)（BACTEC MGIT 960液體快速培養(yǎng)）、Xpert MTB/RIF檢測(cè)、病理分子學(xué)檢查（細(xì)胞學(xué)涂片和/或組織病理切片、結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)）。穿刺操作、制片及診斷均由同一名醫(yī)師進(jìn)行。細(xì)針穿刺抽取組織性狀為灰紅灰白色顆粒狀物、淡黃色或灰白色膿樣物及灰白色乳酪樣黏稠物。

1.2.2 結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè) 采用結(jié)核分枝桿菌核酸檢測(cè)試劑盒（上海仁度生物科技有限公司），應(yīng)用熒光PCR技術(shù)進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)，具體步驟參照說(shuō)明書(shū)。將DNA＞500拷貝作為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3 Xpert MTB/RIF檢測(cè) 采用全自動(dòng)GeneXpert儀器及Xpert MTB/RIF試劑盒（美國(guó)Cepheid公司），按1∶1的比例加入等體積的樣品試劑，在室溫下15min的孵育時(shí)間中混合2次。將2m L的混合物轉(zhuǎn)移到測(cè)試管中，將測(cè)試盒裝入Xpert MTB/RIF儀器，2 h內(nèi)測(cè)定M.tuberculosisComplex（MTBC）的陽(yáng)性及對(duì)利福平的耐藥性［8］。

1.2.4 結(jié)核分枝桿菌快速培養(yǎng) 采用BACTEC MGIT 960全自動(dòng)分析儀（美國(guó)BD公司），按標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行分枝桿菌快速培養(yǎng)，陽(yáng)性培養(yǎng)液進(jìn)行一線抗結(jié)核藥的藥敏試驗(yàn)。同時(shí)，陽(yáng)性培養(yǎng)液接種至羅氏固體培養(yǎng)基，采用對(duì)硝基苯甲醛法鑒定結(jié)核分枝桿菌或非結(jié)核分枝桿菌；并采用改良羅氏絕對(duì)濃度間接法進(jìn)行抗結(jié)核藥物的敏感性試驗(yàn)。具體操作步驟參照《結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》［10］進(jìn)行。1.2.5 病理學(xué)檢查 每份標(biāo)本制作2張病理切片或涂片（膿液標(biāo)本），分別進(jìn)行H-E染色和抗酸染色。膿液涂片或病理切片經(jīng)抗酸染色可見(jiàn)分枝桿菌，確診淋巴結(jié)結(jié)核。H-E染色發(fā)現(xiàn)干酪樣肉芽腫或干酪樣壞死，檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌特異性插入序列IS6110、RV0577、16S rRNA陽(yáng)性確診淋巴結(jié)結(jié)核。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。定性資料的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

研究納入351例患者，排除無(wú)實(shí)驗(yàn)室依據(jù)即僅臨床診斷為頸淋巴結(jié)結(jié)核患者123例，未完成所有實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的患者83例，最終納入145例患者。納入患者的中位年齡 為27歲（18～85歲），其 中 男 性75例（51.7%）。66.9%的患者為多個(gè)淋巴結(jié)腫大，90.3%的患者合并肺結(jié)核，0.7%的患者合并糖尿病，QFT檢測(cè)陽(yáng)性者占82.7%（表1）。

表1 淋巴結(jié)結(jié)核患者的基本資料Tab 1 Demographic and clinical characteristics of the patients with lymph node tuberculosis

2.2 不同方法檢測(cè)結(jié)果

145例患者中，抗酸涂片陽(yáng)性患者39例（26.9%），結(jié)核分枝桿菌DNA陽(yáng)性患者74例（52.0%），Xpert MTB/RIF檢出患者111例（76.6%），結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性患者51例（35.2%），病理檢測(cè)陽(yáng)性患者87例（60.0%）。Xpert MTB/RIF檢測(cè)的陽(yáng)性率顯著高于其他4種檢測(cè)方法，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（與病理檢測(cè)結(jié)果比較，P=0.020 ；與其余2種檢測(cè)方法比較，P=0.0 0 0 ）。

111例Xpert MTB/RIF檢出的患者中，利福平耐藥患者8例（5.5%）；其中，6例結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陰性，2例陽(yáng)性同時(shí)提示利福平耐藥。

2.3 Xpert MTB/RIF聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率

Xpert MTB/RIF檢測(cè)聯(lián)合結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)的陽(yáng)性率最高（91.0%，132例），顯著高于結(jié)核分枝桿菌涂片聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)的結(jié)果（80.7%，117例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.017）；但與結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)果（88.3%，128例）及病理檢測(cè)聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)果（90.3%，131例）比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.564 ，P=1.000 ）。

3 討論

世界衛(wèi)生組織呼吁將在2030年全球結(jié)束結(jié)核病流行［11］，為達(dá)到此目標(biāo)，新增結(jié)核病患者需每年下降4%～5%。目前，每年新增結(jié)核病患者的下降率約為1.5%，按照目前結(jié)核病發(fā)病率的趨勢(shì)，實(shí)現(xiàn)2030年結(jié)束結(jié)核病流行的可持續(xù)發(fā)展目標(biāo)難度很大［12］。因此，我們需要通過(guò)提高結(jié)核病診斷率、開(kāi)發(fā)新的檢測(cè)方法、擴(kuò)大預(yù)防結(jié)核病風(fēng)險(xiǎn)因素等干預(yù)措施促進(jìn)該目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)［12］。在控制淋巴結(jié)結(jié)核措施中，提高診斷陽(yáng)性率具有重要意義。Xpert MTB/RIF可作為懷疑淋巴結(jié)結(jié)核的初始檢測(cè)方法。結(jié)核分枝桿菌的rpoB基因是結(jié)核分枝桿菌的特異基因片段，95%的利福平耐藥發(fā)生在rpoB基因突變上；86.0%利福平耐藥菌也對(duì)異煙肼耐藥，因此利福平耐藥可作為耐多藥結(jié)核病的監(jiān)測(cè)指標(biāo)［13］。

本研究提示，淋巴結(jié)結(jié)核男性患者比女性稍多，且多為年輕人，50%以上的患者＜30歲，82.7%的患者＜50歲。尼日利亞的一項(xiàng)研究［4］提示：30歲以下為淋巴結(jié)結(jié)核的高發(fā)年齡，且年輕女性較男性多發(fā)。但在本研究中，男女發(fā)病率無(wú)顯著差異。多發(fā)的淋巴結(jié)腫大較單發(fā)更為常見(jiàn)。約90%的淋巴結(jié)結(jié)核患者合并肺結(jié)核，因此對(duì)疑似淋巴結(jié)結(jié)核的患者需進(jìn)行肺部影像學(xué)檢查。本研究中，1例患者合并糖尿病，1例患者合并HIV感染。英國(guó)的一項(xiàng)回顧性研究［14］提示，51例患者中只有2例HIV感染者。HIV感染檢出率較低，可能與發(fā)病人群較年輕或者某些醫(yī)院不接收HIV確診患者有關(guān)。其他結(jié)核常見(jiàn)的合并癥如糖尿病，在淋巴結(jié)結(jié)核患者中并不常見(jiàn)，考慮此類(lèi)患者的免疫抑制因素多為經(jīng)濟(jì)因素、熬夜、工作壓力大等［12］。

Xpert MTB/RIF檢測(cè)在密閉環(huán)境中進(jìn)行，對(duì)操作者和周?chē)h(huán)境安全，并可在2 h內(nèi)得到檢測(cè)結(jié)果及了解耐藥情況。本研究提示Xpert MTB/RIF檢測(cè)陽(yáng)性率最高，為76.6%，略低于國(guó)外的檢測(cè)結(jié)果（89%～99%）［15-16］。國(guó)內(nèi)的類(lèi)似研究顯示，在鑒別淋巴結(jié)結(jié)核及其他淋巴結(jié)腫大疾病中，Xpert MTB/RIF檢測(cè)敏感度和特異度分別為91.3%（73/80）和100.0%（40/40）［17］。本研究中，利福平耐藥患者占5.5%（8/145），略高于國(guó)外類(lèi)似研究［4.7%（4/86）］［18］。值得注意的是，6例Xpert MTB/RIF檢出利福平耐藥的患者培養(yǎng)結(jié)果為陰性，可能與標(biāo)本組織量較少或菌株活力較低有關(guān)。臨床抗結(jié)核治療后疾病進(jìn)展的患者，在無(wú)藥敏指導(dǎo)治療的情況下，無(wú)法確定是誤診還是耐藥，可能延誤患者的診治或改變預(yù)后，需引起重視。

結(jié)核分枝桿菌涂片作為廉價(jià)、便捷的檢測(cè)方法，廣泛應(yīng)用于臨床。但是，在本研究中，涂片檢測(cè)的陽(yáng)性率只有26.9%（39/145）。結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)作為診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，陽(yáng)性率只有35.2%。既往研究［19］顯示，改良羅氏培養(yǎng)陽(yáng)性率為20%，液體培養(yǎng)陽(yáng)性率為40%。可能原因?yàn)榱馨徒Y(jié)取樣較小，結(jié)核分枝桿菌涂片為顯微鏡下肉眼觀察，菌量較少時(shí)可能遺漏；且多取樣于干酪樣壞死，伴液化區(qū)，活菌量較少，只能檢測(cè)出有活菌的標(biāo)本；抗酸染色涂片無(wú)法鑒別結(jié)核分枝桿菌及非結(jié)核分枝桿菌。結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)不僅需要2個(gè)月左右，而且可能因?yàn)榫昊盍Σ蛔銦o(wú)法做藥敏檢測(cè)；而Xpert MTB/RIF檢測(cè)可明顯縮短檢測(cè)時(shí)間，且陽(yáng)性率高于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)。

病理細(xì)胞學(xué)檢測(cè)在淋巴結(jié)結(jié)核診斷中亦具有重要的意義［20］，其確診依據(jù)主要有發(fā)現(xiàn)干酪樣壞死的肉芽腫及抗酸染色發(fā)現(xiàn)分枝桿菌。非結(jié)核分枝桿菌亦可出現(xiàn)類(lèi)似病理特征，與結(jié)核分枝桿菌鑒別困難，故本研究未選取肉眼可見(jiàn)干酪樣壞死作為診斷標(biāo)準(zhǔn)。分子病理學(xué)檢測(cè)主要應(yīng)用PCR的方法，操作更簡(jiǎn)便，成本更低廉，結(jié)果更快速、敏感。結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群的特異性IS6110是目前最常用的靶點(diǎn)，只存在于結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群中，可用于鑒別診斷結(jié)核病與非結(jié)核分枝桿菌?。?1］。既往實(shí)驗(yàn)提示IS6110具有很好的重復(fù)性及較高的靈敏度和特異度，還有潛力應(yīng)用于患者痰和血漿樣本中結(jié)核分枝桿菌微量核酸的檢測(cè)［22］。結(jié)核分枝桿菌蛋白R(shí)v0577是結(jié)核病患者的主要抗原，是導(dǎo)致結(jié)核分枝桿菌毒株中性紅染色的成分［21］。本實(shí)驗(yàn)中病理檢測(cè)陽(yáng)性的患者占60.0%，陽(yáng)性率高于“金標(biāo)準(zhǔn)”的培養(yǎng)結(jié)果，提示病理檢測(cè)也是一種早期診斷方法；但病理診斷需要更多的組織且無(wú)法進(jìn)行耐藥檢測(cè)，臨床意義仍不如Xpert MTB/RIF檢測(cè)。

本研究結(jié)果提示，聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)可以明顯提高頸淋巴結(jié)結(jié)核的診斷陽(yáng)性率。本研究中Xpert MTB/RIF聯(lián)合其他方法檢測(cè)的陽(yáng)性率均在80%以上。結(jié)核分枝桿菌DNA與Xpert MTB/RIF聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率顯著高于涂片聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)，但與另外2組聯(lián)合檢測(cè)方法比較無(wú)顯著差異。一項(xiàng)國(guó)外研究［20］提示，Xpert MTB/RIF聯(lián)合檢測(cè)可以將陽(yáng)性率從78%提升至92%。另有研究［23］提示，對(duì)于胸內(nèi)淋巴結(jié)腫大且惡性懷疑程度較低的患者，常規(guī)診斷方法結(jié)合Xpert MTB/RIF可進(jìn)一步快速診斷胸內(nèi)結(jié)核淋巴結(jié)炎，推薦作為淋巴結(jié)結(jié)核常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目［24］。Xpert MTB/RIF檢測(cè)目前在國(guó)內(nèi)是自費(fèi)項(xiàng)目，需要專(zhuān)門(mén)的儀器及試劑，在各個(gè)地區(qū)結(jié)核專(zhuān)科病區(qū)，甚至綜合性醫(yī)院開(kāi)展。目前諸多研究均表明Xpert假陽(yáng)性率較低［25-26］，不同檢測(cè)技術(shù)的最低檢出限值存在較大差異，Xpert MTB/RIF檢測(cè)為131 CFU/m L，結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)為100 CFU/m L。臨床中任何一種分子生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性而細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)，應(yīng)以分子生物學(xué)檢測(cè)為準(zhǔn)［27］。因此，為提高檢出陽(yáng)性率，建議臨床診斷時(shí)盡量采用Xpert MTB/RIF聯(lián)合檢測(cè)方法，在樣本量有限的情況下，優(yōu)先考慮Xpert MTB/RIF檢測(cè)，亦可同時(shí)獲得利福平耐藥情況，避免延誤診治給患者帶來(lái)不良后果。

本研究為回顧性研究，考慮其他細(xì)菌或者非結(jié)核性分枝桿菌引發(fā)的淋巴結(jié)腫大都有可能在診斷性抗結(jié)核治療后吸收，本實(shí)驗(yàn)的納入標(biāo)準(zhǔn)為有實(shí)驗(yàn)室確診依據(jù)的淋巴結(jié)結(jié)核患者，排除了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)均陰性的診斷性抗結(jié)核患者。

綜上所述，Xpert MTB/RIF檢測(cè)方法具有操作簡(jiǎn)便、耗時(shí)短、陽(yáng)性率高的特點(diǎn)，同時(shí)可對(duì)利福平耐藥基因進(jìn)行快速檢測(cè)。聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)在診斷頸淋巴結(jié)結(jié)核中具有較高的診斷效能，并能早期指導(dǎo)有效抗結(jié)核治療。淋巴結(jié)結(jié)核穿刺標(biāo)本量較少，可在標(biāo)本有限的情況下優(yōu)先選擇聯(lián)合Xpert MTB/RIF檢測(cè)。

參·考·文·獻(xiàn)

[1]Drobniewski FA,Caws M,Gibson A,et al.Modern laboratory diagnosis of tuberculosis[J].Lancet Infect Dis,2003,3(3):141-147.

[2]Mohapatra PR,Janmeja AK.Tuberculous lymphadenitis[J].J Assoc Physicians India,2009,57:585-590.

[3]Gautam H,Agrawal SK,Verma SK,et al.Cervical tuberculous lymphadenitis:clinical profile and diagnostic modalities[J].Int J Mycobacteriol,2018,7(3):212-216.

[4]Muluye D,Biadgo B,Woldegerima E,et al.Prevalence of tuberculous lymphadenitis in Gondar University Hospital,Northwest Ethiopia[J].BMC Public Health,2013,13:435.

[5]Sandu I,Mihai D,Corneci C,et al.Cervical lymph nodes,a diagnostic dilemma[J].Acta Endocrinol(Buchar),2020,16(1):112-113.

[6]MacNeil A,Glaziou P,Sismanidis C,et al.Global Epidemiology of Tuberculosis and Progress Toward Meeting Global Targets-Worldwide,2018[J].Morb Mortal Wkly Rep,2020,69(11):281-285.

[7]Horne DJ,Kohli M,Zifodya JS,et al.Xpert MTB/RIF and Xpert MTB/RIF Ultra for pulmonary tuberculosis and rifampicin resistance in adults[J].Cochrane Database Syst Rev,2019,6(6):CD009593.

[8]World Health Organization.Xpert MTB/RIF Implementation Manual:Technical and Operational'How-To';Practical Considerations[R].Geneva:World Health Organization,2014.

[9]高榮樑,陳晉.GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)技術(shù)在臨床耐藥結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2017,38(2):106-109.

[10]中國(guó)防癆協(xié)會(huì)基礎(chǔ)專(zhuān)業(yè)委員會(huì).結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程[M].北京:中國(guó)教育文化出版社,2006:54-62.

[11]Floyd K,Glaziou P,Houben R,et al.Global tuberculosis targets and milestones set for 2016-2035:definition and rationale[J].Int J Tuberc Lung Dis,2018,22(7):723-730.

[12]GBD Tuberculosis Collaborators.Global,regional,and national burden of tuberculosis,1990-2016:results from the Global Burden of Diseases,Injuries,and Risk Factors 2016 Study[J].Lancet Infect Dis,2018,18(12):1329-1349.

[13]Mokrousov I,Otten T,Vyshnevskiy B,et al.Allele-specific rpoB PCR assays for detection of rifampin-resistantMycobacterium tuberculosisin sputum smears[J].Antimicrob Agents Chemother,2003,47(7):2231-2235.

[14]Moualed D,Robinson M,Qureishi A,et al.Cervical tuberculous lymphadenitis:diagnosis and demographics,a five-year case series in the UK[J].Ann R Coll Surg Engl,2018,100(5):392-396.

[15]Denkinger CM,Schumacher SG,Boehme CC,et al.Xpert MTB/RIF assay for the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis:a systematic review and meta-analysis[J].Eur Respir J,2014,44(2):435-446.

[16]Penz E,Boffa J,Roberts DJ,et al.Diagnostic accuracy of the Xpert?MTB/RIF assay for extra-pulmonary tuberculosis:a meta-analysis[J].Int J Tuberc Lung Dis,2015,19(3):278-284.

[17]徐美麗.細(xì)針穿刺洗脫液Gene Xpert MTB/RIF檢測(cè)技術(shù)對(duì)淋巴結(jié)結(jié)核診斷價(jià)值研究[D].石家莊:河北醫(yī)科大學(xué),2016.

[18]Tadesse M,Abebe G,Abdissa K,et al.GeneXpert MTB/RIF assay for the diagnosis of tuberculous lymphadenitis on concentrated fine needle aspirates in high tuberculosis burden settings[J].PLoS One,2015,10(9):e0137471.

[19]Detjen AK,DiNardo AR,Leyden J,et al.Xpert MTB/RIF assay for the diagnosis of pulmonary tuberculosis in children:a systematic review and meta-analysis[J].Lancet Respir Med,2015,3(6):451-461.

[20]Asimacopoulos EP,Berry M,Garfield B,et al.The diagnostic efficacy of fine-needle aspiration using cytology and culture in tuberculous lymphadenitis[J].Int J Tuberc Lung Dis,2010,14(1):93-98.

[21]Buchko GW,Echols N,Flynn EM,et al.Structural and biophysical characterization of theMycobacterium tuberculosisprotein Rv0577,a protein associated with neutral red staining of virulent tuberculosis strains and homologue of the streptomyces coelicolor protein KbpA[J].Biochemistry,2017,56(30):4015-4027.

[22]李自慧,呂翎娜,杜博平,等.結(jié)核分枝桿菌IS6110和IS1081微滴數(shù)字PCR檢測(cè)體系的建立和應(yīng)用[J].北京醫(yī)學(xué),2018,40(04):314-317.

[23]Lee J,Choi SM,Lee CH,et al.The additional role of Xpert MTB/RIF in the diagnosis of intrathoracic tuberculous lymphadenitis[J].J Infect Chemother,2017,23(6):381-384.

[24]Li HH,He ZJ,Liang JQ,et al.Evaluation of Xpert MTB/RIF for the diagnosis of lymphatic tuberculosis[J].Biomed Res Int,2020,2020:1968487.

[25]Singh S,Singh A,Prajapati S,et al.Xpert MTB/RIF assay can be used on archived gastric aspirate and induced sputum samples for sensitive diagnosis of paediatric tuberculosis[J].BMC Microbiol,2015,15:191.

[26]Moussa H,Bayoumi FS,Ali AM.Evaluation of GeneXpert MTB/RIF assay for direct diagnosis of pulmonary tuberculosis[J].Saudi Med J,2016,37(10):1076-1081.

[27]中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)臨床檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)委員會(huì).結(jié)核病病原學(xué)分子診斷專(zhuān)家共識(shí)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2018,41(9):688-695.