黃婷 王義剛 張燕燕 周青 徐書濤

2型糖尿病(T2DM)是糖尿病的最常見類型，由胰島素分泌不足或抵抗引起，可引起多種代謝紊亂，為心腦血管疾病的重要危險因素[1]。動脈粥樣硬化性血管病是指以動脈粥樣硬化(AS)為基礎(chǔ)而發(fā)生的血管疾病，頸動脈因位置表淺，更易于檢測，因此頸動脈粥樣硬化(CAS)成為評價全身AS的指標(biāo)，炎癥反應(yīng)和血管內(nèi)皮損傷在AS的發(fā)生及發(fā)展中扮演重要角色[2-3]。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)是一種炎癥酶，能通過水解氧化低密度脂蛋白的氧化磷脂生成溶血磷脂酰膽堿和氧化型游離脂肪酸，損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)并促進(jìn)其凋亡[4]。CD147是一種高度糖基化跨膜糖蛋白，可介導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤，損傷VEC，促進(jìn)AS形成[5]。目前鮮有研究報道血清Lp-PLA2、CD147水平與T2DM患者CAS發(fā)生的關(guān)系，基于此本研究分析如下，以期為臨床防治T2DM患者動脈粥樣硬化性血管病提供參考。

對象與方法

1.對象：選取2019年1月～2020年10月我院收治的143例T2DM患者(T2DM組)，其中男83例，女60例，年齡46～75歲，平均年齡(59.27±5.18)歲，BMI 18～26 kg/m2，中位BMI 22 kg/m2，糖尿病病程1～15年，平均病程(7.82±2.54)年。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡≥18歲;(2)符合《中國2型糖尿病防治指南(2017年版)》[6]中對T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)血液系統(tǒng)疾??；(2)近3個月內(nèi)有感染;(3)免疫系統(tǒng)疾病；(4)精神疾病。另選取同期于我院體檢的60例健康者為對照組，其中男35例，女25例，年齡46～71歲，平均年齡(59.32±5.36)歲，BMI 18～26 kg/m2，中位BMI 22.5 kg/m2。兩組受試者性別、年齡、BMI比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)我院倫理委員會審批，所有受試者均知情同意。

2.方法

(1)一般資料、臨床資料及實驗室檢查結(jié)果收集：收集所有受試者的一般資料,收集T2DM患者的臨床資料[糖尿病病程、吸煙史(≥1支/天，持續(xù)時間≥6個月)、飲酒史(≥1兩/天，持續(xù)時間≥6個月)、收縮壓、舒張壓]及實驗室檢查結(jié)果[總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)]。采用貝克曼Cobas c311全自動生化分析儀測定TC、TG、HDL-C、LDL-C、FPG水平，采用酶聯(lián)吸附試驗測定HbA1c(南京賽泓瑞生物科技有限公司；貨號：CEA190Hu03；規(guī)格：48T)水平。

(2)頸動脈超聲檢查：T2DM患者入院后24 h內(nèi)接受頸動脈超聲檢查。選擇飛利浦HD-9彩色超聲診斷儀，探頭頻率7.5 MHz，患者去枕平臥，將頭部偏向一側(cè)，使頸部充分暴露，從頸動脈起始部逐節(jié)段探測雙側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈、頸動脈分叉，測量頸動脈內(nèi)膜中層厚度(CIMT)，參照《中國頭頸部動脈粥樣硬化診治共識》[7]中定義CIMT≥0.9 mm表示存在CAS。根據(jù)CIMT將T2DM患者分為CAS組(42例)和無CAS組(101例)。

(3)血清Lp-PLA2、CD147水平測定：采集患者入院后24 h內(nèi)和對照組受試者入院后空腹靜脈血5 ml，以3 000 r/min離心15 min(半徑8 cm)，取上清液，采用酶聯(lián)吸附試驗測定血清Lp-PLA2及CD147水平。

結(jié) 果

1.兩組受試者血清Lp-PLA2、CD147水平比較：T2DM組患者血清Lp-PLA2、CD147水平明顯高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組受試者血清Lp-PLA2、CD147水平比較M(P25,，P75)]

2.CAS組與無CAS組患者一般資料、臨床資料、實驗室檢查結(jié)果及血清Lp-PLA2、CD147水平比較：CAS組患者年齡、糖尿病病程、血清FPG、HbA1c、LDL-C、hs-CRP、Lp-PLA2、CD147水平均高于無CAS組，而HDL-C水平低于無CAS組(P<0.05)。其他指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 CAS組與無CAS組患者一般資料、臨床資料、實驗室檢查結(jié)果及血清Lp-PLA2、CD147水平比較

3.T2DM患者發(fā)生CAS的影響因素：以糖尿病病程≥10年、年齡≥60歲、FPG、HbA1c、HDL-C、LDL-C、Lp-PLA2、CD147為因變量，是否發(fā)生CAS為自變量，采用多因素logistic回歸分析結(jié)果顯示，糖尿病病程≥10年、HbA1c、LDL-C、Lp-PLA2、CD147為T2DM患者發(fā)生CAS的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 T2DM患者發(fā)生CAS影響因素的多因素logistics回歸分析

4.血清Lp-PLA2、CD147水平對T2DM患者發(fā)生CAS的預(yù)測價值：Lp-PLA2聯(lián)合CD147預(yù)測T2DM患者發(fā)生CAS的AUC明顯大于Lp-PLA2(Z=2.037，P=0.042)、CD147(Z=2.590，P=0.010)單一預(yù)測。見表4。

表4 血清Lp-PLA2、CD147水平對T2DM患者發(fā)生CAS的預(yù)測價值

討 論

隨著近年來居民生活水平的提高，糖尿病已成為繼心血管疾病、惡性腫瘤之后第三大威脅人類健康的慢性非傳染性疾病，其危害主要來自于其并發(fā)癥，長期高血糖可引起全身各組織器官病變，與正常人群相比，T2DM患者AS出現(xiàn)更早、進(jìn)展更快、范圍更大，易累及遠(yuǎn)端血管，罹患動脈粥樣硬化性血管病風(fēng)險顯著提升[8]，因此需早期評估，以指導(dǎo)臨床防治。血清指標(biāo)可在CAS形成前發(fā)現(xiàn)相關(guān)信息，且取樣方便，便于大范圍開展，有助于識別高危群體，預(yù)防動脈粥樣硬化性血管病發(fā)生。

PLA2為組織生物膜上的超家族酶系，具有維持細(xì)胞膜組織結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能的作用，生理狀態(tài)下低濃度產(chǎn)物可發(fā)揮正常功能，病理狀態(tài)下過度累及則會引起病理性過程[9]。Lp-PLA2為PLA2家族一員，其表達(dá)受炎癥因子調(diào)節(jié)，且AS壞死中心和巨噬細(xì)胞內(nèi)Lp-PLA2呈高表達(dá)，提示Lp-PLA2參與了AS形成和斑塊破裂階段[10-11]。近年相關(guān)研究結(jié)果顯示，Lp-PLA2可融合LDL，分解LDL上氧化卵磷脂，產(chǎn)生強(qiáng)烈炎癥因子溶血卵磷脂和氧化型游離脂肪酸，損傷VEC，引起泡沫細(xì)胞堆積，形成動脈粥樣硬化性斑塊，隨著斑塊體積增加，Lp-PLA2又可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞聚集發(fā)揮吞噬作用，增加核心區(qū)域易損性[12]。本研究結(jié)果顯示，T2DM患者血清Lp-PLA2水平明顯升高，可能與T2DM患者血糖過高可損傷血管壁引起炎癥反應(yīng)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞、肝細(xì)胞、肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞釋放Lp-PLA2有關(guān)。進(jìn)一步分析結(jié)果顯示，高血清Lp-PLA2水平為發(fā)生CAS的獨立危險因素，分析原因可能與Lp-PLA2結(jié)合血液中LDL沉積動脈管壁，釋放氧化非酯化脂肪酸和溶血卵磷脂，損傷血管和促進(jìn)泡沫細(xì)胞堆積有關(guān)[13-14]。

CD147又稱為細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶，廣泛表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞表面，其轉(zhuǎn)錄后修飾主要由N端糖基化決定，CD147可通過與其他同型CD147相互作用誘導(dǎo)多種基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解，在多種疾病發(fā)生和發(fā)展中扮演重要角色[13]。在急性心肌梗死等多種急性血管事件中，患者血液中單核細(xì)胞、血小板CD147水平明顯提升，可激活血小板和淋巴細(xì)胞，增強(qiáng)核因子-κB介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)[15]。Yang等[14]使用氧化型LDL刺激細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)CD147水平顯著提升，與組織炎癥反應(yīng)發(fā)生和AS形成密切相關(guān)。動物模型實驗結(jié)果也證實，CD147小干擾RNA、拮抗肽段、阻斷抗體可減少組織炎癥反應(yīng)，降低心腦血管事件發(fā)生率[16]。本研究結(jié)果顯示，T2DM患者血清CD147水平明顯升高，其原因可能是CD147轉(zhuǎn)錄后修飾主要由N端糖基化決定，T2DM患者糖基化終末產(chǎn)物較多，高度糖基化增加CD147分子量，引起血液中CD147表達(dá)明顯上調(diào)。本研究結(jié)果還顯示，血清CD147水平升高為發(fā)生CAS的獨立危險因素，分析其原因可能是CD147誘導(dǎo)增強(qiáng)核因子-κB介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)血管內(nèi)皮炎癥細(xì)胞浸潤，損傷血管內(nèi)皮功能，同時CD147還可促進(jìn)MMPs表達(dá)，影響血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷移，導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙，共同促進(jìn)AS形成[17]。本研究結(jié)果也顯示，血清Lp-PLA2、CD147水平均對T2DM患者CAS發(fā)生具有一定預(yù)測價值，兩項聯(lián)合可提升預(yù)測效能，說明聯(lián)合檢測血清Lp-PLA2、CD147水平能更好地指導(dǎo)臨床防治CAS。本研究logistic回歸分析結(jié)果顯示，糖尿病病程≥10年、HbA1c、LDL-C為T2DM患者CAS發(fā)生獨立危險因素，分析原因可能為糖尿病病程越長和HbA1c越高，反映患者血糖水平控制不佳，血管損傷更嚴(yán)重，因此CAS發(fā)生風(fēng)險增加。LDL-C是組成AS斑塊的核心成分，其水平越高更易促進(jìn)CAS發(fā)生發(fā)展。

綜上所述，T2DM患者血清Lp-PLA2、CD147水平均明顯升高，二者均為CAS發(fā)生獨立影響因素，聯(lián)合檢測血清Lp-PLA2、CD147水平可提升對T2DM患者發(fā)生CAS的預(yù)測價值。