高 宇，楊金明，畢保良，嚴(yán) 暉

(云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南省教育廳高原漁業(yè)資源保護(hù)與可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650201)

本文通過(guò)研究聚維酮碘、苯扎溴銨、硫酸銅和高錳酸鉀4 種常見(jiàn)藥物對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的急性毒性，探究昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)對(duì)不同藥物的敏感性，為其養(yǎng)殖過(guò)程中的科學(xué)用藥提供理論依據(jù)。

一 材料與方法

1.實(shí)驗(yàn)材料

昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)為人工繁殖的魚(yú)苗，體長(zhǎng)(15.0±1.0)毫米，體重(18.4±1.5)毫克；身體健康，游泳活潑，無(wú)傷無(wú)畸形。

聚維酮碘(水產(chǎn)用，碘含量為10%)購(gòu)買(mǎi)自山西康派偉業(yè)生物科技有限公司；苯扎溴銨(水產(chǎn)用，含量為45%)購(gòu)買(mǎi)自常州市金太陽(yáng)動(dòng)物保健品有限公司；硫酸銅(化學(xué)純，含量不少于99%)購(gòu)買(mǎi)自北京化工廠；高錳酸鉀晶體(化學(xué)純，含量不少于99%)購(gòu)買(mǎi)自重慶川東化工(集團(tuán))有限公司。

2.馴養(yǎng)條件

實(shí)驗(yàn)用水為自來(lái)水，經(jīng)曝氣3天后使用，水溫(18±1.5)℃，pH 8.0±0.5，溶氧(7.5±0.5)毫克/升。暴露實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，先在3 升的長(zhǎng)方體聚乙烯盒中加入1升曝氣水，每盒放入昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)10尾，馴養(yǎng)72小時(shí)，馴養(yǎng)期間不充氧、不喂食。

3.暴露實(shí)驗(yàn)

采用靜水暴露實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，預(yù)實(shí)驗(yàn)將藥物濃度限定在一個(gè)較大的范圍內(nèi)，每個(gè)濃度設(shè)置兩個(gè)平行，每個(gè)平行隨機(jī)放入10 尾稚魚(yú)。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，分別設(shè)置聚維酮碘暴露濃度為0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 毫克/升，苯扎溴銨暴露濃度為 0、0.35、0.45、0.55、0.65、0.75 毫克/升，硫酸銅暴露濃度為0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 毫克/升，高錳酸鉀暴露濃度為0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 毫克/升，每隔 24 小時(shí)更換1次藥液，實(shí)驗(yàn)期間不充氧、不喂食。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后8小時(shí)內(nèi)連續(xù)觀察各實(shí)驗(yàn)組稚魚(yú)的活動(dòng)狀況、中毒情況和死亡情況等，記錄各藥物濃度組24、48、72、96 小時(shí)的死亡情況，將死亡稚魚(yú)及時(shí)撈出。判定死亡的標(biāo)準(zhǔn)為先用玻璃棒輕輕攪動(dòng)周邊的水體，稚魚(yú)無(wú)反應(yīng)，再輕觸其尾部無(wú)反應(yīng)，最后將其撈出觀察鰓蓋無(wú)振動(dòng)、口張開(kāi)，則判定已死亡。

4.數(shù)據(jù)分析

采用寇氏法(Karber method)進(jìn)行半致死濃度(LC50)的計(jì)算，其中

式中：d為相鄰兩組劑量對(duì)數(shù)之差，Xm為最大劑量對(duì)數(shù)，P 為死亡率(用小數(shù)表示)，Sx50為標(biāo)準(zhǔn)誤，n為實(shí)驗(yàn)魚(yú)數(shù)量。

安全濃度(SC)：SC＝LC50(96小時(shí))×0.1

根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則》(GB/T 31270－2014)中規(guī)定的有毒物質(zhì)對(duì)魚(yú)類(lèi)毒性等級(jí)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，按96小時(shí)半致死質(zhì)量濃度劃分為4個(gè)等級(jí)(表1)，用此標(biāo)準(zhǔn)評(píng)判實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性等級(jí)。

表1 魚(yú)類(lèi)毒性等級(jí)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

二、結(jié)果

4 種藥物對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2～表5。

表2 聚維酮碘對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3 苯扎溴銨對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性實(shí)驗(yàn)

表4 硫酸銅對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性實(shí)驗(yàn)

表5 高錳酸鉀對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，聚維酮碘、苯扎溴銨、硫酸銅和高錳酸鉀對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的96小時(shí)半致死濃度分 別 為 1.39、 0.49、1.68、1.63 毫克/升，安全濃度分別為0.14、0.05、0.17、0.16 毫克/升，4 種藥物對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性大小依次為苯扎溴銨＞聚維酮碘＞高錳酸鉀＞硫酸銅。根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，苯扎溴銨對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性為高毒，聚維酮碘、硫酸銅以及高錳酸鉀3 種藥物對(duì)昆明裂腹魚(yú)的毒性為中毒。

三、結(jié)論

通常用半致死濃度和安全濃度來(lái)衡量藥物的毒性強(qiáng)弱，以96小時(shí)半致死濃度作為急性毒性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。聚維酮碘可以在昆明裂腹魚(yú)苗種培育階段病害防治中使用，其安全濃度在常用劑量范圍，相對(duì)比較安全。硫酸銅和高錳酸鉀安全濃度低于藥物推薦使用濃度，應(yīng)盡量減少使用。苯扎溴銨屬于高毒，使用劑量不當(dāng)會(huì)造成苗種的大量死亡，因此不推薦使用苯扎溴銨作為昆明裂腹魚(yú)病害防治的藥物。