大菱鲆功能性飼料添加劑研究進(jìn)展

■劉 敏 張海濤* 王卓鐸 孫廣文

（1.廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南水產(chǎn)與畜禽飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 湛江 524000；2.湛江恒興動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研發(fā)有限公司，廣東 湛江 524399）

魚(yú)粉魚(yú)油類飼料原料的短缺，使得越來(lái)越多的其他動(dòng)植物原料被用于魚(yú)粉魚(yú)油的替代，而低魚(yú)粉魚(yú)油飼料往往造成魚(yú)類生長(zhǎng)性能降低、腸道健康受損等一系列問(wèn)題。其主要原因是，與魚(yú)粉魚(yú)油相比，替代原料缺乏多種功能性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，存在氨基酸不平衡、含有難消化的碳水化合物及抗?fàn)I養(yǎng)因子等。此外，水產(chǎn)養(yǎng)殖中抗生素的使用導(dǎo)致了諸多問(wèn)題的產(chǎn)生。在國(guó)家重視減抗限抗替抗的大環(huán)境下，研究可替代抗生素、改善飼料營(yíng)養(yǎng)、提高消化性能、增強(qiáng)機(jī)體抗應(yīng)激與免疫性能等的功能性飼料添加劑尤為重要。

大菱鲆（Scophthalmus maximus）俗稱“多寶魚(yú)”，是我國(guó)北方重要的經(jīng)濟(jì)海水魚(yú)類，在我國(guó)有近30年的養(yǎng)殖歷史，其魚(yú)體蛋白含量高，味道鮮美。提高大菱鲆養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益是維持其養(yǎng)殖業(yè)繁榮發(fā)展的必要因素，要實(shí)現(xiàn)這一目的，除了要降低大菱鲆飼料成本，提高其養(yǎng)殖成活率外，選擇合適的功能性飼料添加劑也至關(guān)重要。文章綜述了國(guó)內(nèi)外關(guān)于各種類型飼料添加劑對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)性能、形體指標(biāo)、體成分、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率、抗氧化性能、免疫性能等的影響的研究進(jìn)展，以期為大菱鲆功能性配合飼料的研發(fā)利用提供更多基礎(chǔ)資料。

1 氨基酸、氨基酸類似物和肽類

研究表明，一些功能性氨基酸對(duì)動(dòng)物的關(guān)鍵代謝路徑有調(diào)節(jié)作用，可起到維持動(dòng)物生長(zhǎng)、繁殖、改善免疫反應(yīng)等的重要作用。功能性氨基酸、氨基酸類似物和肽類添加到飼料中，可以改善魚(yú)粉替代對(duì)動(dòng)物引起的不利影響，進(jìn)而促進(jìn)攝食和生長(zhǎng)等。

?；撬嵩诤Ｑ蠹皠?dòng)物飼料原料中含量豐富，在植物蛋白源中缺乏。研究表明，大菱鲆基礎(chǔ)日糧或高植物蛋白日糧中添加0.5%～1.5%的?；撬峥娠@著地促進(jìn)攝食，提高生長(zhǎng)性能，改善肝腸健康，調(diào)節(jié)血脂血糖代謝。此外，高植物蛋白飼料中，3%的絲氨酸和0.05%的半胱胺鹽酸鹽分別對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)、攝食率（DFI）有顯著促進(jìn)作用；0.3%的半胱氨酸可提高大菱鲆肝臟中牛磺酸的水平；低植物蛋白日糧中添加0.6%的羥脯氨酸可顯著提高大菱鲆幼魚(yú)的特定生長(zhǎng)率（SGR）、飼料效率（FE）以及DFI，而高植物蛋白日糧中添加0～1.5%的羥脯氨酸和0.75%脯氨酸對(duì)大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響，但能提高其肌肉中總膠原蛋白的含量以及肌肉硬度、彈性和咀嚼度；豆粕型日糧中添加1.5%～2.0%的谷氨酰胺可顯著增強(qiáng)腸道屏障功能，改善生長(zhǎng)性能、免疫性能以及腸道菌群，從而減輕豆粕型腸炎。綜合促生長(zhǎng)效果與養(yǎng)殖成本考慮，推薦大菱鲆幼魚(yú)飼料中N-氨甲酰谷氨酸添加量為0.020 0%～0.022 7%。另外植物蛋白型日糧中添加氨基酸復(fù)合誘食劑可促進(jìn)大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)。

L-肉堿是一種氨基酸及維生素類似物，在脂肪酸β-氧化和調(diào)節(jié)?；胶膺^(guò)程中發(fā)揮著重要作用。添加不同梯度（0～0.2%）的L-肉堿對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)性能、形體指標(biāo)、體組成及肝臟脂肪酸含量均未造成顯著影響。綜合生長(zhǎng)性能及經(jīng)濟(jì)效益考慮，建議在以魚(yú)粉為主要蛋白源的大菱鲆飼料中無(wú)需添加L-肉堿。肌肽是一種由β-丙氨酸和L-組氨酸兩種氨基酸組成的二肽，具有很強(qiáng)的抗氧化能力。飼料中添加0.39%的肌肽能夠提高大菱鲆DFI，提高促生長(zhǎng)因子基因的表達(dá)量。飼料中添加0～2.0%的L-肌肽對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)性能、形體指標(biāo)、體成分影響均不顯著，但顯著影響了免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)，分別以免疫球蛋白M（IgM）和總抗氧化能力（T-AOC）為評(píng)價(jià)指標(biāo)作回歸曲線，得出大菱鲆幼魚(yú)L-肌肽的最適添加量為116.75 mg/kg和95.50 mg/kg。此外，綜合考慮大菱鲆幼魚(yú)[（14.00～39.43）g]的生長(zhǎng)性能、抗氧化性能、非特異性免疫及血清生化指標(biāo)得出，添加75 mg/kg 維生素E 時(shí)，L-肌肽的適宜添加量為50 mg/kg。谷胱甘肽是一種由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸通過(guò)肽鍵形成的活性肽。研究表明，大菱鲆飼料中添加0.02%的谷胱甘肽顯著提高了SGR、全魚(yú)粗蛋白含量。據(jù)回歸分析，確定大菱鲆飼料中還原型谷胱甘肽的最適添加量為189.70 mg/kg（見(jiàn)表1）。

表1 大菱鲆飼料中氨基酸、氨基酸類似物和肽類的適宜添加量

2 糖類

功能性寡糖（也稱低聚糖）和多糖性質(zhì)穩(wěn)定、無(wú)殘留、安全無(wú)毒，常有提高機(jī)體消化性能、免疫性能以及調(diào)節(jié)腸道菌群等作用，是飼料添加劑的研究熱點(diǎn)。

研究表明，飼料中添加0.5%的殼寡糖（COS）顯著提高了大菱鲆幼魚(yú)的堿性磷酸酶（ALP）活性、酸性磷酸酶（ACP）活性、抗菌性能以及顯著降低了血清中三酰甘油（TG）、總膽固醇（T-CHO）水平；另有研究則認(rèn)為大菱鲆基礎(chǔ)飼料中COS 的適宜添加量為0.05%。此外，飼料中添加0.03%的殼寡糖稀土配合物（COSRee）可顯著促進(jìn)大菱鲆的生長(zhǎng)發(fā)育，顯著提高吞噬指數(shù)、血清SOD 活性以及病菌抵抗力；0.025%和0.05%的COS-Ree 可以有效地抑制重金屬鎘在大菱鲆體內(nèi)的富集積累，提高其存活率（SR）。

飼料中添加0.2%～0.5%的果寡糖（FOS）和0.1%～0.2%的甘露寡糖（MOS）可提高大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成和脂類代謝。豆粕型日糧中添加0.2%的MOS顯著改善了大菱鲆的生長(zhǎng)性能和形體指標(biāo)，MOS可緩解大菱鲆豆粕型腸炎?；谠鲋芈剩╓GR）、FE、魚(yú)體成分、魚(yú)肉品質(zhì)考慮，建議飼料中牛蒡寡糖（BOS）最適添加量為2.0%；基于WGR、SGR、FE和免疫性能（ACP、AKP、SOD等）分析，則建議適宜添加量為4.0%。以非特異性免疫功能為考量指標(biāo)，建議大菱鲆日糧中褐藻酸寡糖（AOS）添加量為0.05%。

日糧中添加1.25%的水蘇糖可以有效地改善大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能、FE、腸道健康狀況以及消化酶活性。1.25%的木聚糖也可改善大菱鲆幼魚(yú)的腸道健康狀況、DFI、FE、生長(zhǎng)性能以及提高全魚(yú)粗蛋白和粗脂肪含量，5%的木聚糖則顯著降低了上述指標(biāo)，并導(dǎo)致大菱鲆遠(yuǎn)端腸完整性受損，腸上皮長(zhǎng)度明顯縮短，腸道消化性能降低。飼料中單獨(dú)或組合添加β-葡聚糖（0.13%）、低聚木糖（0.04%）和膽汁酸（0.08%）對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)消化的影響的研究表明，三種添加劑組合添加、單獨(dú)添加β-葡聚糖或低聚木糖均顯著提高了WGR，顯著降低了FCR，以組合添加的促生長(zhǎng)作用最明顯。此外，飼料中添加1.0%的低聚木糖能顯著提高大菱鲆的生長(zhǎng)性能，顯著降低血清TG和T-CHO水平；飼料中同時(shí)添加0.5%的MOS、1.0%的低聚木糖對(duì)大菱鲆幼魚(yú)的促生長(zhǎng)作用最明顯。MOS、低聚木糖組合添加或單獨(dú)添加低聚木糖對(duì)大菱鲆幼魚(yú)體成分、血清溶菌酶（LZM）和ALP均無(wú)顯著影響。MOS、低聚木糖配合使用可增強(qiáng)大菱鲆非特異性免疫能力。飼料中添加0.1%的褐藻低聚糖可顯著提高大菱鲆血液中ACP、過(guò)氧化氫酶（CAT）、SOD活力以及頭腎淋巴細(xì)胞吞噬率。飼料中0.5%的溶藻弧菌脂多糖可使大菱鲆獲得一定的免疫保護(hù)力。飼料中添加0.2%～0.3%的酵母β-1,3-葡聚糖可提高大菱鲆血清和魚(yú)卵中的LZM活性以及胚胎抗菌性能，因此酵母葡聚糖可以安全地用于促進(jìn)大菱鲆后代的非特異性跨代免疫。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加短鏈低聚果糖（scFOS）對(duì)大菱鲆[（31.6±0.02）g]生長(zhǎng)性能、先天免疫、血液學(xué)指標(biāo)、消化酶、腸道細(xì)菌豐富度或多樣性無(wú)明顯有利影響。魚(yú)粉型日糧中添加6.0 g/kg 的酵母β-葡聚糖和MOS 或5.0 g/kg 的提取自褐藻的海藻酸對(duì)兩種體型[（48.80±5.20）、（95.80±17.70）g]大菱鲆的WGR、SGR、DFI、FCR 和肝體比（HSI）以及體成分沒(méi)有顯著性影響（見(jiàn)表2）。

表2 大菱鲆飼料中糖類的適宜添加量

3 益生菌

飼料中添加益生菌?？善鸬秸{(diào)節(jié)水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)微生態(tài)平衡、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、提高免疫力及抗病力的重要作用。

研究表明，飼料中添加107CFU/g 和109CFU/g 的植物乳酸菌能改善大菱鲆幼魚(yú)的免疫力，降低AST和ALT 活性，保護(hù)肝臟，提高大菱鲆對(duì)豆粕蛋白的耐受力。在大菱鲆養(yǎng)殖早期（0～40 d），飼料中添加0.5%的枯草芽孢桿菌飼料制劑（活菌數(shù)2.0×109CFU/g）能顯著降低FCR，提高WGR和PER；0.5%、1.0%、1.5%的添加量能顯著降低養(yǎng)殖水體中的氨氮濃度。

高鳳祥等（2011）和潘雷等（2012）在基礎(chǔ)飼料中分別添加枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、復(fù)合芽孢桿菌組（1：1）、嗜酸乳酸桿菌、雙歧桿菌、復(fù)合乳酸菌（1：1）、復(fù)合益生菌（1：1：1：1），含菌量約3.0×109個(gè)/g干質(zhì)量，共配制7種實(shí)驗(yàn)飼料，分別研究了益生菌對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)、消化道酶活性以及腸道菌群、部分血液免疫指標(biāo)的影響。結(jié)果表明，飼料中添加復(fù)合益生菌顯著提高了SR、SGR以及消化道酶活性，而單一益生菌飼喂組與對(duì)照組差異不顯著。飼料中添加益生菌顯著提高了大菱鲆酚氧化酶（PO）活性、LZM活性和T-AOC，顯著降低了腸道弧菌總數(shù)。大菱鲆飼料中添加0.5%嗜酸乳桿菌顯著提高了PER，顯著降低了FCR，但隨著添加時(shí)間的延長(zhǎng)，該作用逐漸減弱，并最終低于對(duì)照組。魚(yú)粉型日糧中添加0.6 g/kg枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌對(duì)大菱鲆[（48.80±5.20）、（95.80±17.70）g]的WGR、SGR、DFI、FCR和HSI沒(méi)有顯著性影響。此外，飼料中添加1%和5%復(fù)合益生菌（醋桿菌屬、乳桿菌屬、假單胞菌屬，活菌總數(shù)為5×109CFU/mL）顯著提高了WGR、SGR、FCR以及ACP、ALP、SOD和CAT的活性，顯著提高了大菱鲆腸道消化酶的活性，改善了腸道菌群以及腸道組織結(jié)構(gòu)，且5%添加組的效果顯著優(yōu)于1%添加組（見(jiàn)表3）。

表3 大菱鲆飼料中益生菌的適宜添加量

4 中草藥制劑

中草藥制劑是天然綠色的飼料添加劑，含有豐富的生物活性物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成分，具有提高動(dòng)物消化性能、生長(zhǎng)性能以及非特異性免疫功能的效用。

日糧中添加5.0～20.0 g/kg 的杜仲葉粉不會(huì)影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用，但顯著降低了MDA、DFI、SGR，且20.0 g/kg的添加量顯著提高了LZM、SOD、CAT活性以及T-AOC。0.2%的梔子、0.5%的苦參、0.5%的黃芩、0.2%的山萘以及0.2%的梔子與苦參的混合物明顯提高了飼料的誘食性。飼料中添加0～0.4%的絲蘭提取物對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)性能、形體指標(biāo)、體成分均無(wú)顯著影響，但對(duì)血清生化指標(biāo)及養(yǎng)殖水質(zhì)指標(biāo)均有不同程度影響，以非特異性免疫及水體氨氮含量為考量指標(biāo)，大菱鲆幼魚(yú)飼料中絲蘭提取物的適宜添加量為0.2%。在大菱鲆皮疣病療效方面，飼料中添加1%烏梢蛇含量的藥餌在45 d內(nèi)療效明顯，治愈率可達(dá)到90%。添加1%的復(fù)方中草藥（黃連、黃芩、黃柏、梔子）合劑對(duì)皮疣病療效不明顯，但對(duì)腸炎病有一定療效。

大菱鲆飼料中添加2%的復(fù)方中草藥（甘草+當(dāng)歸+茯苓+白芍+白術(shù)+柴胡或炒枳實(shí)+白術(shù)）顯著影響了WGR、FCR 等指標(biāo)；2%的復(fù)方中草藥（炒白術(shù)+炒白芍+陳皮+防風(fēng)+黃芪）顯著降低了大菱鲆血漿中TG和T-CHO 含量；2%的復(fù)方中草藥（金銀花+杏仁+五味子+山楂）顯著提高了大菱鲆血清中CAT活力。此外，飼料中添加0.5%的復(fù)方中草藥（由藿香、蘇葉、川樸等成分組成）20 d 內(nèi)顯著改善了大菱鲆的生長(zhǎng)性能，但20～60 d 內(nèi)其促生長(zhǎng)效果逐漸減弱并最終低于對(duì)照組。中草藥復(fù)方粉劑（黃柏、金銀花、敗醬草、五倍子、白頭翁、石榴皮、白花蛇舌草、半枝蓮、馬齒莧、紅藤、黃連）拌飼投喂患腸炎的大菱鲆，顯著降低了死亡率，并對(duì)腸炎治療效果良好。另外，4%的復(fù)方中草藥（牛膝、板藍(lán)根、甘草、陳皮、肉桂、麥芽、神曲）顯著提高了大菱鲆的免疫性能以及抗菌力。大菱鲆飼料中添加0.1%、0.2%的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑（由β-葡聚糖、大黃、黃芩、黃柏、穿心蓮、維生素C磷酸酯和維生素B等混合配制而成）皆顯著提高了LZM活性、ALP和總SOD活性（見(jiàn)表4）。

表4 大菱鲆飼料中中草藥制劑的適宜添加量

5 酶制劑

水產(chǎn)飼料中添加酶制劑的目的有兩點(diǎn)：一是補(bǔ)足機(jī)體內(nèi)源酶分泌量的不足，提高幼魚(yú)的消化機(jī)能；二是添加動(dòng)物消化道不能分泌的酶，以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。

研究表明，以玉米干酒精糟及其可溶物（DDGS）替代不同水平魚(yú)粉的飼料中，添加非淀粉多糖酶（木聚糖酶和纖維素酶）對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、形體指標(biāo)以及體成分均沒(méi)有顯著性影響，但顯著提高了大菱鲆的免疫性能、抗氧化能力和部分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率（ADC）。飼料中添加海洋脂肪酶顯著提高了大菱鲆的WGR和SGR，顯著降低了FCR，且隨著濃度增大，提升效果更佳。飼料中分別添加不同水平（0.1、0.2、0.4 g/kg）的植酸酶、非淀粉多糖酶（0.1 g/kg）以及二者的組合酶對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、消化率、消化酶活性、能量收支、氮磷收支及氮磷排泄的影響的研究表明，以0.2 g/kg 的植酸酶單獨(dú)添加、0.2 g/kg 的植酸酶和0.1 g/kg 非淀粉多糖酶組合添加的綜合效果最佳。大菱鲆幼魚(yú)飼料中組合添加中性蛋白酶（1×105U/g）和木瓜蛋白酶（4×105U/g）可提高玉米蛋白粉中干物質(zhì)、粗蛋白、氨基酸和總能的ADC。日糧中添加黑曲霉固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物和非淀粉多糖降解酶復(fù)合物不會(huì)影響大菱鲆腸道pH，但會(huì)增加后腸中脂肪酶和蛋白酶的活性、腸道微生物群的豐富性和多樣性以及干物質(zhì)的ADC（見(jiàn)表5）。

表5 大菱鲆飼料中酶制劑的適宜添加量

6 核苷酸

研究表明，飼料中核苷酸缺乏會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物肝臟、心臟、腸道和免疫系統(tǒng)的功能受損傷；核苷酸具有調(diào)節(jié)免疫、改善腸道健康、參與脂肪代謝等多種生物學(xué)功能。

日糧中添加0～0.3%的核苷酸可顯著提高大菱鲆的生長(zhǎng)性能和FE，而核苷酸水平超過(guò)0.15%可能引起腸道氧化應(yīng)激和形態(tài)學(xué)損傷?；赟GR和T-AOC的折線回歸分析，大菱鲆幼魚(yú)日糧核苷酸的最佳添加量分別為0.366 g/kg 和0.188 g/kg。大豆蛋白水平為30%～50%時(shí)，日糧中添加0～0.1%的核苷酸有助于改善大菱鲆的非特異性免疫反應(yīng)和腸道結(jié)構(gòu)。此外，研究發(fā)現(xiàn)，隨著在飼料中核苷酸添加量由0 增加到0.50%，大菱鲆的SGR 逐漸減小，高含量核苷酸可能會(huì)抑制大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)，但提高了血清中LZM 的活性。飼料中添加0.03%核苷酸混合物能夠提高大菱鲆DFI 以及促生長(zhǎng)因子基因的表達(dá)量。但另兩項(xiàng)研究的結(jié)果則與之相反：飼料中添加1.0%的核苷酸復(fù)合誘食劑對(duì)（7.00±0.30）g 的大菱鲆、添加0.2%的酵母核苷酸復(fù)合物對(duì)（48.80±5.20）g 以及（95.80±17.70）g 的大菱鲆的DFI、FE 及生長(zhǎng)沒(méi)有顯著影響（見(jiàn)表6）。

表6 大菱鲆飼料中核苷酸的適宜添加量

7 膽汁酸

膽汁酸是膽固醇代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一系列固醇類物質(zhì)。膽汁酸能提高脂肪酶的活性，促進(jìn)脂類物質(zhì)的消化吸收；具有調(diào)節(jié)膽固醇動(dòng)態(tài)平衡、殺菌消炎、提高動(dòng)物免疫能力等作用。

高水平植物蛋白日糧中添加0.5%的?；悄懰犸@著提高了生長(zhǎng)性能、FE、HSI、脂質(zhì)消化率、胰脂肪酶活性、膽固醇、總膽汁酸水平以及全身脂質(zhì)含量，顯著緩解了遠(yuǎn)端腸道的腸炎。紅魚(yú)粉替代飼料中白魚(yú)粉會(huì)導(dǎo)致大菱鲆的SGR、肥滿度（CF）顯著降低，F(xiàn)CR 顯著升高；而在紅魚(yú)粉型飼料中添加0.015%的膽汁酸后，均顯著提高了SGR 和CF，顯著降低了血清TG 和T-CHO，血清AST 活性顯著升高；但添加0.03%膽汁酸則會(huì)降低血清AST 活性。日糧中添加0.06%～0.12%的膽汁酸顯著改善了大菱鲆生長(zhǎng)性能、FE、形體指標(biāo)、血清生化指標(biāo)以及魚(yú)肉品質(zhì)，保護(hù)了大菱鲆的肝臟功能。WGR 經(jīng)折線回歸分析得出，大菱鲆幼魚(yú)飼料中膽汁酸的適宜添加量為0.09%。畢錚錚等（2015）的研究得出了類似的結(jié)果：膽汁酸水平為0.09%、飼料脂肪水平為18%時(shí)，更能促進(jìn)大菱鲆生長(zhǎng)發(fā)育，但不會(huì)改變其肌肉脂肪酸組成。不同粗脂肪水平（10%～18%）的飼料中添加1.5%的膽汁酸能促進(jìn)大菱鲆的生長(zhǎng)，提高FE、脂肪代謝酶的活性、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率以及抗病性能；可增加組織中脂肪的蓄積，降低最適蛋能比。飼料中添加膽汁酸能夠提高大菱鲆幼魚(yú)對(duì)玉米蛋白粉中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、氨基酸、總能的ADC。飼料中添加0.08%的膽汁酸可提高蛋白質(zhì)消化率，但差異不明顯（見(jiàn)表7）。

表7 大菱鲆飼料中膽汁酸的適宜添加量

8 其他

有機(jī)酸或鹽，作為飼料中替代抗生素類的添加劑，受到了廣泛的關(guān)注。檸檬酸是一種重要的有機(jī)酸，添加在飼料中，一方面可調(diào)節(jié)pH，起防腐增產(chǎn)的作用；另一方面還是抗氧化劑的增效劑。研究表明，豆粕型日糧中添加1.5%和3.0%的檸檬酸顯著緩解了大菱鲆腸炎，顯著減輕了腸道氧化損傷及腸道微生態(tài)失衡。日糧中添加3.0%的檸檬酸顯著提高了胃蛋白酶的活性以及磷的生物利用度，但對(duì)生長(zhǎng)性能、飼料利用率以及體組成沒(méi)有顯著性影響。高植物蛋白質(zhì)飼料中添加0.15%或0.20%的丁酸鈉能緩解植物原料的不利影響，提高大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能；而過(guò)量添加丁酸鈉（0.3%～0.6%）則會(huì)降低大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能。此外，魚(yú)粉型日糧中添加0.3%的二甲酸鉀對(duì)大菱鲆[（48.80±5.20）g]的WGR、SGR、DFI、FCR 和HSI沒(méi)有顯著影響。

滸苔富含蛋白質(zhì)，氨基酸種類齊全，必需氨基酸含量高，是一種高蛋白、高膳食纖維、低脂肪且富含礦物質(zhì)和維生素的營(yíng)養(yǎng)海藻。研究表明，飼料中添加5%的滸苔粉顯著提高了大菱鲆的WGR、SGR 以及DFI，但對(duì)非特異性免疫力沒(méi)有顯著性影響；另一研究結(jié)果則與之相反：飼料中添加5%～15%的滸苔粉對(duì)大菱鲆WGR、SGR 和FE 沒(méi)有顯著影響，但提高了非特異性免疫力；滸苔添加量增加到20%時(shí)，大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)以及非特異性免疫力均受到抑制。

皂苷是一類主要由皂苷元和糖或其他有機(jī)酸組成的生物活性物質(zhì)，糖萜素和大豆皂甙都是常見(jiàn)的皂苷。綜合SGR、LZM 活性、T-SOD 和腸道生理指標(biāo)分析，推薦大菱鲆幼魚(yú)飼料中糖萜素的添加水平為50～75 mg/kg。且飼料中添加50～75 mg/kg 的糖萜素可提高背肌多不飽和脂肪酸含量、降低血脂、改善腸道生理環(huán)境。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外大量研究表明，大豆皂苷不僅毒副作用小，還具有許多有益的生理功能。飼料中添加0.3%的大豆皂甙對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)性能、腸道組織形態(tài)沒(méi)有顯著影響，但顯著抑制了大菱鲆胃蛋白酶及腸淀粉酶等消化酶的活性及腸道緊密連接蛋白的基因表達(dá)，且顯著改變了大菱鲆腸道菌群結(jié)構(gòu)。飼料中添加0.25%的大豆皂苷對(duì)DFI、FE、生長(zhǎng)性能以及膽固醇代謝無(wú)顯著影響，但0.50%的添加量顯著抑制了大菱鲆的生長(zhǎng)。

酚類化合物常被作為抗氧化劑應(yīng)用于飼料。茶多酚是茶葉中多羥基酚類化合物的復(fù)合物。飼料中添加0～0.05%的茶多酚能促進(jìn)大菱鲆的生長(zhǎng)、降低肝臟脂肪沉積和提高抗氧化能力。結(jié)合生長(zhǎng)、體成分、抗氧化酶活性及成本效果分析得出，大菱鲆日糧中茶多酚的適宜添加量為0.01%～0.02%。叔丁基氫醌又名叔丁基對(duì)苯二酚，是一種新型高效的抗氧化劑。飼料中叔丁基氫醌添加量高于0.045%時(shí)，大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、免疫性能、中腸腸道絨毛長(zhǎng)度與腸道直徑比顯著降低；添加量不高于0.015%時(shí)不會(huì)對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)及生理指標(biāo)造成顯著影響，但能提高抗氧化性能。

酵母類單細(xì)胞真核生物，富含蛋白質(zhì)、肝糖、不飽和脂肪酸以及蝦青素等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，常具有促生長(zhǎng)、抗氧化、增強(qiáng)免疫力等功效。紅魚(yú)粉型飼料中添加0.1%的海洋紅酵母即能顯著提高大菱鲆的DFI、PER和生長(zhǎng)性能，使得紅魚(yú)粉替代組的飼料性能達(dá)到白魚(yú)粉組的水平。然而，在以白魚(yú)粉為主的大菱鲆飼料中添加0～0.15%的海洋紅酵母對(duì)大菱鲆[（85.60±0.33）g]的DFI、WGR、SGR 和FCR 均沒(méi)有顯著影響。此外，飼料中不同水平（0、1%、2%、3%）的酵母水解物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)非特異性免疫、肝臟抗氧化功能及抗應(yīng)激能力的影響研究表明，大菱鲆日糧中酵母水解物的最佳水平為2%。

大豆異黃酮廣泛存在于豆科植物原料中，主要由大豆黃酮、染料木黃酮和大豆黃素組成，常作為促生長(zhǎng)和提高繁殖性能的添加劑應(yīng)用于飼料中。研究表明，5～100 mg/kg 的大豆黃酮對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)沒(méi)有顯著影響，但10～20 mg/kg 的大豆黃酮顯著提高了大菱鲆幼魚(yú)的消化酶活力和抗氧化能力，并促進(jìn)了腸道絨毛的發(fā)育。飼料中添加不同劑量（0、0.000 5%、0.001 0%、0.002 0%、0.010 0%）的染料木黃酮對(duì)大菱鲆[（4.63±0.01）g]的SR、WGR、SGR、FE、DFI 以及CF、VSI、HSI、灰分含量、腸蛋白酶和胃淀粉酶均未產(chǎn)生顯著影響，但顯著降低了魚(yú)體粗蛋白含量、粗脂肪含量以及胃蛋白酶、胰蛋白酶和腸淀粉酶的活性，并顯著提高了魚(yú)體水分含量；添加量達(dá)0.001%時(shí)會(huì)對(duì)魚(yú)的腸道組織結(jié)構(gòu)產(chǎn)生一定的破壞作用。染料木黃酮的抗?fàn)I養(yǎng)作用不容忽視。姜黃素是一種二酮類化合物，具有抗氧化、抗炎、抗細(xì)菌和抗癌癥等多種多樣的生物學(xué)活性。飼料中添加0～0.06%的姜黃素對(duì)大菱鲆幼魚(yú)的SR、生長(zhǎng)及形體指標(biāo)沒(méi)有顯著影響，但添加0.06%的姜黃素能顯著提高大菱鲆的血清抗氧化能力。

稀土具有促生長(zhǎng)的作用，已廣泛用于農(nóng)作物、畜禽和漁業(yè)養(yǎng)殖中。在基礎(chǔ)飼料中添加0.024%的稀土能夠顯著提高大菱鲆的生長(zhǎng)性能及非特異性免疫力（見(jiàn)表8）。

表8 大菱鲆飼料中不同添加劑的適宜添加量

9 功能性飼料添加劑的應(yīng)用局限和展望

近年來(lái)，在大菱鲆功能性飼料研發(fā)中，有關(guān)營(yíng)養(yǎng)性飼料添加劑的研究主要集中于氨基酸（牛磺酸、絲氨酸、脯氨酸等）、氨基酸類似物（L-肉堿等）和肽類（肌肽、谷胱甘肽）等，其主要目的是改善魚(yú)粉替代對(duì)大菱鲆引起的不利影響，進(jìn)而促進(jìn)攝食和生長(zhǎng)；有關(guān)大菱鲆非營(yíng)養(yǎng)性飼料添加劑的研究則主要集中于功能性糖類（殼寡糖、果寡糖、木聚糖等）、益生菌（乳酸菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌等）、中草藥制劑、酶制劑（植酸酶、非淀粉多糖酶、脂肪酶、蛋白酶等）、核苷酸、膽汁酸以及其他類型添加劑（檸檬酸、丁酸鈉、糖萜素等）等，其主要目的是改善大菱鲆生長(zhǎng)性能、消化性能以及免疫性能，調(diào)節(jié)代謝，減抗替抗。

由于大多功能性飼料添加劑的研發(fā)都是放置在特定實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行的，而當(dāng)應(yīng)用到養(yǎng)殖端則常常達(dá)不到相應(yīng)的效果。例如中草藥制劑應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中時(shí)效果還不夠理想，這主要可能是因?yàn)?，藥材的產(chǎn)地、中藥的配伍、用藥的時(shí)間、動(dòng)物生長(zhǎng)階段的不同均影響了中草藥的使用。而其他各類飼料添加劑應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中時(shí)也都有相應(yīng)的各種問(wèn)題。對(duì)各類飼料添加劑建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范，是使其更好地應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)的重要途徑。此外，要想功能性飼料添加劑發(fā)揮更佳的效用，養(yǎng)殖端的管理也需要做出相應(yīng)的改善。