李偉偉 邢浩春 武曉博 丁岐峰 藺相達(dá) 李志輝
(1邯鄲市林業(yè)局 河北 邯鄲 056000;2邯鄲學(xué)院 河北 邯鄲 056000)
透骨草(Phryma leptostachyaL.)為透骨草科透骨草屬多年生草本植物,擁有透骨草素及透骨草醇,全草能殺滅蔬菜菜青蟲(chóng)。美國(guó)白蛾(Hyphantria cuneaDrury)又名美國(guó)白燈蛾,屬于白蛾屬。透骨草提取物的研究為美國(guó)白蛾的防治提供了一種新型的無(wú)污染生物農(nóng)藥,可減少農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染,為美國(guó)白蛾防治及生物農(nóng)藥制劑的研發(fā)提供了參考依據(jù)。
1.1.1 供試原藥及試劑。供試原藥:透骨草;試劑:無(wú)水乙醇、蒸餾水、甲醇、石油醚、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮。
1.1.2 試驗(yàn)儀器。MP120-2分析天平、HH6數(shù)顯恒溫水浴鍋、R2003KE旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、布氏漏斗、KQ-700E超聲波振蕩儀、GHG-9241電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、膠頭滴管、毛刷、濾紙。
1.1.3 供試蟲(chóng)源。邯鄲市磁縣采集美國(guó)白蛾卵塊,采集回來(lái)放置在養(yǎng)蟲(chóng)裝置內(nèi),使其自然孵化,選用同一批次健康活潑的美國(guó)白蛾2~3齡幼蟲(chóng)。
1.2.1 提取方法(冷浸法)。將透骨草干燥粉碎,過(guò)60目篩。透骨草粉末按質(zhì)量體積比1∶5的比例向其中加入甲醇溶液,用甲醇溶液進(jìn)行提取。在背光的地方冷浸1d后,利用超聲波提取器進(jìn)行輔助提取30 min,每次重復(fù)3次,收集提取液。將提取液進(jìn)行過(guò)濾,合并濾液,得到甲醇提取液。提取液要經(jīng)過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮,濃縮成濃膏后得到透骨草的甲醇提取物。將烘干后的透骨草甲醇提取物用水溶解,將甲醇提取物分別用正丁醇、乙酸乙酯、石油醚進(jìn)行萃取,分別得到正丁醇、乙酸乙酯、石油醚的萃取物。然后分別將其配制成濃度為4 mg/ml的透骨草正丁醇提取物、透骨草乙酸乙酯提取物、透骨草石油醚提取物的丙酮溶液。
1.2.2 毒力試驗(yàn)方法(葉片浸漬法)。采集足夠多的新鮮的未被污染的法國(guó)梧桐樹(shù)葉,用剪刀將葉片剪成4 cm×4 cm大小,然后葉片全部浸入藥液中10 s后立即取出,并放在濾紙上在通風(fēng)處晾干。將晾干的帶有藥品的法國(guó)梧桐樹(shù)葉放入貼有標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)放10頭美國(guó)白蛾幼蟲(chóng),蓋上培養(yǎng)皿。每組處理重復(fù)3次,用清水作為對(duì)照。分別于12 h、24 h、48 h后調(diào)查各試驗(yàn)組美國(guó)白蛾的死亡情況,記錄死亡蟲(chóng)數(shù)。
2.1 各提取物的死亡率和校正死亡率。從表1可以看出,這3種藥劑中乙酸乙酯萃取的透骨草提取物殺蟲(chóng)效果最好,在48 h內(nèi)殺蟲(chóng)率達(dá)到了100%。
表1 各殺蟲(chóng)劑的殺蟲(chóng)死亡率和校正死亡率
2.2 各提取物對(duì)美國(guó)白蛾的毒力分析。從表2可以看出3種萃取物在48h內(nèi)對(duì)美國(guó)白蛾的毒力,其中乙酸乙酯毒力最強(qiáng),LC50為0.995mg/ml。
表2 提取物單劑48 h對(duì)美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)的毒力
試驗(yàn)結(jié)果表明,透骨草甲醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、石油醚萃取物對(duì)美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)均有殺蟲(chóng)效果,但殺蟲(chóng)能力是不一樣的,校正死亡率的大小順序?yàn)椋阂宜嵋阴ポ腿∥铮菊〈驾腿∥铮臼兔演腿∥?。乙酸乙酯萃取物的殺蟲(chóng)效果較好,為防治美國(guó)白蛾提供了一種新的無(wú)公害方法。