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      法夫酵母類胡蘿卜素對UVA氧化損傷HSF細胞的保護作用

      2022-03-10 03:57:24陳曉晨白曼利陳昭華杜希萍
      激光生物學(xué)報 2022年1期
      關(guān)鍵詞:海膽青素胡蘿卜素

      陳曉晨,白曼利,陳昭華*,杜希萍,2,3,4

      (1. 集美大學(xué)海洋食品與生物工程學(xué)院,廈門 361021;2. 福建省食品微生物與酶工程重點實驗室,廈門361021;3. 廈門市食品與生物工程技術(shù)研究中心,廈門 361021;4. 廈門南方海洋研究中心海藻資源化利用與深加工重點實驗室,廈門 361021)

      由于環(huán)境污染造成臭氧層破壞,地表紫外線強度大大增加,強烈的紫外輻射給人類造成了炎癥、光氧化損傷、癌癥等多種損傷[1],起到主要作用的是長波長紫外線(Ultraviolet A,UVA)和中波長紫外線(Ultraviolet B,UVB)輻射。其中,UVA具有很強的穿透力,能夠達到皮膚真皮層,對真皮層的成纖維細胞造成氧化損傷[2]。有研究表明,具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機分子可以吸收短波紫外線,較長波長的紫外線則被具有線性重復(fù)結(jié)構(gòu)或環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機分子吸收[3]。

      類胡蘿卜素是由植物和微生物合成的最常見的天然色素之一,也是重要的抗氧化劑,可以通過抵消自由基的作用來減少炎癥和防止氧化損傷[4],具有抗炎[5]、抗粥樣動脈硬化[6]、抗糖尿病[7]、預(yù)防心血管疾?。?]等生物活性,被廣泛應(yīng)用于食品、化妝品和醫(yī)藥等行業(yè)。如圖1~3所示,蝦青素(astaxanthin)、β-胡蘿卜素(β-carotene)和海膽酮(echinenoneon)均是酮式類胡蘿卜素,具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)。其中,蝦青素與β-胡蘿卜素屬于胡蘿卜素類,天然存在于許多甲殼類動物、藻類和微生物中[9],海膽酮則屬于葉黃素類,主要存在于海膽中[10]。蝦青素骨架中共軛雙鍵及α-羥基酮的存在使其具有更強的抗氧化性以及其他重要的生物活性[11],被稱為“超級抗氧化劑”。

      圖1 蝦青素的分子結(jié)構(gòu)式Fig. 1 The molecular structure of astaxanthin

      在我們實驗室之前的研究中,以法夫酵母(Phaffia rhodozyma)為原材料制備出蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮[12],但它們對紫外輻射導(dǎo)致的皮膚損傷是否具有保護作用還未知。本文擬通過單一類胡蘿卜素蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮及三者按一定質(zhì)量濃度組合作用于UVA氧化損傷的人皮膚成纖維(human skin fibroblasts,HSF)細胞,研究HSF細胞的乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的變化,闡明類胡蘿卜素對UVA氧化損傷的保護作用,為應(yīng)用類胡蘿卜素開發(fā)對UVA輻射氧化損傷具有保護作用的化妝品和保健品提供理論依據(jù)和支持。

      1 材料與方法

      1.1 材料與試劑

      P. rhodozyma菌體由廈門匯盛生物有限公司提供;蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮由本實驗室從P.rhodozyma菌體中制備[12];甲基噻唑藍[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]購于美國Sigma公司;高糖培養(yǎng)(Dulbecco’s modified Eagle medium,DMEM)基購于美國HyClone公司;胎牛血清購于以色列Biological Industries;100×抗生素(10 000 IU/mL氨芐青霉素和10 mg/mL硫酸鏈霉素)溶液購于Sigma-Aldrich中國上海公司;LDH活性檢測試劑盒、MDA含量檢測試劑盒購于北京索萊寶(Solarbio)科學(xué)技術(shù)有限公司。

      圖2 β-胡蘿卜素的分子結(jié)構(gòu)式Fig. 2 The molecular structure of β-carotene

      圖3 海膽酮的分子結(jié)構(gòu)式Fig. 3 The molecular structure of echinenone

      1.2 主要儀器與設(shè)備

      UVA燈管(320~420 nm),Philips;臺灣先馳紫外線輻照計ST513,Krevor;AL104分析天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;HERACELL Vois 160i型CO2培養(yǎng)箱,德國賽默飛世爾科技公司;TS-100倒置顯微鏡,日本尼康(Nikon)公司;BioTek Cytation-5酶標儀,美國伯騰儀器有限公司。

      1.3 方法

      1.3.1 HSF細胞的培養(yǎng)與傳代

      將HSF細胞接種于含10%胎牛血清和1%雙抗的DMEM培養(yǎng)基中,于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),待細胞達到80%~90%融合時,吸棄培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS緩沖液洗2次,之后用0.25%胰酶消化2~3 min,吸棄消化液,加入DMEM培養(yǎng)基,制成細胞懸液,按1∶4傳代至培養(yǎng)瓶中,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

      1.3.2 UVA輻照劑量對細胞的影響

      6根平行的8 W紫外燈管為UVA光源,燈管距試驗臺7.5 cm,預(yù)熱10 min,將紫外輻照強度穩(wěn)定在13.5 mW/cm2,通過改變輻照時間改變UVA的輻照劑量。即UVA輻照劑量(J/cm2)= UVA輻照強度(W/cm2)× 輻照時間(s)[13]。

      設(shè)置輻照時間分別為0、10、16、20、24、28 min,即輻照劑量分別為8.10、12.96、16.20、19.44、22.68 J/cm2。吸棄待輻照細胞的原培養(yǎng)基,用PBS緩沖液清洗細胞,加少量PBS覆蓋細胞后進行輻照試驗。輻照結(jié)束后,吸棄PBS,加入DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,基于MTT法[14]測定細胞存活率,確定細胞半致死輻照劑量,每組設(shè)置4個平行試驗。

      1.3.3 細胞形態(tài)分析

      將HSF細胞以1.5×105個/mL接種于6孔板中,于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),當細胞融合為80%~90%時用不同輻照劑量的UVA輻照細胞。輻照結(jié)束后,于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,用倒置顯微鏡(200×)觀察細胞形態(tài)。

      1.3.4 單一類胡蘿卜素對HSF細胞的影響

      將HSF細胞以1.5×105個/mL接種于96孔板中,于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中孵育,當細胞融合為80%~90%時,加入不同質(zhì)量濃度(0、0.5、5.0、10.0、15.0、20.0 μg/mL)的樣品,繼續(xù)孵育2 h后,吸棄溶液,加入DMEM培養(yǎng)基,于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。應(yīng)用MTT法測定細胞存活率。根據(jù)細胞存活率,選擇單一類胡蘿卜素的低質(zhì)量濃度、中質(zhì)量濃度和高質(zhì)量濃度,進一步將低質(zhì)量濃度、中質(zhì)量濃度和高質(zhì)量濃度進行不同組合,用于后續(xù)研究類胡蘿卜素對UVA誘導(dǎo)HSF細胞氧化損傷的保護作用。

      1.3.5 不同胡蘿卜素組合對UVA誘導(dǎo)HSF細胞氧化損傷的保護作用

      將HSF細胞以1.5×105個/mL接種于96孔板中,于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中孵育,當細胞融合為80%~90%時,加入不同質(zhì)量濃度組合的類胡蘿卜素樣品,繼續(xù)孵育2 h后,吸棄溶液,用PBS緩沖液洗2次,之后96孔板底部用少量PBS緩沖液覆蓋,用1.3.2中得到的細胞半致死輻照劑量輻照細胞,輻照結(jié)束后棄PBS,加入DMEM培養(yǎng)基,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。應(yīng)用MTT法測定細胞存活率??瞻捉M不加樣品、無UVA輻照,對照組不加樣品、進行UVA輻照,試驗組為加樣品、進行UVA輻照,每組設(shè)置6個平行試驗。

      1.3.6 類胡蘿卜素對UVA輻照HSF細胞中LDH活性和MDA含量的影響

      將HSF細胞以3.0×105個/mL接種于6孔板中,2 mL/孔,當細胞融合為80%~90%時,加入樣品溶液,孵育2 h,吸棄溶液,用PBS緩沖液洗2次,之后加少量PBS覆蓋6孔板底部,用1.3.2中得到的細胞半致死輻照劑量輻照細胞,輻照結(jié)束后,吸棄PBS,加入DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。根據(jù)LDH活性檢測試劑盒和MDA含量檢測試劑盒的步驟分別測定LDH活性和MDA含量。空白組不加樣品、無UVA輻照,對照組不加樣品、進行UVA輻照,試驗組加樣品、進行UVA輻照,每組設(shè)置3個平行試驗。

      1.4 數(shù)據(jù)處理

      采用SPSS 17.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,采用Microsoft Excel 2013進行繪圖,用平均值±標準差表示試驗數(shù)值。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 UVA輻照劑量對HSF細胞存活率的影響

      如圖4所示,在輻照劑量范圍內(nèi),隨著UVA輻照劑量的增加,細胞存活率降低,表明輻照對HSF細胞的增殖具有抑制作用,并且呈劑量依賴性。當輻照劑量分別為12.96 J/cm2和16.20 J/cm2時,細胞存活率分別為56.05%和51.23%,兩者沒有顯著性差異(P>0.05),因輻照劑量為16.20 J/cm2時細胞存活率更接近半致死率,故選擇16.20 J/cm2為后續(xù)試驗的輻照劑量。

      圖4 UVA輻照劑量對HSF細胞存活率的影響Fig. 4 The effect of UVA irradiation dose on HSF cell survival rate

      2.2 UVA輻照劑量對HSF細胞形態(tài)的影響

      如圖5a所示,正常的HSF細胞多為長梭狀,細胞密集。當UVA輻照劑量為8.10 J/cm2,如圖5b所示,細胞開始皺縮變圓且密度減少,出現(xiàn)脫顆粒現(xiàn)象。當輻照劑量進一步增加到16.20 J/cm2(圖5c)和24.30 J/cm2(圖5d)時,細胞密度進一步減少,且與正常細胞相比,細胞間隙增大更明顯。此觀察結(jié)果與張永祥等[15]研究中經(jīng)UVA輻照后的HSF細胞的形態(tài)一致,與MTT法測定HSF細胞活力的結(jié)果相對應(yīng),即隨著輻照劑量的增加,細胞的存活率逐漸減小。

      圖5 UVA輻照劑量對HSF細胞形態(tài)的影響(200×)Fig. 5 The effects of UVA irradiation dose on morphology of HSF cell(200×)

      2.3 單一類胡蘿卜素對HSF細胞的影響

      圖6~8分別表示不同質(zhì)量濃度的蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮對HSF細胞存活率的影響??梢钥闯?,蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮單一地作用于HSF細胞時,細胞存活率的整體趨勢表現(xiàn)為先增加后減少。圖6中,當蝦青素的質(zhì)量濃度為15.0 μg/mL時,HSF細胞的存活率達到最大且與對照組存在顯著性差異(P<0.05),因此選15.0 μg/mL作為中質(zhì)量濃度;蝦青素質(zhì)量濃度為5.0 μg/mL時的細胞存活率較高,且與15.0 μg/mL的存活率有顯著性差異(P<0.05),故選此質(zhì)量濃度作為低質(zhì)量濃度;此外蝦青素為20.0 μg/mL時的細胞存活率較高,因此選擇20.0 μg/mL為高質(zhì)量濃度,從而得到蝦青素的低、中、高質(zhì)量濃度。圖7和圖8中,選擇細胞存活率最大的質(zhì)量濃度為中質(zhì)量濃度,在其質(zhì)量濃度前后分別選擇細胞存活率較大的濃度為低質(zhì)量濃度和高質(zhì)量濃度,從而得到β-胡蘿卜素的低質(zhì)量濃度、中質(zhì)量濃度和高質(zhì)量濃度分別為0.5、5.0和10.0 μg/mL;海膽酮的低質(zhì)量濃度、中質(zhì)量濃度和高質(zhì)量濃度分別是0.5、10.0和15.0 μg/mL。

      圖6 蝦青素對HSF細胞存活率的影響Fig. 6 The effects of astaxanthin concentration on HSF cell survival rate

      圖7 β-胡蘿卜素對HSF細胞存活率的影響Fig. 7 The effects of β-carotene concentration on HSF cell survival rate

      圖8 海膽酮對HSF細胞存活率的影響Fig. 8 The effects of echinenone concentration on HSF cell survival rate

      2.4 不同類胡蘿卜素組合對UVA誘導(dǎo)HSF細胞氧化損傷的保護作用

      將2.3中所得的蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮三種類胡蘿卜素的低質(zhì)量濃度、中質(zhì)量濃度和高質(zhì)量濃度進行排列組合,作用于UVA輻照后的HSF細胞,研究不同類胡蘿卜素組合對UVA誘導(dǎo)HSF細胞氧化損傷的保護作用。結(jié)果如表1所示。

      由表1可以看出,經(jīng)UVA輻照后對照組HSF細胞的存活率降低至(49.30±1.48)%,接近細胞半致死率,與空白組相比顯著下降(P<0.05),表明UVA輻照對HSF細胞有較嚴重的氧化損傷作用。不同類胡蘿卜素組合作用于UVA損傷的HSF細胞后,其細胞存活率不同。當組合中的蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮分別為20.0 μg/mL、0.5 μg/mL和0.5 μg/mL時,HSF細胞存活率達到最大為(59.07±3.04)%,顯著大于對照組(P<0.05),表明該組合對輻照損傷的細胞具有最強的保護作用,故選擇此樣品質(zhì)量濃度組合用于后續(xù)研究。當蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮分別為20.0 μg/mL、5.0 μg/mL和10.0 μg/mL時,細胞存活率最小,為(40.00±2.00)%,顯著小于對照組(P<0.05)。除該組合外,還有4組排列組合的細胞存活率低于對照組,表明對輻照損傷后的HSF細胞沒有保護作用,其余22組類胡蘿卜素組合均可顯著增加細胞存活率,表明對UVA誘導(dǎo)HSF細胞氧化損傷的具有較強的保護作用。

      表1 不同類胡蘿卜素組合對HSF細胞存活率的影響Tab. 1 The effects of different carotenoids groups on HSF cell survival rate

      此外,當蝦青素為5.0、15.0 μg/mL,β-胡蘿卜素為0.5、5.0 μg/mL時或蝦青素為15.0 μg/mL,β-胡蘿卜素為10.0 μg/mL時,不同類胡蘿卜素組合的細胞存活率基本隨海膽酮質(zhì)量濃度的增加呈上升趨勢;當蝦青素為5.0 μg/mL,β-胡蘿卜素為10.0 μg/mL時,不同類胡蘿卜素組合的細胞存活率隨海膽酮質(zhì)量濃度的增加呈下降的趨勢;當蝦青素為20.0 μg/mL,β-胡蘿卜素為0.5 μg/mL時,不同類胡蘿卜素組合的細胞存活率隨海膽酮質(zhì)量濃度的增加而下降;當蝦青素為20.0 μg/mL,β-胡蘿卜素為5.0 μg/mL或10.0 μg/mL時,不同類胡蘿卜素組合的細胞存活率隨海膽酮質(zhì)量濃度的增加均先降低后增加。

      2.5 類胡蘿卜素對UVA輻照HSF細胞中LDH活性和MDA含量的影響

      類胡蘿卜素對UVA輻照HSF細胞中LDH活性和MDA含量的影響如圖9和圖10所示。與空白組相比,經(jīng)UVA輻照的對照組的LDH活性、MDA含量均顯著增加(P<0.05),分別為(0.142 0±0.016 7)U/104cell和(0.083 5±0.013 6)nmol/104cell,表明輻照誘導(dǎo)HSF細胞產(chǎn)生氧化損傷。與對照組相比,單一類胡蘿卜素蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮和三者組合的類胡蘿卜素分別作用于UVA氧化損傷的HSF細胞,均可使LDH活性和MDA含量顯著降低(P<0.05),說明類胡蘿卜素均可減輕UVA輻照對HSF細胞的氧化損傷,對HSF細胞具有一定的保護作用。

      由圖9可知:在單一類胡蘿卜素試驗組中,當蝦青素、β-胡蘿卜素均為5.0 μg/mL時,其LDH活性分別為(0.042 3±0.004 9)U/104cell和(0.061 2±0.013 2)U/104cell,表明蝦青素對損傷細胞的保護作用強于β-胡蘿卜素;當蝦青素、海膽酮均為15.0 μg/mL時,其LDH活性分別為(0.039 8±0.004 5)U/104cell、(0.059 3±0.010 1)U/104cell,表明蝦青素對損傷細胞的保護作用強于海膽酮;當β-胡蘿卜素和海膽酮均為0.5、10.0 μg/mL時,β-胡蘿卜素的LDH活性均顯著高于海膽酮(P<0.05),表明海膽酮對損傷細胞的保護作用強于β-胡蘿卜素。因此,蝦青素對UVA輻照引起HSF細胞氧化損傷具有最強的保護作用,β-胡蘿卜素對HSF細胞氧化損傷的保護作用最弱。β-胡蘿卜素和海膽酮均在中質(zhì)量濃度時LDH活性最低,而不同質(zhì)量濃度蝦青素作用后的LDH活性沒有顯著性差異(P>0.05)。20.0 μg/mL蝦青素、0.5 μg/mL β-胡蘿卜素和0.5 μg/mL海膽酮組合作用后的LDH活性為(0.052 8±0.018 9)U/104cell(試驗組10),20.0 μg/mL蝦青素的LDH活性為(0.041 3±0.004 5)U/104cell,顯著低于組合組(P<0.05),而0.5 μg/mL β-胡蘿卜素和海膽酮的LDH活性分別為(0.072 4±0.007 0)U/104cell、(0.058 9±0.005 9)U/104cell,顯著高于組合組(P<0.05),表明20.0 μg/mL蝦青素對損傷細胞的保護作用高于組合組,而0.5 μg/mL β-胡蘿卜素和海膽酮對損傷細胞的保護作用均低于組合組。

      圖9 不同樣品對HSF細胞中LDH活性的影響Fig. 9 The effects of different sample on LDH activity in HSF cells

      由圖10可知:在單一類胡蘿卜素試驗組中,當蝦青素、β-胡蘿卜素均為5.0 μg/mL時,其MDA含量分別為(0.049 7±0.003 9)nmol/104cell、(0.047 4±0.003 2)nmol/104cell,兩者無顯著性差異(P>0.05);當蝦青素、海膽酮均為15.0 μg/mL時,其MDA含量分別為(0.039 3±0.002 9)nmol/104cell、(0.049 7±0.001 3)nmol/104cell,兩者無顯著性差異(P>0.05);當β-胡蘿卜素和海膽酮均為0.5 μg/mL和10.0 μg/mL時,雖然β-胡蘿卜素的MDA含量均高于海膽酮,但無顯著性差異(P>0.05)。因此,蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮三者對UVA輻照引起HSF細胞氧化損傷的MDA含量均沒有顯著性差異(P>0.05)。此外,蝦青素、β-胡蘿卜素和海膽酮均在中質(zhì)量濃度時MDA含量最低,但不同質(zhì)量濃度類胡蘿卜素作用后的MDA含量沒有顯著性差異(P>0.05)。20.0 μg/mL蝦青素、0.5 μg/mL β-胡蘿卜素和0.5 μg/mL海膽酮組合作用后的MDA含量為(0.045 5±0.001 3)nmol/104cell(試驗組10),20.0 μg/mL蝦青素作用后的MDA含量為(0.044 8±0.001 9)nmol/104cell,0.5 μg/mL β-胡蘿卜素和海膽酮作用后的MDA含量分別為(0.052 7±0.003 2)nmol/104cell、(0.051 3±0.004 8)nmol/104cell,均與組合組沒有顯著性差異(P>0.05),但20.0 μg/mL蝦青素對損傷細胞的保護作用高于組合組,而0.5 μg/mL β-胡蘿卜素和海膽酮對損傷細胞的保護作用均低于組合組。

      圖10 不同樣品對HSF細胞中MDA含量的影響Fig. 10 The effect of different sample on MDA content in HSF cells

      綜上所述,各組分均可減少UVA輻射對細胞的毒性,對細胞損傷具有一定的保護作用。所有試驗組中,15.0 μg/mL蝦青素的LDH活性和MDA含量均最低,對UVA輻照引起HSF細胞氧化損傷的保護作用最強;10.0 μg/mL β-胡蘿卜素的LDH活性和MDA含量均最高,對UVA輻照引起HSF細胞氧化損傷的保護作用最弱。并且,相對于β-胡蘿卜素和海膽酮來說,三種類胡蘿卜素組合對細胞損傷的保護具有協(xié)調(diào)作用,但對于蝦青素來說,類胡蘿卜素組合組對細胞的保護作用小于其單獨作用,具有負協(xié)調(diào)作用。

      3 討論

      紫外線主要通過誘導(dǎo)皮膚產(chǎn)生氫氧根離子、過氧化氫、單線態(tài)氧和超氧陰離子等導(dǎo)致HSF細胞的氧化損傷[15]。類胡蘿卜素是由碳碳共軛鍵鏈組成的多烯堿,可以通過促進電子的自由移動并與未配對的電子組合,淬滅自由基和單線態(tài)活性氧,發(fā)揮抗氧化作用,達到保護和阻遏HSF細胞氧化性損傷的作用[16]。

      LDH是人體能量代謝過程中重要的酶,可以通過檢測LDH活性判斷細胞的損傷程度。LDH活性越大,細胞破壞損傷的程度越大,通透性越大。MDA是氧自由基攻擊細胞后產(chǎn)生的脂過氧化物,具有一定的細胞毒性,能破壞細胞的結(jié)構(gòu)和功能,MDA含量越高,表明體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度越大[17]。本文將蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮和三者以一定質(zhì)量濃度組合后作用于經(jīng)UVA輻照氧化損傷的HSF細胞,通過測定LDH活性和MDA含量,研究類胡蘿卜素對UVA氧化損傷HSF細胞的保護作用。結(jié)果表明,單一類胡蘿卜素蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮和三者組合的類胡蘿卜素均顯著降低UVA輻照的HSF細胞的LDH活性和MDA含量(P<0.05),說明類胡蘿卜素可減輕UVA輻照對HSF細胞的氧化損傷,對HSF細胞具有保護作用,這與Lyons等[18]的研究結(jié)果一致。據(jù)文獻報道,具有抗氧化作用的蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮主要通過直接清除自由基,阻止自由基反應(yīng)對細胞膜的損傷,從而降低LDH活性和MDA含量[19-21]。蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮按一定質(zhì)量濃度組合后的LDH活性低于同等質(zhì)量濃度的β-胡蘿卜素和海膽酮,說明不同類胡蘿卜素具有協(xié)同作用。已有研究表明,類胡蘿卜素蝦青素和β-胡蘿卜素具有協(xié)同抗氧化作用[21];另外,蝦青素與維生素C對過氧化氫和UVB照射建立的氧化應(yīng)激模型同樣具有協(xié)同抗氧化作用[22]。相同質(zhì)量濃度下,蝦青素降低LDH活性優(yōu)于β-胡蘿卜素,表明蝦青素對細胞氧化損傷的保護效果較好,這可能是因為蝦青素的抗氧化能力高于β-胡蘿卜素[21]。此外,Komatsu等[23]報道,食用蝦青素可以抑制由UVA輻射引起的皮膚屏障功能受損和皺紋等光老化現(xiàn)象,而且所食用的蝦青素會在皮膚中積累,可預(yù)防UVA照射對表皮和真皮中聚絲蛋白代謝和脫屑的影響。

      綜上可知,蝦青素、β-胡蘿卜素、海膽酮可減輕UVA對HSF細胞的氧化損傷。本文的研究結(jié)果為應(yīng)用類胡蘿卜素開發(fā)對UVA輻射氧化損傷具有保護作用的化妝品和保健品提供了理論依據(jù)和支持。

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