葛 蕾，趙昌軍，張 娟，張文濤

(淄博市食品藥品檢驗(yàn)研究院，山東 淄博 255086)

0 引言

莫西沙星是拜耳公司研制的一種抗生素，具有廣譜抗菌活性[1]，主要用于治療急性細(xì)菌性鼻竇炎、支氣管炎、肺炎等上呼吸道和下呼吸道感染及復(fù)雜性腹腔感染等疾病[2-3]。合成莫西沙星的關(guān)鍵原料藥是S，S-2，8-二氯雜雙環(huán)[4,3,0]壬烷[4]，在生產(chǎn)中催化劑鈀碳作用巨大，從而使鈀殘留物被進(jìn)一步帶入到藥物制劑中，造成藥品中鈀元素的殘留。鈀作為具有其他毒性的第Ⅰ類(lèi)金屬，歐洲藥品管理局(EMEA)規(guī)定其含量不得大于1 ppm[5]。傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法已不能滿足重金屬雜質(zhì)的控制要求，急需靈敏度更高、檢測(cè)限更低的儀器和方法。對(duì)金屬元素雜質(zhì)的檢測(cè)方法報(bào)道較多，主要集中在原子吸收石墨爐法[6-10]、ICP-OES法測(cè)定[11-12]及ICP-MS法[13-15]。測(cè)定不同的樣品，所需儀器參數(shù)不盡相同。為了保證檢測(cè)準(zhǔn)確，更有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，結(jié)合中國(guó)藥典2015年版[16]和美國(guó)藥典通則USP<233>[17]的要求，建立了ICP-MS法對(duì)莫西沙星原料藥中鈀金屬殘留量進(jìn)行檢測(cè)的方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

安捷倫ICP-MS質(zhì)譜儀(7800型，美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn))、泰國(guó)電熱板(EH45B型，泰國(guó)萊伯泰科公司生產(chǎn))、美國(guó)微波消解儀(MARS型，CEM美國(guó)公司生產(chǎn))、美國(guó)高純水儀(Milli-Q型，Millipore美國(guó)公司生產(chǎn))、瑞士電子分析天平(十萬(wàn)分之一MS205DU型，梅特勒瑞士公司生產(chǎn))。

1.2 試藥

鈀元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(標(biāo)準(zhǔn)值：1 000 μg/mL 批號(hào)：20D9450)、銦元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(標(biāo)準(zhǔn)值：1 000 μg/mL 批號(hào)：207032-1)均購(gòu)于國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心；硝酸(UP級(jí)，蘇州晶瑞化學(xué)試劑股份有限公司提供)；原料藥S，S-2，8-二氯雜雙環(huán)[4,3,0]壬烷(批號(hào)：20200505、20200621、20200626，某制藥廠提供)。

2 方法與結(jié)果

2.1 工作條件

射頻功率RF：1 550 W；等離子體流速：15.0 L/min；輔助氣流速：0.90 L/min，霧化氣流速：1.09 L/min，氧化物比：CeO+/Ce+=0.531%，雙電荷比：Ce++/Ce+=2.561%。

2.2 鈀標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的配制

準(zhǔn)備100 mL容量瓶，準(zhǔn)確量取1 mL鈀元素標(biāo)液(1 000 μg/mL)，置于其中，用3%硝酸水溶液定容，逐級(jí)稀釋制備成1 μg/mL鈀金屬元素標(biāo)準(zhǔn)曲線濃溶液；分別精密量取0.0、1.0、5.0、10.0、20.0、25.0 mL鈀標(biāo)準(zhǔn)曲線濃溶液，定容到100 mL，即得0、10 、50、100、200、250 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

2.3 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

準(zhǔn)備100 mL容量瓶，準(zhǔn)確量取1.0 mL銦金屬元素標(biāo)液(1 000 μg/mL)置于其中，用3%硝酸水溶液定容，即得。

2.4 供試品溶液的制備

稱取試樣約0.5 g，精密稱定，放入至微波消解儀溶樣管中，加濃硝酸6.0 mL靜置，經(jīng)過(guò)一夜浸泡，置于微波消解儀中，按設(shè)定的步驟進(jìn)行微波消解(見(jiàn)表1)。放涼后趕酸至液體剩余量約1 mL，將剩余溶液倒入25 mL量瓶中，用3%硝酸溶液多次潤(rùn)洗溶樣管，潤(rùn)洗液小心倒入容量瓶中，用3%硝酸溶液定容。試劑空白同時(shí)做。

表1 微波消解程序Tab.1 Microwave digestion program

2.5 測(cè)定方法

調(diào)整儀器至最佳測(cè)試條件，采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定，以115In作為內(nèi)標(biāo)，測(cè)定時(shí)選取106Pd，測(cè)定時(shí)內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣管一直插在銦溶液中，按濃度由小到大順序依次插入樣品管對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，鈀測(cè)定值與內(nèi)標(biāo)測(cè)定值的比值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，儀器軟件自動(dòng)繪制出回歸曲線。將樣品管放入樣品液，儀器自動(dòng)讀取結(jié)果。按照回歸曲線測(cè)算出對(duì)應(yīng)的濃度，同時(shí)扣除空白樣品的濃度，得出供試品的濃度。

3 方法學(xué)驗(yàn)證

3.1 線性范圍

對(duì)6個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)行測(cè)定，以鈀數(shù)值與銦數(shù)值的比值為縱坐標(biāo)(Y)，標(biāo)液濃度為橫坐標(biāo)(X)，繪制方程，結(jié)果顯示鈀金屬元素在濃度0～250 ng/mL時(shí)，與響應(yīng)值保持良好線性關(guān)系，線性方程為：y=0.007 1x+0.000 1(r=0.999 7)。

3.2 精密度

取100 ng/mL鈀標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算，RSD=2.16%(n=6)，表明精密度良好。

3.3 檢出限與定量限

取樣品空白溶液，進(jìn)樣11次，通過(guò)測(cè)量11次空白溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)偏差，得出檢出限和定量限，鈀(Pd)元素的檢出限為0.055 ng/mL，定量限為0.55 ng/mL。按取樣量0.5 g，定容到25 mL計(jì)，檢出限為0.003 μg/g，定量限為0.027 μg/g。

3.4 重復(fù)性

取批號(hào)為20200505的樣品6份，加入鈀(Pd)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg/mL)1.0 mL，參照2.4方法操作制備，測(cè)定6份供試品溶液中鈀元素的濃度，考察重復(fù)性，鈀元素測(cè)定結(jié)果平均值為41.316 ng/mL，RSD=2.2%(n=6)，說(shuō)明本方法有較好的重復(fù)性。

3.5 回收率

取批號(hào)為20200505的樣品0.5 g，精密加入鈀(Pd)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg/mL)0.5、1.5、2.5 mL，每個(gè)濃度平行制備3份，按照2.4方法操作，制備考察加標(biāo)回收率的溶液，結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明該方法具有良好的回收率。

表2 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.2 Recovery test results

3.6 中間精密度試驗(yàn)

取批號(hào)為20200505的樣品0.5 g，精密加入鈀(Pd)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg/mL)1.0 mL，參照2.4方法操作，在第1、2、3 d分別重復(fù)制備3份樣品溶液，測(cè)定鈀金屬的濃度，結(jié)果9次測(cè)定結(jié)果平均值為41.332 ng/mL，RSD=2.3%(n=9)，證明本方法有良好的中間精密度。

3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取批號(hào)為20200505的樣品0.5 g，精密加入鈀(Pd)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg/mL)1.0 mL，參照2.4方法制備操作，在制備后2、4、8、12、24 h重復(fù)測(cè)定鈀的濃度，測(cè)定結(jié)果5次平均值為41.673 ng/mL，RSD=2.1%(n=5)，結(jié)果表明樣品溶液放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

3.8 樣品測(cè)定結(jié)果

按本方法，測(cè)得三批樣品(20200505，20200621，20200626)，結(jié)果均為未檢出(小于檢出限0.003 μg/g)。

4 結(jié)論

為快速測(cè)定莫西沙星原料藥S，S-2，8-二氯雜雙環(huán)[4,3,0]壬烷中鈀元素，本實(shí)驗(yàn)處理樣品采用微波消解法，利用ICP-MS建立了方法，為其他類(lèi)似品種化學(xué)藥品中金屬元素的測(cè)定提供了思路。本方法的優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)快捷，定量限低，線性范圍寬，完全可以滿足現(xiàn)行的限度要求，可用于莫西沙星原料藥中鈀殘留量的檢測(cè)。