王曄

關(guān)鍵詞：液質(zhì)聯(lián)用 ? 非法添加 ?改善睡眠類(lèi)保健品

【中圖分類(lèi)號(hào)】 R338.63 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A ? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2022）06--02

Key words： UPLC-MS-MS ?Illegally added drugs ?Improving sleep health foods

隨著我國(guó)保健食品醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)在內(nèi)的健康產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，滿足了人們追求高質(zhì)量生活的需求，但同時(shí)也帶來(lái)了一系列的食品安全問(wèn)題[1]。諸如保健食品中非法添加化學(xué)成分的造假行為以達(dá)到短期內(nèi)收到立竿見(jiàn)影的效果，從而迅速占領(lǐng)市場(chǎng)收獲了經(jīng)濟(jì)效益，卻損害了人民群眾的身心健康，嚴(yán)重的甚至威脅生命。為了有效打擊這些非法添加行為，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的引入，先準(zhǔn)確定性，排除假陽(yáng)性的可能，如樣品中確定含有非法添加的化學(xué)成分再逐一定量計(jì)算，為食藥監(jiān)管部門(mén)的嚴(yán)格監(jiān)管提供了有力保障[2，3]。

改善睡眠類(lèi)保健食品以其獨(dú)特的效果和較小的副作用為廣大失眠患者接受，可是一些不法分子在改善睡眠類(lèi)保健食品中非法添加鎮(zhèn)靜催眠類(lèi)化學(xué)藥物，以達(dá)到快速治療失眠的效果，從而吸引患者購(gòu)買(mǎi)，但是此類(lèi)化學(xué)藥物會(huì)造成嚴(yán)重的不良反應(yīng)，甚至?xí)斐勺詺⑿詢A向，由于具有耐藥性和依賴性，大多列為國(guó)家二類(lèi)精神藥品。本文主要建立了比較常見(jiàn)添加的10種苯并二氮雜卓類(lèi)鎮(zhèn)靜催眠類(lèi)化學(xué)藥物液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法[4]。

1 材料與方法

1.1材料與儀器

對(duì)照品采購(gòu)均來(lái)源于SIGMA公司，樣品從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)改善睡眠類(lèi)保健品，乙腈及甲酸均為色譜純，水為經(jīng)Millipore超純水器凈化而得的超純水。Waters Xevo TQ-S 三重四極桿質(zhì)譜儀，ESI電離源，Waters Acquity RTM 超高效液相色譜儀。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 ?樣品提取及前處理 對(duì)于固體試樣取一次口服劑量的樣品研細(xì)，加50ml甲醇，稱(chēng)重，超聲處理30min，取出，放冷至室溫，用甲醇補(bǔ)重，過(guò)濾，取1ml溶液至10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，作為供試品溶液。對(duì)于液體試樣取一次口服量減壓濃縮至近干，轉(zhuǎn)移至具塞三角瓶中，其于同固體試樣操作。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制 分別精密稱(chēng)取咪達(dá)唑侖、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖、氯氮卓、硝西泮、奧沙西泮、勞拉西泮、地西泮、氯硝西泮10種標(biāo)準(zhǔn)品10mg置100ml量瓶中用甲醇溶解稀釋制成各濃度均為0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇單獨(dú)溶解稀釋制成濃度為0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。分別取上述標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液適量用甲醇稀釋至濃度為0.1ug/ml的混標(biāo)溶液，其中氯硝西泮為負(fù)離子檢測(cè)模式單獨(dú)另配。

1.2.3 色譜條件 色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C18（2.1mm×50 mm，1.7 μm）;柱溫：30 ℃;流動(dòng)相：乙腈為流動(dòng)相A，0.5%甲酸溶液為流動(dòng)相B，按下表梯度洗脫，流速：0.3 ml/min。負(fù)離子模式等度洗脫乙腈-0.5%甲酸溶液（30：70）

1.2.4 質(zhì)譜條件 ?離子源為ESI源，毛細(xì)管電壓3Kv，離子源溫度150 ℃;脫溶劑氣流為800L/h;脫溶劑氣流溫度為500 ℃;錐孔氣流為150 L/h。正離子方式檢測(cè)（ESI+）：咪達(dá)唑侖、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖、氯氮卓、硝西泮、奧沙西泮、勞拉西泮、地西泮。負(fù)離子方式檢測(cè)（ESI-）：氯硝西泮

1.2.5 樣品測(cè)定 在正離子檢測(cè)模式與負(fù)離子檢測(cè)模式下分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液各1ul注如入液質(zhì)聯(lián)用儀，按上述測(cè)定條件進(jìn)行測(cè)定分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的優(yōu)化 （總離子圖）

2.3 檢出限

本實(shí)驗(yàn)選用10種混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，加甲醇逐步稀釋?zhuān)瓷鲜鲆嘿|(zhì)聯(lián)用條件進(jìn)行測(cè)定，以S/N=3，計(jì)算各化學(xué)成分的檢測(cè)限，檢出限均小于1ng，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)要求。

2.4 方法專(zhuān)屬性

實(shí)驗(yàn)表明，在陰性樣品中加入適量對(duì)照品，按上述樣品提取方式處理，配成上述對(duì)照品溶液的濃度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，陰性樣品基質(zhì)無(wú)干擾，在有基質(zhì)共存情況下仍可篩查出上述10種非法添加成分。

2.5樣品測(cè)定結(jié)果

該方法主要是用來(lái)對(duì)保健食品中是否非法添加了化學(xué)藥品作定性分析，如供試品色譜圖中檢出的某離子色譜峰保留時(shí)間與混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液中某化學(xué)成分相一致，則取該化學(xué)成分的準(zhǔn)分子離子進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜全掃描驗(yàn)證，若供試品的保留時(shí)間和特征碎片離子均與標(biāo)準(zhǔn)品相同，則判斷該供試品中含有此化學(xué)成分[5，6]。

3 討論

上述實(shí)驗(yàn)中地西泮和阿普唑侖兩種成分在總離子圖中保留時(shí)間接近難以分開(kāi)，但其質(zhì)量數(shù)不同，在各離子圖中可以得到很好的區(qū)分，這是液-質(zhì)-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的優(yōu)勢(shì)。本方法主要是快速初篩保健品中有無(wú)添加上述10種化學(xué)成分，如檢出上述某一種或幾種成分，再用靈敏度高、信號(hào)強(qiáng)的離子對(duì)做定量分析以計(jì)算出準(zhǔn)確添加的化學(xué)成分含量。

參考文獻(xiàn)：

[1]謝志潔，雷毅，羅卓雅等.健康產(chǎn)品中非法添加化學(xué)成分快速篩查方法理論與實(shí)踐[M].廣州：華南理工大學(xué)出版社，2011.

[2]王貞媛，李丹，文紅梅，等.LC-MS/MS法快速篩選保健食品中非法添加的18種止咳平喘化學(xué)成分[J] .中華中醫(yī)學(xué)刊，2012，30（1）：172-175.

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[4]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批準(zhǔn)件 批準(zhǔn)件編號(hào)2009024.安神類(lèi)中成藥[Z].2009-12-04

[5]Wang J，Chen B，Yao S，Analysis of six synthetic adulterants in herbal weight-reducing dietary supplements by LC electrospray ionization-MS[J]. Food Addit Contam， 2008，25（7）：822-830

[6]Liang Q，Qu J，Luo G，et al.Rapid and reliable determination of illegal adulterant in herbal medicines and dietary supplements by LC/MS/MS[J].J Pharm Biomed Anal，2006，40（2）：305-311