林明波

摘要：制備型的高效液相色譜技術(shù)，作為一項(xiàng)有效而精密的樣品分離與分析手段，在實(shí)際使用中有著良好的效果。因此，本文將通過(guò)對(duì)制備型高效液相色譜技術(shù)研究進(jìn)展分析，探究制備型高效液相色譜技術(shù)的體系構(gòu)建方法與分析型液相色譜技術(shù)之間的差異，從而進(jìn)一步提高制備型高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用技術(shù)水平。

關(guān)鍵詞：制備型;高效液相色譜技術(shù);研究進(jìn)展

【中圖分類(lèi)號(hào)】 R197.39 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2022）08--01

引言：制備型高效液相色譜技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中，主要是通過(guò)特定的組分在固相液體與流動(dòng)相中分配系數(shù)較小的差異，在固定相和流動(dòng)相運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，組分內(nèi)部也會(huì)逐漸形成遷移速度不同的普代，進(jìn)而滿(mǎn)足高效分離的特點(diǎn)。我國(guó)通過(guò)制備型高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用，已經(jīng)充分研究出了全新的填充方法和填充料，并且推動(dòng)了該技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展水平。

1制備型高效液相色譜系統(tǒng)組成

在制備型高效液相色譜技術(shù)結(jié)構(gòu)中，其裝置并沒(méi)有分析型高效液相色譜技術(shù)中的重要，也就是說(shuō)，制備型高效液相色譜技術(shù)并不需要特別高級(jí)的裝置來(lái)支持，只需要采用普通的裝置就可以完成分離，并且也能夠起到良好的分離效果。而制備型高效液相色譜裝置的組成結(jié)構(gòu)主要包括以下幾個(gè)部分：

1.1輸液泵

對(duì)于輸液泵的輸液要求較高，但是制備型高效液相色譜技術(shù)并不需要太高的輸送壓力，只要確保輸液泵的輸液壓力滿(mǎn)足19.6MPa即可，為此，在裝置的設(shè)計(jì)中，輸液泵裝置一般都選擇恒流往復(fù)泵，也可以采用恒壓?jiǎn)?dòng)放大泵進(jìn)行輸液。但結(jié)合當(dāng)前的小顆粒固定相粗柱制備環(huán)節(jié)中，則需要比之前的輸液泵的壓力更高，選擇能夠提供更大壓力的輸液泵。對(duì)于一些特定場(chǎng)合也可能需要150bar的高壓，因此要選擇薄膜式輸液泵。當(dāng)內(nèi)徑較小的制備柱時(shí)，可以通過(guò)分析型輸液泵的應(yīng)用，保障制備柱內(nèi)徑較大。

1.2進(jìn)樣系統(tǒng)

通過(guò)制備型高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行樣品分離過(guò)程中，也可以通過(guò)進(jìn)樣閥門(mén)的設(shè)置，為大部分樣品的注入提供便利，同時(shí)也避免影響樣品流動(dòng)相與固定相相互流動(dòng)。通過(guò)樣品環(huán)的更換，能夠進(jìn)一步提高進(jìn)樣量水平，能夠?qū)崿F(xiàn)10mL的進(jìn)樣量。倘若采用注射器等裝置，也需要配置完善的停留進(jìn)樣技術(shù)，在實(shí)際應(yīng)用中能夠使樣品處于常壓條件下注入到柱子內(nèi)，并且重新啟動(dòng)泵。當(dāng)樣品的總量較多時(shí)，也可以利用停留技術(shù)與小體積輸液泵配合，更有效地將樣品液體注入柱體中，還可以通過(guò)隔膜進(jìn)樣技術(shù)，采用注射器進(jìn)行注射量的有效把控。

1.3色譜柱

制備型高效液相色譜技術(shù)與以往的分析型液相色譜技術(shù)相比來(lái)看，色譜柱是整個(gè)系統(tǒng)的核心部位，為了能夠有效提升制備型高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用質(zhì)量，提高色譜柱的穩(wěn)定性與高效性，同時(shí)保障小尺寸的樣品顆粒進(jìn)行有效填筑，一般最理想的色譜柱就是通過(guò)動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。而動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中能夠給測(cè)量人員提供任意性的填充色譜柱，從而起到色譜柱長(zhǎng)度調(diào)節(jié)的便捷性與高效性。在制備型高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用中，色譜柱內(nèi)徑要選擇在100～500mm左右，通常情況下，色譜柱直徑越大，就可以承載多種樣品，從而達(dá)到產(chǎn)量提升的效果。提高色譜柱的長(zhǎng)度還能夠提高樣品分辨率和樣品注入量，也能夠提高色譜柱壓力。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)遇到物系難以分離的情況時(shí)，能夠通過(guò)直徑比較小的色譜進(jìn)行填充，從而起到有效分離的作用，但是在分離度滿(mǎn)足要求的基礎(chǔ)上，通過(guò)大直徑色譜柱填充料也能夠達(dá)到更好的效果。

1.4檢測(cè)器

對(duì)于當(dāng)前的檢測(cè)器使用情況來(lái)看，示差折光檢測(cè)器具有良好的應(yīng)用價(jià)值，一般在制備型高效液相色譜系統(tǒng)的應(yīng)用中可以滿(mǎn)足實(shí)際樣品分離效果，但是在一些特定的系統(tǒng)中，為了提高檢測(cè)樣品的準(zhǔn)確性，一般需要將示差和紫外分光光度檢測(cè)設(shè)計(jì)運(yùn)用，也可以采用薄層色譜對(duì)高濃度的流出液進(jìn)行分析檢測(cè)，因此在檢測(cè)方法中，可以利用薄層色譜檢測(cè)技術(shù)。

2制備型高效液相色譜技術(shù)應(yīng)用

2.1樣品預(yù)處理

在開(kāi)展制備型高效液相色譜技術(shù)應(yīng)用前，首先需要對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行預(yù)處理，將樣品有效過(guò)濾，通過(guò)將合適的濾片設(shè)置在注射器的頭部，進(jìn)行樣品過(guò)濾處理時(shí)，能夠有效去除樣品的顆粒雜質(zhì)，采用這種方法不但簡(jiǎn)單易操作，同時(shí)也有助于樣品處理成本的降低。而這一處理環(huán)節(jié)主要原因是樣品中含有的顆粒雜質(zhì)會(huì)引發(fā)高壓液相色譜儀閥門(mén)堵塞，從而影響檢測(cè)效果。在過(guò)濾處理中可以選擇塑料或者不修改材質(zhì)的濾片，也可以使用一次性聚丙烯濾片。聚丙烯濾片存在凹陷入口，能夠與注射器有效銜接。過(guò)濾膜材料包括尼龍、乙酸纖維、無(wú)機(jī)膜等，在選擇時(shí)必須注重適當(dāng)?shù)倪x用溶液。

2.2制備規(guī)模

根據(jù)制備型高效液相色譜的分離進(jìn)樣總量，一般選擇半制備、克級(jí)以及工業(yè)級(jí)三種制備規(guī)模，具體參數(shù)如表1所示：

2.3柱超載方式

制備型高效液相色譜技術(shù)和分析型液相色譜技術(shù)從本質(zhì)上的差別在于對(duì)樣品的分離目的不相同。對(duì)分離性液相學(xué)色譜法技術(shù)而言，通常要呈現(xiàn)出樣品的基本組成信息，不需要收集達(dá)到特定純度的餾分，而洗提液則通常都為廢液處理。在選擇制備型高效液相色譜技術(shù)時(shí)，為合理節(jié)省研究投入和運(yùn)行經(jīng)費(fèi)，往往需要采用最小的實(shí)踐產(chǎn)出與更大的生產(chǎn)率。所以，制備型高效液相色譜技術(shù)的操作方法，又不同于分析式液相色譜技術(shù)。制備型高效液相色譜技術(shù)對(duì)進(jìn)樣量要求是越小越好，柱超載方式為質(zhì)量超載。在實(shí)際應(yīng)用中，認(rèn)為使用質(zhì)量超載方式比較高。

3結(jié)束語(yǔ)

綜上所述，隨著我國(guó)分析分離技術(shù)的不斷發(fā)展，許多弊端也逐漸呈現(xiàn)出來(lái)，為此，通過(guò)制備型高效液相色譜技術(shù)的引入，也帶來(lái)了許多樣品分離優(yōu)勢(shì)，在實(shí)際中達(dá)到良好的應(yīng)用效果。為此，人們必須積極探索良好的制備型高效液相色譜技術(shù)要點(diǎn)，分析組成結(jié)構(gòu)，明確在實(shí)際分離和樣品制備中的應(yīng)用。

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