0 引言

胃癌作為最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一,嚴(yán)重威脅著人們生命和健康.雖然手術(shù)、放化療、靶向藥物治療、腫瘤免疫治療等綜合治療策略不斷發(fā)展,但胃癌患者5年生存率并未得到明顯提高

.胃癌發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,其中癌基因和抑癌基因表達(dá)失調(diào)是其進(jìn)展的關(guān)鍵因素.近年來(lái),隨著測(cè)序技術(shù)飛速進(jìn)展越來(lái)越多與腫瘤相關(guān)的長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)被相繼發(fā)現(xiàn),其通過(guò)吸附微小RNA(miRNA)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后修飾等方式廣泛參與細(xì)胞增殖、凋亡、浸潤(rùn)等細(xì)胞過(guò)程在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮作用作用

.長(zhǎng)基因間非編碼RNA 01426(LINC01426)位于21q22.12,研究指出食管癌、結(jié)直腸癌等惡性腫瘤中表達(dá)增加,是癌癥診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)的潛在標(biāo)志物

.膠質(zhì)瘤中LINC01426高表達(dá)具有腫瘤啟動(dòng)子作用,敲除LINC01426可抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡

.然而LINC01426在胃癌中表達(dá)和功能并不清楚.序列分析顯示,miR-153-5p是LINC01426的潛在靶基因.miR-153-5p已被證實(shí)在肝癌中具有抑癌作用,lncRNA 位于細(xì)胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反義RNA(ANRIL)通過(guò)下調(diào)miR-153-5p促進(jìn)肝癌細(xì)胞遷移,減少細(xì)胞凋亡

.但LINC01426是否靶向miR-153-5p參與胃癌進(jìn)展仍有待研究.本研究主要分析了LINC01426、miR-153-5p在胃癌組織、細(xì)胞中表達(dá)水平,探討了其與胃癌細(xì)胞增殖、遷移侵襲的影響以及二者的相互作用,現(xiàn)報(bào)道如下.

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 一般資料:選擇2017-01/2019-01期間于我院確診并接受手術(shù)治療的57例原發(fā)性胃癌患者.其中男性36例,女性21例,年齡在45歲-72歲之間,中位年齡58歲.本研究經(jīng)醫(yī)院研究倫理委員會(huì)批準(zhǔn),并由每位患者在術(shù)前簽署書面知情同意書.分離癌組織和癌旁組織(鄰近的正常胃粘膜組織)立即置于液氮中冷凍,隨后保存于-80 ℃超低溫冰箱.

1.1.2 細(xì)胞和試劑:胃癌細(xì)胞系SNU-1、AGS、HS-746T、正常胃粘膜細(xì)胞GES1購(gòu)自武漢普諾賽生命科技公司;LINC01426小干擾RNA(si-LINC01426)、miR-153-5p模擬物(mimics)、miR-153-5p抑制物(anti-miR-153-5p)、LINC01426過(guò)表達(dá)載體(pcDNA-LINC01426)以及各自對(duì)照、雙熒光素酶載體購(gòu)自上海吉瑪制藥公司;TRIzol試劑、ReverTra Ace qPCR逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR qPCR Mix購(gòu)自上海東洋紡生物公司;噻唑藍(lán)(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)試劑盒購(gòu)于北京索萊寶生物;Transwell小室和基質(zhì)膠購(gòu)于北京優(yōu)尼康生物;兔抗人細(xì)胞周期素D1(CyclinD1)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)單克隆抗體以山羊抗兔IgG二抗購(gòu)于上海碧云生物公司.

JONES?&?SHIPMAN?10 精密外圓磨床的誕生得到了哈挺全球各個(gè)部門的支持與幫助。哈挺亞洲區(qū)總裁張靜娟女士在新品發(fā)布會(huì)中說(shuō)道：“在近30年的時(shí)間中，哈挺的產(chǎn)品遍布全球，隨著市場(chǎng)的改變與升級(jí)發(fā)展，哈挺也開(kāi)啟了新的征程，就是‘中國(guó)造’。”而哈挺本次發(fā)布的JONES?&?SHIPMAN?10精密外圓磨床正是“中國(guó)造”的典型代表產(chǎn)品。

2.4 過(guò)表達(dá)miR-153-5p對(duì)SNU-1細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響 miR-153-5p組SNU-1細(xì)胞miR-153-5p表達(dá)量顯著高于miR-NC組(

＜0.05),CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表達(dá)量、細(xì)胞活力、細(xì)胞遷移和侵襲數(shù)量顯著低于miR-NC組(

＜0.05),見(jiàn)表4和圖3.

從管理要素投入來(lái)看，冗余率超過(guò)10%的3家機(jī)構(gòu)與運(yùn)營(yíng)投入的一致，其中最高的仍然是機(jī)構(gòu)16，為22.14%，最低的是機(jī)構(gòu)1，為6.17%。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組:取1×10

個(gè)對(duì)數(shù)期SNU-1細(xì)胞在6孔板中培養(yǎng)直到細(xì)胞50%融合時(shí),將待轉(zhuǎn)染序列片段、載體分別用Lipofectamine 3000試劑轉(zhuǎn)染到SNU-1細(xì)胞中.根據(jù)轉(zhuǎn)染物不同分為對(duì)照(NC)組、si-NC組、si-LINC01426組、miR-NC組、miR-153-5p組、anti-miRNC組、anti-miR-153-5p組、si-LINC01426+anti-miRNC組、si-LINC01426+anti-miR-153-5p組.

1.2.3 RT-qPCR檢測(cè)LINC01426、miR-153-5p表達(dá)量:TRIzol試劑從胃癌組織、細(xì)胞、癌旁組織、GES1細(xì)胞中提取總RNA.取200 ng RNA利用ReverTra Ace qPCR逆轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA,以β-actin和U6基因作為內(nèi)源性參照,用SYBR qPCR Mix進(jìn)行RT-qPCR檢測(cè),2

法分析LINC01426和miR-153-5p相對(duì)表達(dá)量.Linc01426上游引物5’-CGCACCCAGATACTTTTCGT-3’,下游引物5’-GCCGTTGAGGTTGTCGTAAT-3’;β-actin上游引物5’-ACTGCCGCATCCTCTTCCT-3’,下游引物5’-TCAACGTCACACTTCATGATGGA-3’;miR-153-5p上游引物5’-TGCATAGTCACAAAAGTGATCCTC-3’,下游引物5’-CTCAACTGGTGTCGTGGAGTC-3’;U6上游引物5’-CTCGCTTCGGCAGCACAT-3’,下游引物5’-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3’.

2.1 胃癌組織中LINC01426、miR-153-5p的表達(dá)水平胃癌組織組織中LINC01426表達(dá)量顯著高于癌旁組織(

＜0.05),miR-153-5p表達(dá)量顯著低于癌旁組織(

＜0.05).Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示,胃癌組織中LINC01426和miR-153-5p的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(

=-0.828,

＜0.05),見(jiàn)圖1、表1.

1.2.5 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遷移和侵襲:Transwell遷移實(shí)驗(yàn)中,用不含血清的培養(yǎng)基重懸轉(zhuǎn)染48 h細(xì)胞,在上室加入200 μL(5×10

個(gè)細(xì)胞),在下室加入600 μL含10%胎牛血清培養(yǎng)液.37 ℃孵育24 h后,刮去膜上表面細(xì)胞,95%乙醇固定下表面遷移細(xì)胞,0.1%結(jié)晶紫染色30 min.侵襲實(shí)驗(yàn)時(shí)采用包被基質(zhì)膠的Transwell小室,其他步驟與遷移實(shí)驗(yàn)一致.細(xì)胞遷移或侵襲數(shù)量以顯微鏡下隨機(jī)選擇的5個(gè)視野的細(xì)胞數(shù)均值表示.

本研究數(shù)據(jù)來(lái)源于 2000—2017年全國(guó)范圍內(nèi)部分城市降塵重金屬的研究結(jié)果，所收集的數(shù)據(jù)涉及工業(yè)區(qū)和非工業(yè)區(qū)，為避免數(shù)據(jù)來(lái)源單一化，工業(yè)區(qū)包括礦區(qū)和冶煉區(qū)；非工業(yè)區(qū)包括商業(yè)區(qū)、文教區(qū)、居住區(qū)、交通區(qū)等，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表1、表2。

1.2.6 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn):雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)從測(cè)定熒光素酶活性.合成含有miR-153-5p結(jié)合位點(diǎn)的野生型或突變型LINC01426序列,將其插入pmir-GLO構(gòu)建成野生型(wild type,WT)或突變型(mutant,MUT)LINC01426雙熒光素酶載體,該步驟由上海吉瑪制藥公司完成.用Lipofectamine 2000將WT/MUT-LINC01426分別與miR-153-5p mimics、miR-NC共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,48 h后測(cè)定熒光素酶活性.相對(duì)熒光素酶活性以螢火蟲(chóng)熒光素酶活性和海腎熒光素酶活性的比值表示.

1.2.7 蛋白質(zhì)印跡法(western blot)分析CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表達(dá):用放射免疫沉淀裂解液裂解蛋白,用二喹啉甲酸法測(cè)定蛋白濃度.用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白,并轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜.膜封閉后,置于1:1000稀釋的細(xì)胞周期蛋白D1(CyclinD1)、MMP2、MMP9一抗中4 ℃孵育過(guò)夜,再置于辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗中室溫下孵育1 h.化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)蛋白條帶,Image J軟件分析灰度值,目的蛋白相對(duì)表達(dá)量以對(duì)應(yīng)蛋白和內(nèi)參灰度值比值表示.

2.5 LINC01426靶向調(diào)控miR-153-5p表達(dá) 通過(guò)LncBase Predicted v.2在線預(yù)測(cè)LINC01426靶基因顯示,miR-153-5p與LINC01426序列存在連續(xù)結(jié)合位點(diǎn),見(jiàn)圖4.miR-153-5p mimics和WT-LINC01426共轉(zhuǎn)染組SNU-1細(xì)胞相對(duì)熒光素酶活性顯著低于miR-NC和WT-LINC01426共轉(zhuǎn)染組(

＜0.05),而miR-153-5p mimics和MUT-LINC01426共轉(zhuǎn)染組SNU-1細(xì)胞相對(duì)熒光素酶活性與MUT-LINC01426共轉(zhuǎn)染組比較無(wú)顯著變化,見(jiàn)表5.si-LINC01426組SNU-1細(xì)胞miR-153-5p表達(dá)量顯著高于si-NC組(

＜0.05);pcDNALINC01426組SNU-1細(xì)胞miR-153-5p表達(dá)量顯著低于pcDNA-NC組(

＜0.05),見(jiàn)表6.

2 結(jié)果

1.2.4 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活力:將轉(zhuǎn)染48 h細(xì)胞接種于96孔板(200 μL,3×10

細(xì)胞/孔),每孔加入10 μL的MTT(質(zhì)量濃度為5 mg/mL)繼續(xù)孵育4 h,隨后加入150 μL的二甲基亞砜溶解沉淀.用酶標(biāo)儀在490 nm處測(cè)定吸光度(A).

2.2 胃癌細(xì)胞系中LINC01426和miR-153-5p表達(dá)情況胃癌細(xì)胞系SNU-1、AGS、HS-746T中LINC01426表達(dá)量顯著高于人正常胃上皮細(xì)胞GES1(

＜0.05),miR-153-5p表達(dá)量顯著低于GES1細(xì)胞(

＜0.05),見(jiàn)表2.

開(kāi)展管理創(chuàng)新活動(dòng)，首先要明確現(xiàn)階段工程管理中存在的具體問(wèn)題，只有找到問(wèn)題所在，才能有針對(duì)性地開(kāi)展創(chuàng)新活動(dòng)。問(wèn)題研究工作需要廣大工程管理人員積極配合，相關(guān)管理工作人員要對(duì)自身管理工作進(jìn)行反思，實(shí)事求是地記錄自身在管理工作中遇到的問(wèn)題。對(duì)此，工程管理人員需要做好工作日志的記錄，并按照相關(guān)規(guī)定進(jìn)行匯報(bào)。管理小組應(yīng)定期開(kāi)展內(nèi)部問(wèn)題自查自糾會(huì)議，對(duì)個(gè)人工作中遇到的各種問(wèn)題進(jìn)行總結(jié)。小組內(nèi)部成員要相互溝通交流，對(duì)出現(xiàn)的各種問(wèn)題進(jìn)行探討，并提出解決思路，以供他人參考。

2.3 抑制LINC01426表達(dá)對(duì)SNU-1細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響 si-LINC01426組SNU-1細(xì)胞LINC01426表達(dá)量、CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表達(dá)量、細(xì)胞活力、細(xì)胞遷移和侵襲數(shù)量顯著低于si-NC組,見(jiàn)表3和圖2.

“詩(shī)史”一詞由來(lái)已久，最早見(jiàn)于唐代孟棨的《本事詩(shī)》?！侗臼略?shī)》云：“杜逢祿山之亂，流離隴蜀，畢陳于詩(shī)，推見(jiàn)至隱，殆無(wú)遺事，故當(dāng)號(hào)為‘詩(shī)史’?！盵2]1656杜甫的詩(shī)歌之所以被稱為“詩(shī)史”，主要原因是它們具有與史書同樣的認(rèn)識(shí)價(jià)值，甚至提供了比歷史敘事更為具體、生動(dòng)的社會(huì)場(chǎng)景和生活畫面。清人周景益評(píng)價(jià)管世銘的詩(shī)歌說(shuō)：“其發(fā)為詩(shī)也如其人，朗健深厚，有上下古今之識(shí)，大都出入于杜、韓、蘇三家而不名一體，尤愛(ài)其格律最細(xì)。每詠一人、述一事，典瞻精富，無(wú)可移掇，足當(dāng)詩(shī)史之目?！盵3]5總體來(lái)說(shuō)，管世銘的詩(shī)歌創(chuàng)作取法多家，內(nèi)容翔實(shí)，具有多重詩(shī)史價(jià)值。

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng):SNU-1、AGS、HS-746T細(xì)胞分別采用RPMI-1640、ham’s-F12、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素)培養(yǎng).培養(yǎng)箱條件為37 ℃、CO

體積分?jǐn)?shù)5%.換液頻率為每周3次.傳代比例為1:3.

實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù)3次,每次設(shè)置3個(gè)平行.數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示,使用SPSS 20.0軟件表示進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用單因素方差分析、SNk-

檢驗(yàn)分析多組間差異,

檢驗(yàn)分析兩組間差異.

＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2.6 抑制miR-153-5p表達(dá)可以逆轉(zhuǎn)抑制LINC01426表達(dá)對(duì)SNU-1細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響 anti-miR-153-5p組SNU-1細(xì)胞miR-153-5p表達(dá)量顯著低于antimiR-NC組(

＜0.05),CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表達(dá)量、細(xì)胞活力、細(xì)胞遷移和侵襲數(shù)量顯著高于anti-miRNC組(

＜0.05);si-LINC01426+anti-miR-153-5p組SNU-1細(xì)胞miR-153-5p表達(dá)量顯著低于si-LINC01426+antimiR-NC組(

＜0.05),CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表達(dá)量、細(xì)胞活力、細(xì)胞遷移和侵襲數(shù)量顯著高于si-LINC01426+anti-miR-NC組(

＜0.05),見(jiàn)表7和圖5.

3 討論

最新全球癌癥流行病學(xué)調(diào)查顯示,胃癌的發(fā)病率、死亡率分別高居惡性腫瘤排行榜第四位、第三位,其仍是一種全球性健康問(wèn)題

.探討與胃癌進(jìn)展相關(guān)的lncRNA和miRNA有望為胃癌診療提供有效靶點(diǎn).

本研究首先探討了LINC01426在胃癌中的作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)胃癌組織、細(xì)胞中LINC01426表達(dá)量顯著升高,選取SNU-1細(xì)胞進(jìn)行功能缺失分析發(fā)現(xiàn),通過(guò)轉(zhuǎn)染si-LINC01426抑制LINC01426表達(dá)顯著降低細(xì)胞活力、遷移和侵襲能力,提示在胃癌中LINC01426作為致癌基因發(fā)揮作用.CyclinD1是細(xì)胞增殖正向調(diào)節(jié)蛋白,研究指出下調(diào)CyclinD1表達(dá)可抑制細(xì)胞從G1到S期的轉(zhuǎn)變對(duì)胃癌細(xì)胞具有抗增殖作用

.MMP2和MMP9作為最重要的金屬蛋白酶,其通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)的各種成分促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移.本研究結(jié)果顯示,抑制LINC01426表達(dá)降低了SNU-1細(xì)胞中CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白,這進(jìn)一步說(shuō)明抑制LINC01426對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲具有抑制作用

.與本研究發(fā)現(xiàn)類似,Jiang等

報(bào)道透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌中LINC01426表達(dá)上調(diào),LINC01426缺失抑制了癌細(xì)胞的增殖和遷移.Cao等

證實(shí)惡性膠質(zhì)瘤中LINC01426表達(dá)增加能夠促進(jìn)癌細(xì)胞增殖和生長(zhǎng),促進(jìn)惡性膠質(zhì)瘤進(jìn)展.這些研究表明LINC01426在胃癌進(jìn)展中具有致癌作用,抑制LINC01426表達(dá)通過(guò)抑制胃癌細(xì)胞惡性增殖、遷移和侵襲能例進(jìn)而抑制胃癌進(jìn)展.

（3）在一個(gè)項(xiàng)目工程中的計(jì)量工作是十分煩瑣的。計(jì)量工作人員就可以利用計(jì)算機(jī)等設(shè)備對(duì)工程計(jì)量進(jìn)行整理和計(jì)算。利用計(jì)算機(jī)的各種軟件可以完成路橋建造中的一些復(fù)雜的問(wèn)題。比如現(xiàn)在有利用計(jì)算機(jī)模擬出這個(gè)路橋的整體結(jié)構(gòu)的3D圖像，這樣可以更加直觀地看出項(xiàng)目的整個(gè)完成過(guò)程。利用計(jì)算機(jī)對(duì)賬目進(jìn)行管理，可以把那些細(xì)小的項(xiàng)目費(fèi)用做得更好，也可以對(duì)項(xiàng)目進(jìn)行更好地管理，提高工作效率。

近年來(lái),miR-153-5p被證實(shí)為一種人類癌癥抑癌因子.研究指出miR-153-5p低表達(dá)與急性髓性白血病細(xì)胞阿霉素耐藥、結(jié)腸癌細(xì)胞的奧沙利鉑耐藥相關(guān)

.miR-153-5p通過(guò)誘導(dǎo)G2-M期阻滯還可增強(qiáng)紫杉醇對(duì)耐藥三陰性乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移抑制作用,逆轉(zhuǎn)紫杉醇耐藥

.食管癌患者血清、食管癌組織中miR-153-5p表達(dá)降低,miR-153-5p通過(guò)靶向WT1參與食管癌細(xì)胞增殖和侵襲調(diào)控

.本研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織、細(xì)胞中miR-153-5p表達(dá)量顯著降低,通過(guò)轉(zhuǎn)染miR-153-5p mimics進(jìn)行功能獲得實(shí)驗(yàn)顯示,過(guò)表達(dá)miR-153-5p顯著下調(diào)CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表達(dá),并降低SNU-1細(xì)胞活力、遷移和侵襲能力,與上述國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道基本吻合.由于lncRNA通常通過(guò)充當(dāng)miRNA的分子海綿發(fā)揮作用,且miR-153-5p與LINC01426存在結(jié)合位點(diǎn)于是推測(cè)LINC01426可能通過(guò)靶向miR-153-5p參與調(diào)控胃癌進(jìn)展,并通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)和RT-qPCR分析證實(shí)LINC01426對(duì)miR-153-5p的靶向負(fù)調(diào)控作用.深入分析顯示,抑制miR-153-5p表達(dá)顯著減弱了抑制LINC01426表達(dá)對(duì)SNU-1細(xì)胞增殖、遷移侵襲以及CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表達(dá)的抑制作用,這進(jìn)一步說(shuō)明靶向負(fù)調(diào)控miR-153-5p是LINC01426參與胃癌進(jìn)展的重要機(jī)制.

4 結(jié)論

綜上所述,LINC01426在胃組織和細(xì)胞系中上調(diào),抑制LINC01426通過(guò)負(fù)調(diào)控miR-153-5p顯著抑制胃癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移,這可能為胃癌治療提供了潛在有效靶點(diǎn).

正式試驗(yàn)后，每?jī)芍苓M(jìn)行一次血樣采集。每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取一只采血5 ml，分離血清，用于血清生化指標(biāo)和免疫功能的測(cè)定。

1.2 方法

胃癌發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,其中癌基因和抑癌基因表達(dá)失調(diào)是其進(jìn)展的關(guān)鍵因素.miR-153-5p已被證實(shí)在肝癌中具有抑癌作用,lncRNA位于細(xì)胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反義RNA(ANRIL)促進(jìn)肝癌細(xì)胞遷移.但LINC01426是否靶向miR-153-5p參與胃癌進(jìn)展仍有待研究.

通過(guò)分析LINC01426、miR-153-5p在胃癌組織、細(xì)胞中表達(dá)水平,探討其與胃癌細(xì)胞增殖、遷移侵襲的影響以及二者的相互作用,以期為胃癌患者發(fā)病機(jī)制提供參考依據(jù)和研究方向.

探討長(zhǎng)基因間非編碼RNA 01426(LINC01426)是否靶向miR-153-5p影響胃癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲.

土壤樣品測(cè)試過(guò)程中采用加標(biāo)和平行樣進(jìn)行質(zhì)量控制，測(cè)定結(jié)果均在誤差允許范圍內(nèi)。所有樣品5種形態(tài)含量之和與直接測(cè)定的總量進(jìn)行對(duì)比，回收率為92%～112%，滿足元素形態(tài)分析要求。

實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)分析LINC01426和miR-153-5p在胃癌組織、癌旁組織、胃癌細(xì)胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)和正常胃上皮細(xì)胞(GES1)中表達(dá)量.Pearson相關(guān)性分析胃癌組織中LINC01426和miR-153-5p表達(dá)的相關(guān)性.生物信息學(xué)在線分析、雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)、RTqPCR分析和證實(shí)LINC01426對(duì)miR-153-5p調(diào)控作用.噻唑藍(lán)(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)分析LINC01426和miR-153-5p表達(dá)對(duì)SNU-1細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響.

胃癌組織、細(xì)胞中LINC01426表達(dá)量顯著高于癌旁組織和GES1細(xì)胞(

＜0.05),miR-153-5p表達(dá)量顯著高于癌旁組織和GES1細(xì)胞(

＜0.05).Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示,胃癌組織中LINC01426和miR-153-5p的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(

=-0.828,

＜0.05).LINC01426靶向結(jié)合并負(fù)調(diào)控miR-153-5p.抑制LINC01426表達(dá)或過(guò)表達(dá)miR-153-5p顯著降低SNU-1細(xì)胞活力、遷移和侵襲能力(

＜0.05),而抑制miR-153-5p表達(dá)顯著升高SNU-1細(xì)胞活力、遷移和侵襲能力(

＜0.05).抑制miR-153-5p表達(dá)顯著逆轉(zhuǎn)LINC01426抑制對(duì)SNU-1細(xì)胞活力、遷移和侵襲的影響(

＜0.05).

抑制LINC01426可阻礙胃癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移,這與LINC01426負(fù)調(diào)控miR-153-5p有關(guān).

高校創(chuàng)新能力的提升會(huì)受到各種因素的影響，如高校的辦學(xué)層次和所有制等。［6］在所調(diào)查的黑龍江省高校中，辦學(xué)層次為本科及本科以上視為1，其余為0;辦學(xué)性質(zhì)為公辦的視為1，其他性質(zhì)的視為0;辦學(xué)年齡10年及以上的視為1，其他視為0。

詞義的發(fā)展演變是社會(huì)不斷發(fā)展以及人們的認(rèn)識(shí)活動(dòng)不斷進(jìn)步的結(jié)果，“東西”一詞由方位詞演變至今，不僅表示物品也可用于表示人，這是整個(gè)語(yǔ)言系統(tǒng)中詞義發(fā)展演變的冰山一角，更多常用詞意義的發(fā)展演變，值得我們繼續(xù)探求。

本研究證實(shí)LINC01426在胃癌進(jìn)展中具有致癌作用,抑制LINC01426表達(dá)通過(guò)抑制胃癌細(xì)胞惡性增殖、遷移和侵襲能例進(jìn)而抑制胃癌進(jìn)展,miR-153-5p已被證實(shí)在肝癌中具有抑癌作用,但LINC01426是否靶向miR-153-5p參與胃癌進(jìn)展仍有待研究,建議開(kāi)展更大規(guī)模隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)對(duì)本研究加以證實(shí).

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