炒赤芍質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

占麗琴 方磊 羅艷 孫輝 丁野

【摘 要】 目的：對(duì)炒赤芍進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。方法：建立炒赤芍的性狀、薄層色譜鑒別、含量測(cè)定方法，并按照《中國(guó)藥典》2015年版對(duì)水分、總灰分、浸出物等項(xiàng)目進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果：炒赤芍的薄層色譜中，在對(duì)照品及對(duì)照藥材相同的位置顯相應(yīng)的斑點(diǎn)。水分、總灰分、浸出物、含量測(cè)定的范圍分別為1.43%～8.85%、3.40%～11.80%、38.21%～54.39%、0.8%～3.7%。結(jié)論：該研究可為炒赤芍質(zhì)量控制提供依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 炒赤芍;含量測(cè)定;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

【中圖分類號(hào)】R284?? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A??? 【文章編號(hào)】1007-8517（2022）12-0054-04

Study on Quality Standard of Chaochishao

ZHAN Liqin1，2 FANG Lei1，2 LUO Yan1，2 SUN Hui1，2 DING Ye1，2*

1.Hunan Institute for Drug Control（Hunan Center for Pharmaceutical Excipients Control）， Changsha 410001，China;

2.Hunan Engineering &Technology Research Center for Pharmaceutical Quality Evaluation，Changsha 410001，China

Abstract：Objective To study the quality standard of Chaochishao. Methods The characteristics， TLC identification and content determination methods of Chaochishao were established， and the water content， total ash content and extract content were determined according to Chinese Pharmacopoeia 2015 edition.Results In TLC of? Chaochishao， corresponding spots were found in the same position of reference substance and reference medicinal material. The ranges of moisture， total ash， extract and content were 1.43%-8.85%， 3.40%-11.80%， 38.21%-54.39% and 0.8%-3.7%， respectively. Conclusion This study can provide the basis for quality control of? Chaochishao.

Chaochishao; Content Determination; Quality Standard

赤芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍Paeonia veitchii Lynch的干燥根，味苦、微寒;有清熱涼血、散瘀止痛的功效[1]，臨床常用的赤芍品規(guī)主要有生赤芍、炒赤芍和酒赤芍等。目前報(bào)道多為赤芍的化學(xué)成分及藥理研究，其炮制品炒赤芍的相關(guān)研究較少[2-3]。本試驗(yàn)進(jìn)行薄層鑒別水分、總灰分、浸出物、含量測(cè)定研究，為炒赤芍的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立及質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 島津LC20-AT 高效液相色譜儀（檢測(cè)器DAD）、色譜柱 Welch LP C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）、色譜工作站? Empower、Lecia DM2500。

1.2 材料 芍藥苷對(duì)照品（批號(hào)：110736-201842，純度：97.4%）赤芍對(duì)照藥材（批號(hào)：121093-201804）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院。

實(shí)驗(yàn)用樣品共15批次（批號(hào)：190501、190523、19100722-1、19100722-2、19100722-3、Y20191001、Y20191002、Y20191003、2019100042、0191005、201910006、2019050081、2019102125、2019102126、2019102127），來(lái)自不同生產(chǎn)企業(yè)及使用單位，產(chǎn)地為安徽及內(nèi)蒙古，經(jīng)湖南省藥品檢驗(yàn)研究院中藥所羅艷副主任中藥師鑒定為炒赤芍。部分樣品如圖1所示。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀 為類圓形厚片，外表皮棕褐色。切面微黃色，偶有焦斑，皮部窄，木部放射狀紋理明顯，有的有裂隙，質(zhì)硬而脆，氣微香，味微苦、酸澀。

2.2 薄層鑒別 取本品粉末0.5 g，加乙醇10 mL，振搖5 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖? mL使其溶解，作為供試品溶液。另取赤芍對(duì)照藥材0.5 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL含2 mg溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2015年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液各10 μL，對(duì)照品溶液4 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)。結(jié)果如圖2所示。

2.3 水分、總灰分、水溶性浸出物 均按照《中國(guó)藥典》2015年版相關(guān)規(guī)定測(cè)定。結(jié)果見表1。

2.4 含量測(cè)定

2.4.1 溶液的制備

2.4.1.1 對(duì)照品溶液 精密稱取芍藥苷對(duì)照品10.24 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品儲(chǔ)備液（199.4752 μg/mL）。精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液適量，加甲醇稀釋成濃度99.7 μg/mL、48.7 μg/mL的對(duì)照品溶液。

2.4.1.2 供試品溶液 取本品粗粉約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定重量，浸泡4 h，超聲處理（300 W，30 kHz）20 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，取續(xù)濾液，即得。

2.4.2 色譜條件 色譜柱：Welch LP C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動(dòng)相：甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液（30∶70）;流速1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm;柱溫30 ℃。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)，不低于3000。如圖3、圖4所示。

2.4.3 線性關(guān)系考察 精密吸取濃度為1.0508、0.4203、0.1051、0.0420、0.0841 mg/mL的對(duì)照品溶液10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為（ng）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其回歸方程為：y=1202x+22554，r=1。結(jié)果表明：芍藥苷對(duì)照品在168.1～10507.5 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。結(jié)果見表2、如圖5所示。

2.4.4 精密度試驗(yàn) 取同一炒赤芍供試品溶液（批號(hào)：2019102125），連續(xù)進(jìn)樣6次，每次10 μL，記錄色譜峰面積，計(jì)算RSD（n=6）為0.6%，表明儀器精密度良好。

2.4.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一炒赤芍供試品溶液（批號(hào)：2019102125），分別于配制后的0、4、8、12、24 h，精密吸取10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，記錄色譜峰面積，計(jì)算RSD（n=6）為0.4%。

2.4.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一炒赤芍供試品溶液（批號(hào)：2019102125），依法制備6份供試品溶液，測(cè)定并計(jì)算，結(jié)果分別為0.81%、0.83%、0.82%、0.81%、0.82%，RSD為0.9%。

2.4.7 回收率試驗(yàn) 取同一炒赤芍供試品溶液（批號(hào)：2019102125）（含芍藥苷2.0 mg）約0.25 g（6份），精密稱定，置錐形瓶中，精密加入濃度為0.0997 mg/mL的芍藥苷對(duì)照品適量（見表3），依法制備供試品溶液，測(cè)定并計(jì)算，結(jié)果平均加樣回收率為100.5%。

2.4.8 樣品含量測(cè)定結(jié)果 對(duì)收集的15批炒赤芍進(jìn)行了含量測(cè)定。結(jié)果見表4。

3 討論

3.1 薄層鑒別展開劑的考察 實(shí)驗(yàn)中的薄層色譜鑒別增加赤芍對(duì)照藥材做對(duì)照，用二氯甲烷替代傳統(tǒng)的三氯甲烷做展開劑，取得較好薄層色譜效果，保證方法專屬性亦兼顧了環(huán)保。

3.2 流動(dòng)相的考察 含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)中對(duì)流動(dòng)相比例進(jìn)行考察，當(dāng)甲醇-0.05 moL/L磷酸二氫鉀溶液（35∶65）時(shí)供試品的芍藥苷峰存在干擾。當(dāng)流動(dòng)相甲醇-0.05 moL/L磷酸二氫鉀溶液比例改為30∶70時(shí)，測(cè)定芍藥苷峰分離效果好。

3.3 含量測(cè)定結(jié)果的討論 該研究中15批次炒赤芍的芍藥苷含量平均值為2.4%，而含量測(cè)定結(jié)果顯示（批號(hào)：2019102125、2019102126、2019102127）的芍藥苷含量均小于1.0%，結(jié)合調(diào)研及性狀，樣品顏色均為棕黃色，考慮其炒制過(guò)程中炮制稍過(guò)度，影響了芍藥苷的含量。

本文對(duì)15批炒赤芍質(zhì)量進(jìn)行了包括性狀、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、浸出物和含量測(cè)定等項(xiàng)目的考察，結(jié)果顯示方法可行、操作性強(qiáng)，可以作為炒赤芍的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家藥典委員會(huì)編. 中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：376-377.

[2]孫輯凱，張梅娟，張宏蓮，等. UPLC-Q-Trip-MS /MS 法測(cè)定赤芍中 4 種成分的含量[J].化學(xué)試劑，2021，43（2）：216-219.

[3]鐘海蓉，張紹山，肖芳，等. 基于UPLC法測(cè)定指標(biāo)成分結(jié)合指紋圖譜評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地川赤芍不同部位的質(zhì)量[J].中草藥，2021，52（7）：2062-2071.

（收稿日期：2021-10-26 編輯：陶希睿）