雷凱文 吳 昊 王 茜,2 柏 雪,2 黃艷玲,2*

(1.西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，成都610041；2.青藏高原動(dòng)物遺傳資源保護(hù)與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，成都610041)

鐵是動(dòng)物生命活動(dòng)過(guò)程中必不可少的微量元素，在動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮重要功能，如參與血紅蛋白和肌紅蛋白的合成，作為許多酶的組分參與能量代謝、DNA合成及細(xì)胞免疫應(yīng)答等[1-2]。動(dòng)物缺鐵會(huì)導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生缺鐵性貧血，影響機(jī)體免疫，造成機(jī)體生理功能紊亂，嚴(yán)重影響動(dòng)物的健康生長(zhǎng)。NRC(1994)[3]和《黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)需要量》(NY/T 3645—2020)[4]推薦肉雞飼糧中鐵適宜水平為80 mg/kg。肉雞常用玉米-豆粕型飼糧中飼料原料鐵含量較高，且變異系數(shù)大[5]。礦物質(zhì)原料中鐵污染嚴(yán)重，其中磷酸二氫鈣中的鐵含量為1 000～5 800 mg/kg[6]。飼料加工過(guò)程中也存在不同程度的鐵污染，如粉碎機(jī)、攪拌機(jī)及配料工具等鐵制器械加工過(guò)程中有不同程度損耗。同時(shí)，在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，一般沒(méi)有考慮基礎(chǔ)飼糧中所含的鐵，直接按照NRC(1994)[3]和《黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)需要量》(NY/T 3645—2020)[4]添加，這意味著飼糧中的實(shí)際鐵含量可能遠(yuǎn)高于肉雞的需要量。而過(guò)量的鐵會(huì)產(chǎn)生氧衍生的自由基如羥基自由基和其他活性氧，引起細(xì)胞氧化應(yīng)激，造成脂質(zhì)過(guò)氧化[7-8]，從而影響肉雞正常生長(zhǎng)。

研究表明，愛(ài)拔益加(AA)肉雞(飼糧鐵含量566.85 mg/kg)和羅斯(Ross)肉雞(飼糧鐵含量588～988 mg/kg)飼喂高鐵飼糧后，其平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均顯著降低[9-11]。Gou等[12]研究發(fā)現(xiàn)，高鐵飼糧(鐵含量超過(guò)908 mg/kg)會(huì)顯著提高嶺南黃羽肉雞空腸丙二醛(MDA)含量，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，但對(duì)ADG和ADFI無(wú)顯著影響。Chandravathy等[13]在基礎(chǔ)飼糧中添加1 930 mg/kg鐵，發(fā)現(xiàn)科寶肉雞肝臟MDA含量顯著提高，肝臟谷胱甘肽(GSH)含量顯著降低。此外，駱婉秋[14]研究發(fā)現(xiàn)，高鐵飼糧(飼糧鐵含量415 mg/kg)會(huì)提高Ross肉雞血清和肝臟MDA含量，且當(dāng)飼糧鐵含量達(dá)到607 mg/kg時(shí)，肉雞ADG和ADFI顯著降低，并且脂代謝相關(guān)酶活性降低，脂質(zhì)代謝受到影響，腹部脂肪重量也出現(xiàn)降低。以上研究結(jié)果表明，高鐵飼糧可能會(huì)降低肉雞生長(zhǎng)性能和抗氧化能力，并影響腹脂沉積。我國(guó)是世界第二大肉雞生產(chǎn)國(guó)，每年上市的黃羽肉雞的數(shù)量與快大型肉雞一樣，大概有40億只[12]，但現(xiàn)有文獻(xiàn)中關(guān)于飼糧鐵添加量對(duì)肉雞影響的研究報(bào)道主要集中在白羽肉雞上，對(duì)黃羽肉雞的研究報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)旨在探究飼糧鐵添加量對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化能力和屠宰性能的影響，為黃羽肉雞生產(chǎn)中合理使用鐵制劑提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，設(shè)置5個(gè)鐵添加量，分別為0(對(duì)照)、20、80、320和1 280 mg/kg，共5個(gè)組，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和飼糧

選用400只1日齡黃羽肉公雛雞，按上述試驗(yàn)設(shè)計(jì)隨機(jī)分為5個(gè)組，每組分別飼養(yǎng)于8個(gè)不銹鋼鍍塑籠中，每籠10只雞。試驗(yàn)期63 d。按《黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)需要量》(NY/T 3645—2020)[4]配制3個(gè)階段的基礎(chǔ)飼糧(其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，實(shí)測(cè)3個(gè)階段基礎(chǔ)飼糧中鐵含量分別為86.90、76.20和69.10 mg/kg)，為降低基礎(chǔ)飼糧鐵含量，飼糧中除硒和碘外，其他礦物質(zhì)添加劑均使用試劑級(jí)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，各試驗(yàn)組按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)在基礎(chǔ)飼糧中分別添加不同劑量的鐵[鐵來(lái)源于試劑級(jí)七水硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)]。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在華西希望集團(tuán)科學(xué)技術(shù)研究所進(jìn)行。試驗(yàn)開(kāi)始前對(duì)雞舍消毒。試驗(yàn)管理和常規(guī)免疫按《黃羽肉雞飼養(yǎng)管理技術(shù)流程》進(jìn)行。試驗(yàn)期間肉仔雞自由采食、飲水。

1.4 樣品采集及指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 飼糧樣品分析

飼糧樣品經(jīng)優(yōu)級(jí)純硝酸消化后，用火焰原子吸收光譜法(Contr AA 700，Analytik Jena，德國(guó))測(cè)定鈣、鐵含量；用凱氏定氮法測(cè)定飼糧粗蛋白質(zhì)含量。

1.4.2 生長(zhǎng)性能

每天觀(guān)察雞只狀況，記錄死淘雞只數(shù)量。于試驗(yàn)期第21、42和63天，以重復(fù)籠為單元稱(chēng)雞體重和剩料量，計(jì)算ADG、ADFI和料重比(F/G)。

1.4.3 血漿和肝臟抗氧化指標(biāo)

于試驗(yàn)期第63天，從每個(gè)重復(fù)籠中選擇1只接近平均體重的雞進(jìn)行翅靜脈采血于肝素鈉抗凝管中，860×g離心15 min，分離血漿后-80 ℃保存待測(cè)。雞只采血后進(jìn)行取樣，取0.5 g肝臟(左側(cè)，下方尖頭部分)組織樣品，磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗，濾紙吸干，錫箔紙包好后，于-196 ℃液氮速凍后，置于-80 ℃低溫冰箱保存。檢測(cè)時(shí)取出-80 ℃保存的肝臟樣品于冰上解凍，按1∶9(g∶mL)的質(zhì)量體積比加入預(yù)冷的生理鹽水及研磨珠，用高通量研磨機(jī)研磨后，4 ℃、3 000 r/min離心10 min，取上清待測(cè)。血漿和肝臟谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和MDA含量均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)，具體步驟參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.4.4 屠宰性能

于試驗(yàn)期第63天，從每個(gè)組的每個(gè)重復(fù)籠中選擇1只接近平均體重的雞(禁食12 h，但不禁水)，然后稱(chēng)活體重。采用頸靜脈放血法屠宰，屠宰后分割肉雞并稱(chēng)重，計(jì)算屠宰率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

本試驗(yàn)以重復(fù)籠為單位，所有數(shù)據(jù)均采用SAS 9.4中一般線(xiàn)性模型(GLM)程序進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，以最小顯著差異(LSD)法比較各組間的差異顯著性；采用正交多項(xiàng)式(orthogonal polynomials)分析各指標(biāo)隨飼糧鐵添加量的線(xiàn)性或二次曲線(xiàn)變化趨勢(shì)；以P<0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧鐵添加量對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，黃羽肉雞各階段ADG和ADFI均隨飼糧鐵添加量的提高而線(xiàn)性降低(P<0.05)，其中1 280 mg/kg添加組各階段ADG(22～42日齡對(duì)照組除外)和ADFI均顯著低于其他各組(P<0.05)；但與對(duì)照組相比，飼糧添加20 mg/kg鐵顯著提高了1～21日齡ADG(P<0.05)；飼糧鐵添加量對(duì)各階段F/G和死淘率均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

2.2 飼糧鐵添加量對(duì)黃羽肉雞抗氧化能力的影響

由表3可知，63日齡黃羽肉雞血漿和肝臟GSH-Px和T-SOD活性均未受飼糧鐵添加量的影響(P>0.05)；但血漿和肝臟MDA含量均隨飼糧鐵添加量的提高而線(xiàn)性提高(P<0.05)，當(dāng)鐵添加量提高至1 280 mg/kg時(shí)，血漿和肝臟MDA含量顯著高于除320 mg/kg添加組外的其他各組(P<0.05)。

2.3 飼糧鐵添加量對(duì)黃羽肉雞屠宰性能的影響

由表4可知，飼糧鐵添加量對(duì)63日齡黃羽肉雞屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均無(wú)顯著影響(P>0.05)；而腹脂率隨飼糧鐵添加量的提高而線(xiàn)性降低(P<0.05)，與對(duì)照組相比，當(dāng)鐵添加量提高至80 mg/kg及以上時(shí)，腹脂率顯著降低(P<0.05)。

3 討 論

3.1 飼糧鐵添加量對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

大多數(shù)研究表明，肉雞生長(zhǎng)前期飼糧中添加鐵可改善其生長(zhǎng)性能。Ma等[15]研究表明，在1～21日齡AA肉雞基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為66.7 mg/kg)中添加20、40、60、80、100和120 mg/kg鐵時(shí)，AA肉雞ADG隨飼糧鐵添加量的提高呈先升高后下降的二次曲線(xiàn)變化，當(dāng)鐵添加量為60 mg/kg時(shí)，ADG達(dá)到最大值。楊柳[9]研究發(fā)現(xiàn)，在A(yíng)A肉雞基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為66.85 mg/kg)中添加100 mg/kg鐵可提高1～21日齡ADG和ADFI。與上述報(bào)道類(lèi)似，本試驗(yàn)結(jié)果表明，與不添加鐵相比，飼糧添加20 mg/kg鐵可顯著提高1～21日齡肉雞ADG，這可能與肉雞生長(zhǎng)前期對(duì)鐵的需求量較大有關(guān)。本試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為86.90 mg/kg，可能并不能滿(mǎn)足肉雞生長(zhǎng)前期對(duì)鐵的需求，添加一定量的鐵后改善了肉雞生長(zhǎng)性能。

采食量是影響家禽生長(zhǎng)的重要因素之一，在家禽生產(chǎn)過(guò)程中許多因素都會(huì)影響家禽采食，如氧化應(yīng)激引起采食量下降等問(wèn)題[16]。Cao等[10]研究表明，與不添加鐵的基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為188 mg/kg)相比，添加400、600和800 mg/kg鐵降低了1～21日齡Ross肉雞的ADG和ADFI，以14～21日齡最為明顯。楊柳[9]研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為66.85 mg/kg)中添加500 mg/kg鐵，會(huì)降低1～21日齡AA肉雞ADG和ADFI。鄒亞學(xué)等[11]在Ross肉雞基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為78 mg/kg)中添加100、250和500 mg/kg鐵，發(fā)現(xiàn)添加500 mg/kg鐵可顯著降低1～7日齡和8～14日齡Ross肉雞ADG。駱婉秋[14]也有類(lèi)似報(bào)道，與對(duì)照組相比(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為109 mg/kg)，添加500 mg/kg鐵會(huì)導(dǎo)致1～21日齡Ross肉雞ADG和ADFI降低。與上述報(bào)道類(lèi)似，本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加1 280 mg/kg鐵會(huì)降低黃羽肉雞各階段ADG和ADFI，這可能與高鐵造成機(jī)體氧化應(yīng)激，導(dǎo)致腸道氧化損傷有關(guān)[12,17]。研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物攝入過(guò)多的鐵會(huì)增加腸道等組織的鐵沉積[11]，并通過(guò)鐵催化反應(yīng)產(chǎn)生大量活性氧，攻擊多不飽和脂肪酸引起細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化[18]，導(dǎo)致十二指腸和空腸MDA含量增加，引起腸道炎癥并降低十二指腸、空腸絨毛高度[12,17]，影響腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，最終導(dǎo)致采食量和增重降低[19]。

3.2 飼糧鐵添加量對(duì)黃羽肉雞抗氧化能力的影響

動(dòng)物消耗氧氣產(chǎn)生能量過(guò)程中往往會(huì)伴隨著有害中間體的產(chǎn)生，但一般情況下會(huì)被體內(nèi)抗氧化酶所清除，以維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)[20]。鐵與許多酶和氧載體蛋白有關(guān)，具有調(diào)控機(jī)體抗氧化狀態(tài)的功能[18]。吳建設(shè)等[21]研究表明，在基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為47.03 mg/kg)中添加110 mg/kg鐵可顯著提高艾維茵肉雞肝臟GSH-Px活性，降低過(guò)氧化脂質(zhì)含量。馮國(guó)強(qiáng)等[22]在基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為78.56 mg/kg)中添加40、80、120和160 mg/kg甘氨酸亞鐵，發(fā)現(xiàn)添加120和160 mg/kg甘氨酸亞鐵可提高1～21日齡Ross肉雞血清超氧化物歧化酶(SOD)活性，并降低血清MDA含量。Sun等[23]也有類(lèi)似報(bào)道，AA肉雞血清SOD隨著飼糧(鐵含量90.31 mg/kg)甘氨酸鐵添加量的提高而線(xiàn)性提高。以上結(jié)果表明，肉雞飼糧中添加一定劑量鐵可改善肉雞的抗氧化能力，但越來(lái)越多的研究表明，動(dòng)物攝入過(guò)多的鐵會(huì)導(dǎo)致活性氧大量生成，從而造成機(jī)體內(nèi)促氧化與抗氧化之間的平衡出現(xiàn)混亂，引起氧化應(yīng)激[18]。Gou等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在1～21日齡嶺南肉雞飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為208 mg/kg)中添加超過(guò)700 mg/kg鐵，空腸MDA含量顯著提高。Chandravathy等[13]研究發(fā)現(xiàn)，與不添加鐵的基礎(chǔ)飼糧相比，添加1 930 mg/kg會(huì)顯著提高科寶肉雞肝臟MDA含量，并降低肝臟GSH含量。Zhang等[24]通過(guò)給小鼠腹腔注射鐵，使其處于鐵超載狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)與正常小鼠相比，鐵超載小鼠肝臟SOD和GSH-Px活性降低，肝臟MDA含量提高。Badria等[25]通過(guò)在大鼠飲水中加鐵，導(dǎo)致其鐵超載，也發(fā)現(xiàn)了鐵超載大鼠肝臟MDA含量顯著高于正常大鼠。在豬的研究上也有類(lèi)似的報(bào)道，Li等[17]在斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為20 mg/kg)中添加100和500 mg/kg鐵，發(fā)現(xiàn)斷奶仔豬肝臟和十二指腸MDA含量隨飼糧鐵添加量的提高而線(xiàn)性提高。與上述報(bào)道類(lèi)似，本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加1 280 mg/kg鐵可顯著提高63日齡黃羽肉雞血漿和肝臟MDA含量。

3.3 飼糧鐵添加量對(duì)黃羽肉雞屠宰性能的影響

目前大多數(shù)研究表明，畜禽屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均不受飼糧鐵添加量的影響。Kwiecień等[26]在Ross肉雞基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為70 mg/kg)中添加20和40 mg/kg硫酸亞鐵或添加10、20和40 mg/kg甘氨酸鐵，發(fā)現(xiàn)42日齡Ross肉雞的屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均未受飼糧鐵添加形式及添加量的影響。馬春艷等[27]在22～42日齡肉雞基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為47 mg/kg)中添加20、40、60、80和100 mg/kg鐵，發(fā)現(xiàn)42日齡AA肉雞屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均未受到飼糧鐵添加量的影響。宋丹[28]研究發(fā)現(xiàn)，22～42日齡AA肉雞基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧中鐵含量為60.43 mg/kg)中添加500 mg/kg鐵對(duì)屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均無(wú)顯著影響。與上述報(bào)道類(lèi)似，本試驗(yàn)研究表明，63日齡黃羽肉雞屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均不受飼糧鐵添加量的影響。

鐵能調(diào)節(jié)動(dòng)物脂肪代謝，影響脂肪沉積[14]，但目前研究結(jié)果不一。駱婉秋[14]研究表明，在鐵含量為109 mg/kg的基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg鐵會(huì)降低21日齡Ross肉雞腹部脂肪相對(duì)重量。與駱婉秋[14]結(jié)果類(lèi)似，本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧鐵添加量提高至80 mg/kg及以上時(shí)，63日齡黃羽肉雞腹脂率線(xiàn)性降低，這可能與高劑量的鐵導(dǎo)致肉雞肝臟脂肪合成相關(guān)酶活性降低有關(guān)[14]。肝臟是禽類(lèi)脂肪從頭生成的主要部位，合成的脂肪酸以低密度脂蛋白或乳糜粒運(yùn)輸供各組織器官吸收利用[29]。研究發(fā)現(xiàn)，高劑量的鐵會(huì)降低肝臟脂肪酸合成限速酶如脂肪酸合成酶和硬脂酰輔酶A去飽和酶1的mRNA相對(duì)表達(dá)量，降低脂肪酸合成酶和硬脂酰輔酶A去飽和酶1活性，導(dǎo)致肝臟脂肪合成量降低[14]，從而影響腹部脂肪沉積。但也有不同的結(jié)論，宋丹[28]研究發(fā)現(xiàn)，42日齡AA肉雞腹脂沉積未受高鐵飼糧(鐵含量為60.43 mg/kg的基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg鐵)的影響。造成這種差異的原因目前尚不清楚，有待進(jìn)一步的研究證實(shí)。

4 結(jié) 論

① 黃羽肉雞各階段ADG和ADFI均隨飼糧鐵添加量的提高而線(xiàn)性降低，其中1 280 mg/kg添加組各階段ADG和ADFI最低。

② 黃羽肉雞血漿和肝臟MDA含量均隨飼糧鐵添加量的提高而線(xiàn)性提高，當(dāng)鐵添加量提高至1 280 mg/kg時(shí)，血漿和肝臟MDA含量最高。

③ 黃羽肉雞腹脂率隨飼糧鐵添加量的提高而線(xiàn)性降低，與對(duì)照組相比，當(dāng)鐵添加量提高至80 mg/kg及以上時(shí)，腹脂率顯著降低。

綜上所述，高鐵飼糧會(huì)降低黃羽肉雞生長(zhǎng)性能和抗氧化能力，并降低腹脂沉積。