張 輝，丁夢(mèng)圓，許學(xué)明，湯龍海

（蘇州市中心血站，江蘇 215006）

輸血作為挽救生命的重要治療手段，特別對(duì)大量出血和嚴(yán)重貧血患者是一種不可替代的治療方法。有研究表明，紅細(xì)胞血型意外抗體（以前稱(chēng)不規(guī)則抗體）的存在會(huì)對(duì)臨床輸血安全構(gòu)成威脅[1]，是導(dǎo)致血液輸注無(wú)效、溶血性輸血及新生兒溶血病等不良反應(yīng)的主要原因。意外抗體是指正常ABO血型中抗-A、抗-B之外的血型抗體，其產(chǎn)生無(wú)規(guī)律，不符合Landsteiner規(guī)則[2]。存在意外抗體的患者如需輸血，應(yīng)予以對(duì)應(yīng)抗原陰性的血液。相較于常見(jiàn)的CCee表型，獻(xiàn)血者紅細(xì)胞ccEE（即C、e抗原陰性）表型較為少見(jiàn)。本研究通過(guò)比較不同篩血策略下C、e抗原陰性表型的篩選情況，旨在為輸血實(shí)驗(yàn)室高效篩選ccEE表型提供參考。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2020年1月—2021年4月蘇州市D抗原陽(yáng)性無(wú)償獻(xiàn)血者血液1 442袋。

1.2 試劑與儀器 單克隆IgM型抗-C、抗-e血清（上海血液生物醫(yī)藥有限公司），KA-2200臺(tái)式離心機(jī)（日本KUBOTA）。

1.3 篩血方法 從1 442袋熱合血袋血辮中分別取約10μL紅細(xì)胞于試管中，隨機(jī)采取兩種篩血策略:（1）先加入1滴抗-C試劑，1 000 g離心15 s后觀察結(jié)果，如陰性再加入1滴抗-e試劑，再次離心后觀察，若陰性即為所需ccEE表型。（2）先加入抗-e試劑，再加入抗-C試劑，方法同上。

1.4 篩血成功標(biāo)準(zhǔn) 篩選的C、e抗原陰性紅細(xì)胞與檢出抗-C、抗-e抗體患者標(biāo)本主側(cè)交叉配血相合。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和率表示，差異性比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 ABO四種血型中C和e抗原陰性率 隨機(jī)采取兩種不同策略進(jìn)行篩查，1 442袋D抗原陽(yáng)性血液中篩出C和e抗原均陰性血液107袋（7.42%），其中A型61例（6.43%），B型17例（9.34%），O型21例（8.71%），AB型8例（11.43%），ABO各血型中C和e抗原陰性率的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.562，P=0.207）。見(jiàn)表1。

表1 ABO四種血型中C和e抗原陰性率 例（%）

2.2 兩種篩血策略篩血成功率比較 先篩查出C抗原再篩查e抗原，篩查A、B、O、AB四種血型共904袋，篩到111袋C抗原陰性血液中同時(shí)e抗原陰性者68袋，篩血成功率61.26%；其中A型篩查441袋，篩到46袋C抗原陰性血液中同時(shí)e抗原陰性者25袋，Ce抗原陰性率5.67%。先篩查e抗原再篩查C抗原，篩查A、O兩種血型共538袋，篩到43袋e抗原陰性血液中同時(shí)C抗原陰性者39袋，篩血成功率90.70%；其中A型篩查508袋，篩到40袋C抗原陰性血液中同時(shí)e抗原陰性者36袋，Ce抗原陰性率7.09%。C抗原陰性時(shí)，四種血型出現(xiàn)e抗原陰性率分別為A型54.35%（25/46），B型60.71%（17/28），O型64.29%（18/28），AB型88.89%（8/9）；e抗原陰性時(shí)，出現(xiàn)C抗原陰性率分別A型90.00%（36/40），O型100.00%（3/3）。A型兩種篩血策略篩血成功率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=13.189，P=0.000）。

2.3 兩種篩血策略成本比較 在C抗原陰性中篩查e抗原陰性，試劑成本8.71元/袋，平均費(fèi)時(shí)3.13分鐘/袋；在e抗原陰性中篩查C抗原陰性，試劑成本9.98元/袋，平均費(fèi)時(shí)2.69分鐘/袋。

3 討 論

患者經(jīng)過(guò)輸血、妊娠等免疫刺激后，可能產(chǎn)生意外抗體。為保證輸血安全，患者產(chǎn)生意外抗體后需再次輸血時(shí)，應(yīng)輸注相應(yīng)抗原陰性、交叉配血相容的全血和（或）紅細(xì)胞[3]。Rh系統(tǒng)是除ABO系統(tǒng)外最具有臨床意義的血型系統(tǒng)。如今發(fā)現(xiàn)的Rh抗原有54個(gè)。其中5種主要抗原在臨床上具有十分重要的意義，即D、C、c、E、e抗原[4]。中國(guó)人中CCDee表型（C、e抗原陽(yáng)性）在Rh血型系統(tǒng)中比例最高，聊城市中心血站隨機(jī)抽取18 317名無(wú)償獻(xiàn)血者中，Rh（+）無(wú)償獻(xiàn)血者各表型中以DCCee比例最高[5]，占比60.58%。浙江省人民醫(yī)院統(tǒng)計(jì)19 252名Rh（D）陽(yáng)性患者的Rh表型以CCDee最多，占43.79%；11 728名Rh（D）陽(yáng)性獻(xiàn)血員的Rh表型以CCDee最多，占43.91%[6]。南寧市中心血站建立28 205名無(wú)償獻(xiàn)血者Rh血型表型庫(kù)，其中CCDee表型16 794名，占比59.50%[7]。D抗原陽(yáng)性無(wú)償獻(xiàn)血者中C、e抗原陰性率，上海市血液中心統(tǒng)計(jì)為7.20%，蘇州市為7.42%，宣城市人民醫(yī)院對(duì)2 143名Rh（D）陽(yáng)性無(wú)償獻(xiàn)血者進(jìn)行Rh分型檢測(cè)，Rh分型分布為CCDee（44.70%）＞CcDEe（34.53%）＞CcDee（8.77%）＞ccDEE（6.44%）＞ccDEe（3.13%）＞CCDEe（1.26%）＞CcDEE（0.61%）＞ccDee（0.51%）＞CCDEE（0.05%）[8]，福建省血液中心在檢測(cè)的13 015名Rh（D）陽(yáng)性獻(xiàn)血者中CCee表型比例最高（45.50%），其后依次為CcEe（34.17%）、Ccee（8.89%）、ccEE（6.57%）[9]，上述幾個(gè)地區(qū)D抗原陽(yáng)性無(wú)償獻(xiàn)血者中C、e抗原陰性率非常接近。

本研究發(fā)現(xiàn)，C、e抗原陰性率在ABO不同血型人群中，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其中A型人群中陰性率最低為6.43%，O型為8.71%，B型為9.34%，AB型為11.43%，表明ABO血型系統(tǒng)與Rh血型系統(tǒng)無(wú)關(guān)聯(lián)。采取不同篩血策略時(shí)，C和e抗原陰性率有所差異。先篩查C抗原陰性后再篩查e抗原時(shí)，A型陰性率為5.67%（25/441）。先篩查e抗原陰性后再篩查C抗原時(shí),A型陰性率為7.09%（36/508）。兩種策略篩查A型血中C和e抗原陰性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；O型、B型、AB型血液篩查的樣本量偏少，暫時(shí)未進(jìn)行比較。

兩種篩血策略中C抗原陰性時(shí)出現(xiàn)e抗原陰性率與e抗原陰性出現(xiàn)C抗原陰性率比較也有差異:C抗原陰性時(shí)，四種血型出現(xiàn)e抗原陰性率分別為A型54.35%（25/46），B型60.71%（17/28），O型64.29%（18/28），AB型88.89%（8/9）；e抗原陰性時(shí)，出現(xiàn)C抗原陰性率分別A型90.00%（36/40），O型100.00%（3/3）。從兩種篩血策略的成功率來(lái)看，A型成功率差異明顯（χ2=13.189，P=0.00）。因A型兩種篩血策略數(shù)量接近，一定程度上能代表人群中的實(shí)際情況。

綜上所述，在實(shí)際工作中，如需篩查C和e抗原均陰性血液時(shí)，建議先篩e抗原陰性后再篩C抗原陰性，篩查成功率相對(duì)更高，平均費(fèi)時(shí)2.69分鐘/袋，試劑成本9.98元/袋。而先篩C抗原陰性后再篩查e抗原陰性，平均費(fèi)時(shí)3.13分鐘/袋，試劑成本8.71元/袋。各單位可根據(jù)實(shí)際情況選擇適合本單位的篩血策略，以便更好為臨床服務(wù)。