羅仕艷 金佳瑤

摘要：本文研究蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性預(yù)測方法，該方法首先提取了氨基酸組成和g-gap二肽特征，然后利用ANOVA方法對特征進行了選擇，最后通過Weka軟件及其免費提供的LibSVM軟件包來實現(xiàn)SVM的功能，對蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性進行預(yù)測。實驗表明該方法具有較好預(yù)測性能。

關(guān)鍵詞：蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性;機器學(xué)習(xí);特征提取

1 引言

蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性是蛋白質(zhì)生化和生物技術(shù)研究的重要方面，它與酶工程特別相關(guān)。具有良好熱穩(wěn)定性的酶蛋白應(yīng)用在工業(yè)生物催化的領(lǐng)域有著巨大的前途和發(fā)展，如治理水污染，清理堵塞管道，釀造食品，生物制藥等[1]?，F(xiàn)如今，計算機技術(shù)在生物信息學(xué)的領(lǐng)域的作用越來越不可取代。試想，如果我們能夠從蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)本身出發(fā)去對蛋白質(zhì)根據(jù)其熱穩(wěn)定性進行分類，那么就可以借助計算機高速的運算能力顯著提高獲得耐熱蛋白質(zhì)的幾率。由此可見，通過了解蛋白質(zhì)的序列和結(jié)構(gòu)所蘊含的信息而對蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性進行分類具有重要的意義。

早在多年前，Perutz[2]等人在對細(xì)菌中的血紅蛋白等研究中就已經(jīng)涉及了蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性的相關(guān)內(nèi)容。從蛋白質(zhì)耐熱特性的研究結(jié)果中了解到蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性與其氨基酸序列，離子對數(shù)量和鹽橋相關(guān)。Ding[3]等人在研究中對比了一些耐熱和耐溫的蛋白質(zhì)的二肽組成，充分地證實了蛋白質(zhì)的二肽組成對其熱穩(wěn)定性也存在著重大的影響。Pace[5]等人研究了四個不同的蛋白質(zhì)突變體的疏水作用，發(fā)現(xiàn)疏水作用與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)形成和維持其穩(wěn)定有著密切的關(guān)系[4]。

丁彥蕊等人[6]統(tǒng)計并且分析了16個家族中共32個蛋白質(zhì)序列的各種氨基酸含量，并且系統(tǒng)地分析了氨基酸組成對蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性的影響。發(fā)現(xiàn)隨著蛋白質(zhì)耐熱性的增強，氨基酸Ser和Cys含量明顯降低 ， Arg、Ile、Pro的含量明顯升高。鄧明霞[7]等人測定了這些膠原蛋白的氨基酸組成和熱變性溫度，發(fā)現(xiàn)膠原蛋白發(fā)生熱變性時的溫度與堿性氨基酸、總極性氨基酸和帶電荷極性氨基酸的含量與呈正相關(guān)關(guān)系，而與亞氨基酸與非極性氨基酸的含量則呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)的關(guān)系。

Zhang和Fang[8]還發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)的二肽組成也蘊含著與蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性相關(guān)的信息。Ding[9]等人使用了v-支持向量機的技術(shù)發(fā)現(xiàn)二肽組成和氨基酸組成都對蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性有著重大的影響。

2 特征提取

（1）氨基酸組成

氨基酸組成表示各種氨基酸在蛋白質(zhì)中的含量，氨基酸組成能最直觀地體現(xiàn)出蛋白質(zhì)序列所包含的信息。

（2）g-gap二肽組成

g-gap二肽組成的特征提取方法，是計算某個長度為N的蛋白質(zhì)序列片斷中k個間隔距離的殘基對在該序列中的組成比例。本方法中，k最大為5。然而，當(dāng)k=0的時候，序列結(jié)尾會有1個氨基酸沒有其他氨基酸與之配對，這樣提取的殘基對數(shù)量為N-1;k=1時，有2個氨基酸沒有配對，那么提取出的殘基對數(shù)量為N-2;所以規(guī)律就是，當(dāng)序列長度為N，間隔為k時，一共可以提取的殘基對數(shù)量為N-k-1。

3 特征選擇

對于一個蛋白質(zhì)序列來說，我們可以從中提取到成百上千的特征，但是這些特征未必都對蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性預(yù)測起到幫助。除此之外，大量的特征會導(dǎo)致計算機的運算時間過長，浪費計算機資源。所以最好的辦法就是通過特征選擇技術(shù)來選取一組對蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性影響最大的特征，去掉冗余的參數(shù)。這樣得出的結(jié)果可靠性才有所保障。目前已經(jīng)提出了一些特征選擇的方法，如主成分分析、遺傳算法和最小冗余最大關(guān)聯(lián)等。但是Ding[10]等人提出了一種方差分析（ANOVA）的方法。ANOVA方法能夠簡單有效地分析出對某一事物具有重大影響的因素，因具有多種優(yōu)點而被廣泛使用。本文使用ANOVA方法對蛋白質(zhì)的g-gap二肽組成進行特征選擇。

4 分類器

Weka是一款非商業(yè)化的機器學(xué)習(xí)和數(shù)據(jù)挖掘軟件。它在Java環(huán)境下運行，并且免費、開源。其主要開發(fā)者是來自新西蘭的懷卡托大學(xué)，至今已經(jīng)經(jīng)歷了20多年的發(fā)展和完善，其功能也已經(jīng)非常強大和成熟。本文使用Weka免費提供的LibSVM軟件包來實現(xiàn)SVM的功能。

5.總結(jié)

本文實現(xiàn)了一個蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性預(yù)測方法，利用特征提取、特征選擇算法以及支持向量機方法對蛋白質(zhì)根據(jù)其是否具有熱穩(wěn)定性而分類。

參考文獻：

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項目基金：國家級大學(xué)生創(chuàng)新項目（202111488009）;作者：羅仕艷，衢州學(xué)院數(shù)據(jù)科學(xué)與大數(shù)據(jù)技術(shù)本科學(xué)生。