趙穎 駱方蓮

[摘要]目的考查南京市中醫(yī)院自制利咽合劑以袋泡茶形式和湯劑形式加工有效成分含量的差異，為臨床醫(yī)生用藥提供參考數(shù)據(jù)。方法采用薄層色譜法，對不同處理方法利咽方中射干、南沙參進行定性鑒別，采用高效液相色譜法，對不同處理方法利咽方中次野鳶尾黃素進行含量測定，對有效成分含量差異進行比較分析。結果定性鑒別中，射干、南沙參的薄層鑒別斑點清晰度均為粉末煎煮組>飲片煎煮組>粉末沖泡組>飲片沖泡組，陰性制劑均無干擾;含量測定實驗中，次野鳶尾黃素含量為粉末煎煮組>飲片煎煮組>粉末沖泡組>飲片沖泡組。粉末袋泡茶在沖泡1 h 以上接近粉末煎煮0.5 h 有效成分含量。結論有效成分的含量煎煮法優(yōu)于袋泡茶法，若選用袋泡茶法，需要沖泡1 h 以上。

[關鍵詞]利咽合劑;中藥袋泡茶;中藥煎煮;高效液相色譜法;薄層色譜法

[中圖分類號] R283.6? [文獻標識碼] A?? [文章編號]2095-0616（2022）09-0075-04

Comparison of the content of components in Liyan Decoction versus bagged Liyan Tea

ZHAO? Ying??? LUO? Fanglian

Department of Pharmacy， Nanjing Hospital ofTraditional Chinese Medicine， Jiangsu， Nanjing 210022， China

[Abstract] Objective To investigate the difference in the content of active ingredients in Liyan Mixture made by Nanjing Hospital of Traditional Chinese Medicine in the form of tea bag and decoction so as to provide reference data for clinicians to use the medicine. Methods The qualitative identification of belamcanda chinensis （L.） DC and fourleafladybell root in Liyan Mixture with different processing methods was carried out by thin-layer chromatography， and the content of irisflorentin in Liyan mixture with different processing methods was determined by high-performance liquid chromatography. The differences in the content of active components were comparatively analyzed. Results In the qualitative identification， both the clarity of spots of belamcanda chinensis （L.） DC and fourleafladybell root found by thin-layer chromatography in order were： powder decocting group>herbal pieces decocting group>powder brewing group>herbal pieces brewing group， and the negative preparations were free of interference. In the content determination experiment， the content of irisflorentin in order was： powder decocting group>herbal pieces decocting group>powder brewing group>herbal pieces brewing group. The content of active components in bagged powder brewing for more than 1 hour was close to that in powder decocting for 0.5 hours. Conclusion The content of active components in the medicine in the form of decoction is higher than that in the form of bagged tea， and if the form of bagged tea is chosen， the medicine is suggested to be brewed for more than 1 hour.

[Key words] Liyan Mixture; Bagged Chinese herbal tea; Chinese medicine decoction; High-performance liquid chromatography; Thin-layer chromatography

利咽合劑由南沙參、射干、木蝴蝶、麥冬等藥味組成，具有養(yǎng)陰生津，清熱利咽的功效，主要用于治療慢性咽炎。該制劑在南京市中醫(yī)院（本院）已使用30余年，具有優(yōu)異的臨床療效。因此，為推廣使用，本研究對該方的另一種劑型進行探討。經(jīng)翻閱文獻，茶飲法更適宜咽部用藥[1-2]。不同的提取方法對利咽方的有效成分含量也有一定的影響[3]。本課題分別以中藥粉末和中藥飲片為原料制備利咽袋泡茶和利咽湯劑，采用現(xiàn)代實驗技術分析制劑中有效成分的含量，通過成分含量的比較，討論哪種劑型更有優(yōu)勢，為臨床醫(yī)生開具處方提供參考依據(jù)。

1儀器與試藥

1290型高效液相色譜儀（安捷倫公司），電子天平[托利多儀器（上海）有限公司]、電熱恒溫干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司），KQ-500E 型超聲儀（昆山市超聲儀器有限公司），ZF-2型三用紫外分析儀（上海安亭電子儀器廠），電熱恒溫水浴鍋（上海躍進醫(yī)療器械廠）。

次野鳶尾黃素對照品（批號： MUST-18030404）由成都曼思特生物科技有限公司提供，甲醇（批號：20190503）由鎮(zhèn)江久億化學試劑公司提供，正己烷（批號：180619913E），甲酸（批號：180511553E）、二氯甲烷（批號：180917977F）、正丁醇（批號：180601766E）、乙酸乙酯（批號：181204989K）、乙醚（批號：210728631E）由南京化學試劑股份有限公司提供，三氯甲烷（批號：20171120）、丙酮（批號：20180105）由上海凌峰化學試劑有限公司提供。

2方法與結果

2.1樣品制備

湯劑的制備：取2 d 處方量的中藥飲片和中藥粉末（80目篩）各3份，分別加水至1 L 煎煮0.5、1和1.5 h，過濾，濃縮至80 ml（20℃）即得，樣品編號見表1。

袋泡茶的制備：取2 d 處方量的中藥飲片和中藥粉末（80目篩）各3份，分別加沸水至1 L 沖泡0.5、1和1.5 h，過濾，每份濃縮至80 ml（20℃）即得，樣品編號見表1。

2.2薄層鑒別

2.2.1射干的薄層鑒別取12份樣品各15 ml，分別加乙醚15 ml 振搖提取2次，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加甲醇2 ml 使溶解，作為供試品溶液。另取射干對照藥材1 g，加乙醚50 ml，浸泡12 h，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇2 ml 使溶解，作對照藥材溶液。取射干的陰性樣品15 ml，同供試液的制備方法制成陰性對照溶液。按照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取上述溶液各2μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇（3∶2∶ 1）為展開劑，展開，取出晾干，置紫外燈光365 nm 下檢視。在供試品色譜中，12份樣品均與對照藥材有3個相同顏色的熒光斑點，陰性相同位置無點，見圖1～2。結果顯示，射干的薄層鑒別斑點清晰度為粉末煎煮組>飲片煎煮組>粉末沖泡組>飲片沖泡組。

2.2.2南沙參的薄層鑒別取12份樣品各10 ml，加二氯甲烷10 ml 振搖提取2次，合并二氯甲烷液，水浴蒸干，殘渣加甲醇2 ml 使溶解，作為供試品溶液。另取南沙參對照藥材2 g，加二氯甲烷50 ml，超聲處理30 min，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇2 ml 使溶解，作為對照藥材溶液。取南沙參的陰性樣品10 ml，同供試液的制備方法制成陰性對照溶液。按照薄層色譜法（通則0502）實驗，吸取供試品溶液20μl，對照藥材溶液5μl，陰性對照溶液20μl，點于同一硅膠 G 薄層板上，以正己烷-丙酮-甲酸（16∶1∶ 0.05）為展開劑，展開，取出晾干，噴以2%香草醛硫酸溶液，在95℃加熱至斑點顯色清晰，陰性相同位置無點，見圖3～4。結果顯示，南沙參的薄層鑒別斑點清晰度為粉末煎煮組>飲片煎煮組>粉末沖泡組>飲片沖泡組。

2.3次野鳶尾黃素的含量測定

色譜條件與系統(tǒng)適用性條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇∶水（53∶47）為流動相;檢測波長為266 nm。

對照品溶液的制備：精密稱定次野鳶尾黃素對照品適量，制成每1 ml 含100μg 的次野鳶尾黃素溶液。

供試品溶液的制備：取12份樣品各10 ml，分別加入甲醇15 ml，稱定重量，超聲處理30 min，取出，放冷，再稱定重量，用60%甲醇補足減失重量，過濾，各收集續(xù)濾液10 ml，即得。

線性關系考察：精密吸取0.099 mg/ml 次野鳶尾黃素對照品溶液1、2、5、8、10、12μl，進樣，按上述色譜條件測定峰面積值，以峰面積均值（ Y）為縱坐標，進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程 Y=2636.29X-3.62， r=0.9999。

結果表明次野鳶尾黃素進樣量在0.099～1.188μg 范圍內呈良好的線性[4-5]，見圖5。

野鳶尾黃素含量測定：分別精密吸取次野鳶尾黃素對照品溶液、供試品溶液（樣品1∶ 12）及陰性對照溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定結果見表2。

結果表明利咽方使用煎煮法有效成分含量要優(yōu)于沖泡法。煎煮法中，粉末提取次野鳶尾黃素的含量優(yōu)于飲片提取。次野鳶尾黃素的含量為粉末煎煮組>飲片煎煮組>粉末沖泡組>飲片沖泡組;粉末沖泡1 h ≈粉末沖泡1.5 h ≈粉末煎煮0.5 h ≈飲片煎煮0.5 h。

3討論

參照《中華人民共和國藥典》藥材射干項下次野鳶尾黃素的含量測定方法，流動相為甲醇∶0.2%磷酸溶液（53∶47）[6]，考慮到磷酸為難揮發(fā)性酸，會降低高效液相色譜儀及色譜柱的使用壽命，因此本實驗維持原流動相配比，對兩種流動相甲醇∶0.1%甲酸溶液與甲醇∶水溶液的樣品色譜峰進行比較分析，發(fā)現(xiàn)這兩種流動相的樣品色譜峰峰型接近，分離效果均理想，因此最終確定流動相為甲醇∶水溶液（53∶47）。

袋泡茶樣品的制備參考文獻[7]，使用沸水沖泡。介于條件原因，未能將多次沖泡列入試驗項目，是本課題的不足。實際生活中，袋泡茶是會多次沖泡服用的，以正常人喝茶為例，一份茶葉也會反復加開水3～4次，所以添水也是值得之后研究代茶飲需要考慮的項目之一。就本實驗結果來看，煎煮法在制作中藥制劑是普遍優(yōu)于茶飲法的，考慮到不同的藥材水提效果不一，有條件建議選擇煎煮法服藥，盡管煎煮法優(yōu)于袋泡茶法，在實際運用時，袋泡茶仍能起到較好效果[8]。中藥茶飲在治療咽喉疾病方面有著獨特的療效，中藥茶飲相比中藥合劑，在味道和服用方法上占據(jù)明顯的優(yōu)勢，這可以彌補其他口服類中藥制劑的不足，甚至有助于患者服用其他藥物，因此中藥茶飲仍值得研究發(fā)展和推廣。茶飲法在呼吸道和口腔疾病的防治上有獨特的優(yōu)勢，這在咽部疾病的防治中值得探究[9-15]。

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（收稿日期：2021-09-23）