房愛芳 李秀芳 林麗紅

宮頸癌是臨床較為常見的婦科惡性腫瘤之一，我國宮頸癌的發(fā)生率約占世界范圍的30%，其中原位癌高發(fā)于30～35歲，浸潤癌高發(fā)于45～55歲[1-2]。隨著國內(nèi)社會的發(fā)展、生活方式及習(xí)慣的改變，近年宮頸癌逐漸呈年輕化趨勢，因此早期診斷宮頸癌及評估病情進(jìn)展對宮頸癌的防治至關(guān)重要[3]。近年來宮頸細(xì)胞學(xué)篩查在宮頸癌或癌前病變早期診斷中被普遍應(yīng)用。有研究顯示高危型人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素，高危型HPV感染可影響患者機(jī)體免疫系統(tǒng)正常功能，其在宮頸癌患者體內(nèi)明顯表達(dá)[4]。而宮頸癌作為多階段、多因素逐漸發(fā)展的生物學(xué)過程，單一的高危型HPV檢測無法滿足診斷及評估病情進(jìn)展需求[5]。在幾乎所有腫瘤進(jìn)展中細(xì)胞惡化轉(zhuǎn)化時高遷移率蛋白a1(high mobility group protein a1，Hmga1)出現(xiàn)異常表達(dá)。糖類抗原(carbohydrate antigen,CA)125作為體腔上皮細(xì)胞表達(dá)正常組織的糖蛋白，分布于眼表面、呼吸道和女性生殖道等上皮組織部分，目前被認(rèn)為是子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌等具有診斷價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。細(xì)胞角蛋白(cytokeratin，CK)屬于上皮細(xì)胞和上皮來源的惡性腫瘤細(xì)胞中間絲的組成部分，是常用的腫瘤免疫組織化學(xué)標(biāo)志物，其中以CK19的應(yīng)用最為廣泛。本研究主要探討宮頸癌患者高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染狀況及其與血清Hmga1、CK19、CA125表達(dá)的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析我院2018年8月至2019年7月于我院確診的宮頸癌患者63例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床確診為宮頸癌，符合《2019 NCCN宮頸癌臨床實(shí)踐指南(第1版)》[6]相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②首次發(fā)病及確診患者；③未進(jìn)行化療及相關(guān)生物學(xué)治療者；④符合宮頸癌國際婦產(chǎn)科(FIGO)分期ⅠB和ⅡA者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤者；②伴有其他女性生殖系統(tǒng)疾病者；③心肝腎及造血系統(tǒng)等功能存在嚴(yán)重障礙者；④處于哺乳或妊娠期患者。宮頸癌組患者年齡34～57(46.17±6.79)歲；病理類型：鱗癌47例，腺癌16例；病理分化：高分化34例，中分化17例，低分化12例；FIGO分期：ⅠB期24例，ⅡA期39例。同期納入50例進(jìn)行婦科健康體檢的女性作為對照組，年齡36～58(45.69±6.24)歲。32例臨床診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervicalintraepithelialneoplasia，CIN)[7]的女性為癌前病變組，年齡36～57(45.83±5.94)歲；病變程度：CINⅠ13例，CINⅡ8例，CINⅢ11例。3組研究對象的年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 高危HPV檢測 3組均進(jìn)行高危型HPV DNA檢測，先用棉拭子將過多分泌物擦拭干凈，采用宮頸脫落細(xì)胞采樣器(北京博暉創(chuàng)新光電技術(shù)股份有限公司)在宮頸外口黏膜稍用力轉(zhuǎn)動，獲取標(biāo)本，-20℃保存。采用HPV檢測試劑盒(廣東凱普生物科技股份有限公司)，檢測HPV包括16、18、31、33、35、39、45等13種高危HPV基因型。樣本表達(dá)值相對光單位(RLU)與陽性標(biāo)準(zhǔn)品閾值(CO)的比值為病毒負(fù)荷量，比值≥1.0高危型HPV為陽性；將高危型HPV 負(fù)荷量分為3級，1級：1～100，2級：100～1000，3級：>1000，比值越高負(fù)荷量越大。

1.2.2 血清Hmga1、CK19、CA125檢測 3組在靜息狀態(tài)下抽取靜脈血5 ml置于EDTA抗凝管中，經(jīng)3000 r/min離心10 min取上清液備用。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清Hmga1、CK19和CA125水平，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明，Hmga1試劑盒購于上海潤裕生物科技有限公司，CK19試劑盒購于泉州市九邦生物科技有限公司，CA125試劑盒購于上海通蔚實(shí)業(yè)有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 不同病變程度患者高危型HPV感染率及負(fù)荷量

FIGOⅠB期(87.5%)及FIGOⅡA期(92.3%)患者高危型HPV感染率高于CINⅠ期(38.5%)患者，同時FIGOⅡA期患者高危型HPV感染率高于CINⅡ期(62.5%)患者(P<0.05)，見表1。

表1 不同病變程度患者高危型HPV感染率及負(fù)荷量(例，%)

2.2 3組血清Hmga1、CK19和CA125水平比較

3組血清Hmga1、CK19和CA125水平宮頸癌組>癌前病變組>對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 3組血清Hmga1、CK19和CA125水平比較

2.3 癌前病變患者血清Hmga1、CK19和CA125水平

癌前病變程度越高,患者血清Hmga1、CK19和CA125水平越高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 癌前病變患者血清Hmga1、CK19和CA125水平

2.4 宮頸癌患者血清Hmga1、CK19和CA125水平與臨床病理特征的關(guān)系

血清Hmga1、CK19和CA125水平與宮頸癌病理類型無關(guān)(P>0.05)，與患者腫瘤分化程度、FIGO分期及HPV病毒負(fù)荷量相關(guān)，腫瘤分化程度越低血清Hmga1、CK19和CA125水平越高(P<0.05)，F(xiàn)IGO分期越高血清Hmga1、CK19和CA125水平越高(P<0.05)，HPV病毒負(fù)荷量越高血清Hmga1、CK19和CA125水平越高(P<0.05)，見表4。

表4 宮頸癌患者血清Hmga1、CK19和CA125水平與臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

宮頸癌發(fā)病率位于婦科惡性腫瘤第2位，約半數(shù)患者發(fā)生死亡，對女性健康及生存構(gòu)成極大威脅[8]。近年來宮頸癌早期篩查手段不斷更新，如陰道鏡、HPV DNA檢測等，有研究顯示宮頸癌高達(dá)90%患者存在高危型HPV感染，且高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌及癌前病變病程發(fā)展的關(guān)鍵因素，可導(dǎo)致患者出現(xiàn)不同程度的組織損傷[9-11]。本研究結(jié)果中，宮頸癌FIGOⅠB期(87.5%)及FIGOⅡA期(92.3%)患者高危型HPV感染率高于CINⅠ期(38.5%)患者，同時FIGOⅡA期患者高危型HPV感染率高于CINⅡ期(62.5%)患者，提示宮頸癌病情的惡化可導(dǎo)致HPV感染率升高，而高危型HPV感染是誘導(dǎo)CIN進(jìn)程誘發(fā)宮頸病變的重要因素。結(jié)果中還顯示高危HPV DNA負(fù)荷量隨病情發(fā)展而增加，但是高危HPV感染不是宮頸出現(xiàn)癌性病變的唯一因素，仍有大量患者因復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移導(dǎo)致患者出現(xiàn)終點(diǎn)事件。

目前靶向蛋白或因子等腫瘤標(biāo)志物在宮頸癌的輔助診斷、療效判斷及病情進(jìn)展等方面具有重要參考價(jià)值，有研究顯示在尚未明確診斷時，部分腫瘤標(biāo)志物已有不同程度的改變[12]。Hmga1蛋白經(jīng)過多種途徑調(diào)控腫瘤相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄，在胚胎發(fā)育與快速增長細(xì)胞中可見Hmga1蛋白出現(xiàn)高表達(dá)，與多種腫瘤的發(fā)生及病情發(fā)展密切相關(guān)[13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)3組血清Hmga1水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時癌前病變患者的病變程度越高血清Hmga1水平越高，這些結(jié)果說明隨著宮頸病變程度增加血清Hmga1蛋白表達(dá)顯著增高，提示Hmga1在評估宮頸癌病情進(jìn)展中具有較好的臨床價(jià)值。林芳芳等[14]相關(guān)研究結(jié)果顯示，觀察組Hmga1水平高于健康組，具有較高的特異度及敏感度，可作為宮頸癌診斷參考指標(biāo)。CK19是存在單層上皮腫瘤細(xì)胞中的CK蛋白，在幾乎所有上皮類腫瘤中表達(dá)，常被臨床作為檢測腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等惡化程度的指標(biāo)。血清CK19又主要以可溶性片段CYFRA211為主，是一項(xiàng)重要的腫瘤輔助指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示CK19隨病情進(jìn)展而升高，故認(rèn)為CK19可作為評估宮頸癌患者病情發(fā)展的重要指標(biāo)。與張群珍等[15]相關(guān)研究報(bào)道結(jié)果相符。CA125是從上皮性卵巢抗原中檢測出的高分子糖蛋白，其屬于膜抗原，存在于體腔如胸腹膜、子宮內(nèi)膜等上皮組織。CA125不僅是卵巢癌的特異性腫瘤標(biāo)志物，子宮內(nèi)膜癌、胰腺癌、宮頸癌等患者血清CA125水平均會升高[16]。結(jié)果中癌前病變及宮頸癌組患者CA125明顯表達(dá)，且癌前病變組CIN分期越高CA125表達(dá)越明顯。印海娟等[17]相關(guān)研究報(bào)道中顯示宮頸癌患者CA125表達(dá)最高，可作為宮頸癌輔助診斷標(biāo)志物。同時本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)Hmga1、CK19和CA125水平的表達(dá)與患者腫瘤分化程度、FIGO分期及高危型HPV病毒負(fù)荷量相關(guān)，其中腫瘤分化程度越低血清Hmga1、CK19和CA125水平越高，F(xiàn)IGO分期中ⅡA期Hmga1、CK19和CA125水平的表達(dá)高于ⅠB期，HPV病毒負(fù)荷量越高血清Hmga1、CK19和CA125水平越高，與既往研究結(jié)果相符[18-20]。這些結(jié)果提示血清Hmga1、CK19、CA12水平變化可反映宮頸癌病情變化，是可同高危型HPV感染綜合評估宮頸癌患者病情的血清腫瘤細(xì)胞標(biāo)志物。

綜上所述，高危型HPV感染狀況與宮頸癌患者病情進(jìn)展密切相關(guān)，血清Hmga1、CK19、CA125水平的表達(dá)與宮頸癌患者分化程度、臨床分期、侵襲等病情發(fā)展密切相關(guān)。臨床上積極防治高危型HPV感染或能降低宮頸癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，血清Hmga1、CK19、CA125水平或能監(jiān)測患者預(yù)后效果，降低因預(yù)后不良導(dǎo)致患者死于腫瘤轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)，但仍需進(jìn)一步更全面、細(xì)致的臨床研究加以佐證。