原發(fā)性肝癌(肝癌)是臨床上最常見惡性腫瘤之一，且呈現(xiàn)高危群體年輕化的傾向。中西醫(yī)結(jié)合治療是當(dāng)前治療肝癌的基本模式。中醫(yī)藥治療肝癌，重在整體調(diào)節(jié)，配合手術(shù)、經(jīng)皮肝動脈化療栓塞術(shù)、消融、放化療、靶向治療等手段，可起到“增效減毒”作用。中醫(yī)認(rèn)為，肝癌是在機(jī)體正氣虧虛的基礎(chǔ)上，外邪侵襲或情志失調(diào)致肝失條達(dá)，氣機(jī)不暢，久則血瘀、痰凝、毒結(jié)而發(fā)病。肝癌病性屬本虛標(biāo)實(shí)，病位在肝，與脾密切相關(guān)?！督饏T要略》云：“見肝之病，知肝傳脾，當(dāng)先實(shí)脾?！备尾t木郁，木郁則橫逆脾土，致脾氣虛弱，運(yùn)化失職。脾為氣血生化之本，脾虛則氣弱；氣為血之帥，氣虛則無力助血運(yùn)行,血行遲緩；加之肝癌起病多伴情志失調(diào)，肝郁氣滯，氣不行則血停，瘀血阻滯肝絡(luò)日久而形成積證?！夺t(yī)林改錯》亦云：“結(jié)塊者，必有形之血也?！备伟┍咎撘云⑻摓橹?標(biāo)實(shí)則以血瘀多見。鑒于此，課題組以健脾化瘀為法，應(yīng)用健脾益氣藥與活血化瘀藥配伍用于肝癌綜合治療，取得一定療效

，而其藥效的作用機(jī)制尚未闡明。

中藥具有多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的作用特點(diǎn)。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)可以建立中藥復(fù)雜成分的分子網(wǎng)絡(luò)與多重靶點(diǎn)、疾病之間的互作關(guān)系，從多靶點(diǎn)、多通路的角度實(shí)現(xiàn)藥物作用的綜合分析

。分子對接是通過受體的特征及受體與藥物分子之間的相互作用方式來預(yù)測其結(jié)合模式和親合力的一種理論模擬方法

。本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選出健脾益氣與活血化瘀配伍治療肝癌的主要活性成分及相關(guān)靶點(diǎn)、通路，采用分子對接法將中藥主要活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行對接，探討健脾益氣與活血化瘀配伍多成分、多靶點(diǎn)、多途徑治療肝癌的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)，為后續(xù)機(jī)制研究提供思路和參考。

1 方法

1.1 獲取中藥活性成分與潛在靶點(diǎn) 應(yīng)用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺(TCMSP，http://ibts.hkbu.edu.hk/LSP/tcmsp.php)，以“人參”“黃芪”“黨參”“丹參”“莪術(shù)”“川芎”為檢索詞，收集六味藥物所有相關(guān)的化學(xué)成分。并選擇口服生物利用度(OB)≥30%和藥物相似性(DL≥0.18)作為化合物分子的篩選條件，以此遴選每一味藥物可能的活性成分。之后分別將健脾益氣藥人參、黃芪、黨參相關(guān)的活性成分和活血化瘀藥丹參、莪術(shù)、川芎的活性成分合并去重，篩選出二者交集的共同活性成分。并進(jìn)一步通過TCMSP數(shù)據(jù)庫搜索篩選出中藥活性成分相關(guān)的潛在靶點(diǎn)。

由上圖可看出，直接積分法可以得到方程的直接解析解.從曲線可看出實(shí)際狀態(tài)折刀桿角加速度出現(xiàn)明顯非線性特征.間隙角角加速度遠(yuǎn)大于折頁機(jī)構(gòu)各構(gòu)件角加速度最大值，達(dá)到100倍左右；而且它們的變化變化迅速且沒有規(guī)律，具有很強(qiáng)的隨機(jī)性.隨著曲柄轉(zhuǎn)速的進(jìn)一步上升，折頁機(jī)構(gòu)的加速度動態(tài)響應(yīng)將表現(xiàn)出明顯的混沌狀態(tài).該仿真驗(yàn)證了直接積分法的正確性.

1.2 獲取肝癌相關(guān)靶點(diǎn)，構(gòu)建韋恩圖 應(yīng)用GeneCards數(shù)據(jù)庫和OMIM數(shù)據(jù)庫，以“l(fā)iver cancer”為關(guān)鍵詞，檢索肝癌相關(guān)靶點(diǎn)。將肝癌相關(guān)靶點(diǎn)與健脾益氣藥、活血化瘀藥對應(yīng)的靶點(diǎn)映射，構(gòu)建韋恩圖。

1.3 構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”相互作用網(wǎng)絡(luò) 將中藥活性成分的對應(yīng)靶點(diǎn)和肝癌相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行匹配，獲得兩者的共同靶點(diǎn)即為中藥抗肝癌的關(guān)鍵靶點(diǎn)。采用Cytoscape3.7.1軟件構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”相互作用網(wǎng)絡(luò)。

1.4 GO功能富集分析及KEGG通路富集分析 將中藥與肝癌共同靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫， 物種選擇人類。GO分析時選擇生物學(xué)過程(BP) 、細(xì)胞組成(CC) 和分子功能(MF)3個模塊進(jìn)行功能注釋。根據(jù)校正后

值進(jìn)行排序，分別選擇GO富集排名前20的生物學(xué)功能及KEGG分析靶點(diǎn)富集前20的通路，進(jìn)行條形圖展示。

2.1 篩選中藥活性成分和靶點(diǎn) 通過檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫，獲得與健脾益氣藥人參、黃芪、黨參相關(guān)的活性成分61個，與活血化瘀藥丹參、莪術(shù)、川芎相關(guān)的活性成分75個。按照同時滿足OB≥30%和 DL≥0.18的條件篩選并篩除重復(fù)成分后，最終得到健脾益氣藥 46個活性成分，活血化瘀藥61個活性成分。兩種中藥共有活性成分5個，分別為FA、luteolin、perlolyrine、hederagenin、3-beta-Hydroxymethyllenetanshiquinone。進(jìn)一步檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫，選擇“Ingredients”，得到健脾益氣藥活性成分對應(yīng)靶點(diǎn)173個，活血化瘀藥活性成分對應(yīng)靶點(diǎn)103個，兩種中藥共同靶點(diǎn)93個。

2.5 KEGG通路富集分析 關(guān)鍵靶基因與KEGG通路進(jìn)行映射，共富集156條通路，根據(jù)校正后

值進(jìn)行排序，選擇前20個進(jìn)行條形圖展示(圖4)。如圖4示，健脾益氣藥和活血化瘀藥作用靶點(diǎn)涉及的通路富集主要有乙型肝炎(Hepatitis B，30個基因)、人類巨細(xì)胞病毒感染(Human cytomegalovirus infection，30個基因)、癌癥信號通路(Proteoglycans in cancer，29個基因)、血流剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化(Fluid shear stress and atherosclerosis，27個基因)、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染(Kaposi sarcoma-associated herpesvirus infection，26個基因)、Epstein-Barr virus infection(EB病毒感染，25個基因)等，且與肺癌(小細(xì)胞肺癌及非小細(xì)胞肺癌)、胰腺癌、前列腺癌、膀胱癌、胃癌、結(jié)直腸癌等多種腫瘤密切相關(guān)。

2.4 GO功能富集分析 通過關(guān)鍵靶點(diǎn)，共富集189個生物學(xué)過程和功能，根據(jù)校正后P值進(jìn)行排序，選擇前20個進(jìn)行條形圖展示(圖3)。如圖3示，健脾益氣藥和活血化瘀藥作用靶點(diǎn)GO富集排名靠前的生物學(xué)功能主要為：脫氧核糖核酸(DNA)結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子活性和核糖核酸(RNA)聚合酶Ⅱ特異性(DNA-binding transcription activator activity,RNA polymerase Ⅱ-specific，21個靶點(diǎn))、泛素樣蛋白連接酶結(jié)合(ubiquitin-like protein ligase binding，16個靶點(diǎn))、酰胺結(jié)合(amide binding，16個靶點(diǎn))，肽結(jié)合(peptide binding，15個靶點(diǎn))、核受體功能(nuclear receptor activity，13個靶點(diǎn))、轉(zhuǎn)錄因子活性(transcription factor activity，direct ligand regulated sequence-specific DNA binding，13個靶點(diǎn))等。

2 結(jié)果

1.5 構(gòu)建蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò) 利用String數(shù)據(jù)庫平臺(https://string-db.org/Version 10.5)預(yù)測蛋白相互作用關(guān)系。將中藥關(guān)鍵靶點(diǎn)導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫，將研究物種選擇為人類， 獲得蛋白質(zhì)互作關(guān)系，將結(jié)果以TSV格式導(dǎo)出。根據(jù)度值篩選出排名前20的關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白制作條形圖。

圖6中，x軸表示飽和度，y軸表示信噪比，z軸表示測距時間精度，E1、E2分別表示窗寬自適應(yīng)形心修正算法和傳統(tǒng)形心算法的最大誤差，可以看出隨著飽和度的提高，當(dāng)飽和度超出200%時，傳統(tǒng)算法的精度開始出現(xiàn)偏差，之后偏差不斷增大，不能滿足系統(tǒng)測距精度的要求；在信噪比為10 dB、飽和度為1 000%時，傳統(tǒng)形心算法的最大誤差為3.76 ns，窗寬自適應(yīng)形心修正算法最大誤差為0.3 ns，相比于傳統(tǒng)形心算法精度提高92%.

2.2 獲取肝癌相關(guān)基因和構(gòu)建韋恩圖 通過檢索OMIM和GeneCards數(shù)據(jù)庫，共篩選出14 664個肝癌相關(guān)靶點(diǎn)，與健脾益氣藥和活血化瘀藥對應(yīng)的靶點(diǎn)映射，構(gòu)建韋恩圖(圖1)。如圖1示，健脾益氣藥治療肝癌作用靶點(diǎn)161個，活血化瘀藥治療肝癌作用靶點(diǎn)95個，兩種中藥治療肝癌的共同作用靶點(diǎn)86個。

2.7 主要中藥活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白的分子對接 根據(jù)蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)，選擇度值前5的中藥活性成分槲皮素、豆甾醇、木犀草素、山奈酚、木犀草素與度值前5的關(guān)鍵靶點(diǎn)AKT1、TP53、IL-6、VEGFA、CASP3進(jìn)行分子對接驗(yàn)證。一般認(rèn)為，對接得分小于-4.25 kcal/mol表示兩者間有一定的結(jié)合活性，小于-5.0 kcal/mol表示有較好的結(jié)合活性，小于-7.0 kcal/mol表示有強(qiáng)烈的結(jié)合活性

。本研究結(jié)果顯示,5個主要中藥活性成分與5個關(guān)鍵靶點(diǎn)的對接得分均小于-5.0 kcal/mol，提示均有較好的的結(jié)合活性(表2)。其中有8組的對接得分小于-7.0 kcal/mol，得分從低到高依次為豆甾醇與AKT1、常春藤皂甙元與AKT1、木犀草素與AKT1、槲皮素與AKT1、常春藤皂甙元與CASP3、山奈酚與AKT1、常春藤皂甙元與TP53、豆甾醇與CASP3(圖7)。

對表1結(jié)果進(jìn)行分析可見，在使用二階導(dǎo)數(shù)作為數(shù)據(jù)預(yù)處理方法時，未去皮凈制樣本的平均相關(guān)系數(shù)（r）已降至50%以下；凈制完全樣本的值仍保持在97%以上；而未凈制完全樣本值已降至85%以下。故可選定二階導(dǎo)數(shù)作為求導(dǎo)處理方法。

2.6 構(gòu)建蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò) 在STRING數(shù)據(jù)庫構(gòu)建蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)(PPI)。如圖5示，此網(wǎng)絡(luò)包含169個節(jié)點(diǎn)，2 399條邊，平均節(jié)點(diǎn)度值為28.4。根據(jù)度值篩選出排名前20的關(guān)鍵靶點(diǎn)，分別是AKT1、TP53、IL-6、VEGFA、CASP3、EGFR、JUN、MAPK8、MYC、TNF(圖6)。

2.2.9.3 發(fā)病條件。禾草離蠕孢在夏季濕熱條件下侵染牧草；當(dāng)氣溫升至20 ℃左右時，只發(fā)生葉斑，隨著溫度升高，葉斑越明顯。當(dāng)氣溫升至29 ℃以上且高濕時，表現(xiàn)嚴(yán)重葉枯并出現(xiàn)莖腐、莖基腐和根腐，造成病害流行。

1.6 中藥主要活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白的分子對接 根據(jù)上述篩選出的中藥主要活性成分及關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白，從TCMSP數(shù)據(jù)庫下載中藥活性成分3D結(jié)構(gòu)。使用AutodockTools1.5.6打開配體小分子，加氫、加電荷、檢測配體的root、進(jìn)行可旋轉(zhuǎn)鍵的搜尋與定義，保存文件。從PDB數(shù)據(jù)庫(https://www.rcsb.org)下載關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白的3D結(jié)構(gòu)，使用AutodockTools1.5.6打開，添加所有的氫原子、計(jì)算Gasteiger電荷、合并非極性氫后，將其定義為受體并保存為pdbqt文件。確定Vina分子對接的坐標(biāo)和盒子大小，為了增加計(jì)算的準(zhǔn)確度，將參數(shù)exhaustiveness設(shè)置為20，除了特別說明，其他參數(shù)均采用默認(rèn)值。采用Autodock vina 1.1.2進(jìn)行半柔性對接，選取affinity最佳的構(gòu)象，作為最終的對接構(gòu)象。選取對接結(jié)合能量最低的構(gòu)象用于對接結(jié)合模式分析，并使用Pymol進(jìn)行作圖。

改革開放初期，我國食品安全監(jiān)管的重心主要放在“食品衛(wèi)生”方面。1978年，經(jīng)國務(wù)院批準(zhǔn)同意，衛(wèi)生部牽頭同其他有關(guān)部委組成“全國食品衛(wèi)生領(lǐng)導(dǎo)小組”，組織對農(nóng)業(yè)種植養(yǎng)殖、食品生產(chǎn)經(jīng)營和進(jìn)出口等環(huán)節(jié)的食品污染現(xiàn)象開展治理工作。但這一時期的監(jiān)管內(nèi)容較為簡單，種植養(yǎng)殖、生產(chǎn)加工、市場流通、餐飲消費(fèi)等方面存在的問題仍較為突出。

2.3 構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”相互作用網(wǎng)絡(luò)圖 通過String數(shù)據(jù)庫獲取中藥活性成分與肝癌相關(guān)靶點(diǎn)的相互關(guān)系，并將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.2.1軟件，構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”相互作用網(wǎng)絡(luò)圖(圖2)。網(wǎng)絡(luò)圖中紫色代表健脾益氣藥的活性成分和靶點(diǎn)，黃色代表活血化瘀藥的活性成分和靶點(diǎn)，紅色代表兩種中藥共有的活性成分和靶點(diǎn)，灰色連線代表各節(jié)點(diǎn)間的相互關(guān)系。如圖2示，該網(wǎng)絡(luò)包含273 個節(jié)點(diǎn)和1 586條邊，代表中藥活性成分171個及肝癌相關(guān)靶點(diǎn)102個。如表1示，度值(degree)前5的中藥活性成分為槲皮素(quercetin)、豆甾醇(stigmasterol)、木犀草素(luteolin)、山奈酚(kaempferol)、常春藤皂甙元(hederagenin)，其中木犀草素、常春藤皂甙元為兩種中藥共有成分。

3 討論

中醫(yī)認(rèn)為，肝癌病性屬本虛標(biāo)實(shí)，病位在肝，與脾密切相關(guān)。課題組以健脾化瘀為法，應(yīng)用健脾益氣藥與活血化瘀藥配伍，自擬參芪化瘀方用于肝癌綜合治療。參芪化瘀方主要由黨參、北芪、丹參、莪術(shù)、八月札等13味藥組成。前期臨床研究發(fā)現(xiàn)，該方能明顯改善肝癌患者經(jīng)導(dǎo)管肝動脈化療栓塞(TACE)術(shù)后的消化道反應(yīng)、骨髓抑制、肝功能損害等不良反應(yīng)，改善患者機(jī)體功能狀態(tài)，提高其生活質(zhì)量

。王俊鑌等

進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，參芪化瘀方聯(lián)合一般內(nèi)科治療，可降低肝癌患者的全血粘度、血沉、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、血小板水平等，改善患者血液高粘高凝狀態(tài)。基于臨床上健脾益氣藥與活血化瘀藥配伍治療肝癌的有效性，本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接法探索健脾益氣藥與活血化瘀藥配伍治療肝癌的活性成分和分子作用機(jī)制，試圖為參芪化瘀方的后續(xù)機(jī)制研究提供思路，為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

通過查閱各種文獻(xiàn)資料，發(fā)現(xiàn)研究農(nóng)業(yè)循環(huán)經(jīng)濟(jì)的文章并不多，且較少運(yùn)用DEA相關(guān)方法進(jìn)行研究。目前國內(nèi)外學(xué)者研究所采用的大多是傳統(tǒng)的DEA方法，較少學(xué)者使用DEA的其他研究模型，而更少有使用交叉DEA效率模型進(jìn)行農(nóng)業(yè)循環(huán)經(jīng)濟(jì)的研究者。本文通過選取湖北省13個主要市州作為目標(biāo)決策單元，運(yùn)用交叉DEA的分析方法，對各個地區(qū)的農(nóng)業(yè)循環(huán)經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平做出評價，并提出相關(guān)發(fā)展建議，從理論上為發(fā)展湖北省農(nóng)業(yè)循環(huán)經(jīng)濟(jì)提供科學(xué)性的指導(dǎo)。

本研究通過檢索數(shù)據(jù)庫，獲得健脾益氣藥和活血化瘀藥共同活性成分5個，其中木犀草素、常春藤皂甙元為兩種中藥抗肝癌共同成分。木犀草素是一種天然黃酮類化合物。楊培偉

等發(fā)現(xiàn)，木犀草素能抑制肝細(xì)胞癌的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移，對肝細(xì)胞癌有增效、增敏、減毒、抗氧化和抗突變的作用，可以通過多機(jī)制、多途徑、多靶點(diǎn)抗肝細(xì)胞癌。常春藤皂甙元是一種齊墩果烷型三萜皂苷的單體化合物。白雪

等發(fā)現(xiàn)，常春藤皂甙元在體內(nèi)和體外均具有明顯的抑制肝癌細(xì)胞生長和增殖的作用，這可能與常春藤皂甙元能夠激活細(xì)胞凋亡的線粒體途徑和死亡受體途徑密切相關(guān)。本研究獲得健脾益氣藥和活血化瘀藥治療肝癌共同作用靶點(diǎn)86個，如PTGS1、VEGFA、TP53、IL-6、IL-10等，涉及生長因子調(diào)控、腫瘤血管生成、細(xì)胞凋亡、免疫功能、炎癥反應(yīng)等方面。

GO功能富集分析包含3個部分：細(xì)胞組分、分子功能和生物過程，共確定189個條目，主要涉及轉(zhuǎn)錄相關(guān)功能、核受體功能、泛素化等生物學(xué)功能。通路富集分析共富集156條通路:與肝病直接相關(guān)的通路包括Hepatitis B、Hepatitis C、Non-alcoholic fatty liver disease 等，與炎癥相關(guān)的通路包括TNF、 HIF-1、PI3K-Akt、IL-17等，與免疫相關(guān)的通路包括JAK-STAT、NF-κB、B cell receptor、T cell receptor等。提示健脾益氣藥和活血化瘀藥通過參與調(diào)控多種生物學(xué)過程發(fā)揮抗癌作用。

通過構(gòu)建蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)，篩選出關(guān)鍵靶點(diǎn)：AKT1、TP53、IL-6、VEGFA、CASP3、EGFR、JUN、MAPK8、MYC、TNF等。研究表明，AKT1 在肝細(xì)胞癌細(xì)胞系的增殖和遷移中起重要作用

。沉默AKT1表達(dá)可能通過抑制SMMC-7721和HepG2細(xì)胞中NF-κB的激活下調(diào) MMP-2、MMP-9的表達(dá)水平和催化活性，從而抑制肝癌細(xì)胞的增殖及遷移。TP53是最早發(fā)現(xiàn)的腫瘤抑制基因之一，約20%～40%的肝癌患者檢測到TP53基因突變。TP53基因頻繁在肝癌中發(fā)生遺傳突變而失活，是導(dǎo)致肝癌發(fā)病的抑癌基因之一，并且其突變頻率與肝癌的發(fā)展階段有關(guān)

。IL-6是一種可以由多種細(xì)胞產(chǎn)生的多效應(yīng)細(xì)胞因子，IL-6基因的異常活化和 IL-6的分泌異常調(diào)節(jié)可能參與腫瘤的增殖、遷移和粘附。研究發(fā)現(xiàn)，異?；罨腏AK/STAT3信號通路參與肝癌的發(fā)生及發(fā)展。而IL-6可以激活JAK/STAT3信號通路并使STAT3發(fā)生磷酸化，進(jìn)一步調(diào)控其下游基因的轉(zhuǎn)錄，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等重要的生物學(xué)過程

。VEGFA是腫瘤血管生成中重要的因子之一，它通過與VEGF受體結(jié)合,激發(fā)一系列信號通路，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、生存和轉(zhuǎn)移，從而刺激血管的生成

。研究發(fā)現(xiàn)，VEGFA在肝癌組織和血清中呈顯著高表達(dá)并與其臨床分期和預(yù)后有關(guān),是肝癌侵襲性、肝癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)

。課題組前期免疫組化提示

，參芪化瘀方能抑制H22肝癌荷瘤小鼠腫瘤組織中VEGF、p53表達(dá)。結(jié)合本研究PPI網(wǎng)絡(luò)圖及分子對接結(jié)果，進(jìn)一步提示VEGF、p53信號通路可能是該方抗肝癌的作用機(jī)制之一。

綜上，本研究結(jié)果顯示，健脾益氣藥和活血化瘀藥的活性成分靶點(diǎn)分布于不同的通路，通過各通路協(xié)同發(fā)揮抗肝癌作用，符合抗癌中藥多成分、多途徑、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)，也提示健脾益氣藥和活血化瘀藥配伍，是以整體協(xié)同的方式發(fā)揮抗肝癌作用的。這也為我們在臨床上使用健脾益氣藥和活血化瘀藥配伍治療肝癌提供了一定的依據(jù)。通過構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”相互作用網(wǎng)絡(luò)及PPI，獲得度值前5的活性成分及靶點(diǎn)，作為中藥抗肝癌的重要成分及關(guān)鍵靶點(diǎn)，對后續(xù)機(jī)制研究及臨床應(yīng)用具有重要指導(dǎo)意義。

[1]譚明.參芪化瘀方配合TACE術(shù)治療原發(fā)性肝的療效觀察及機(jī)理探討[D].廣州中醫(yī)藥大學(xué),2009.

[2]王俊鑌.參芪化瘀方對原發(fā)性肝癌血瘀證血液流變學(xué)影響的臨床觀察[D].廣州中醫(yī)藥大學(xué),2019.

[3]耿勝男,楊莉,李陽杰等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的干姜抗癌作用機(jī)制分析[J].中藥材，2019，42(11):2659-2668.

[4]鄧燕君,劉博文,賀楨翔,等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子 對接法探索藿香正氣口服液預(yù)防新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)活性化合物研究[J].中草藥,2020,51(5):1113-1122.

[5]Kun YH,Samik G,Hiroaki K,

. Combining machine learning systems and multiple docking simulation packages to improve docking prediction reliability for network pharmacology[J].PLoS ONE,2013,8(12):e83922.

[6]楊培偉,張樹輝.木犀草素抗肝細(xì)胞癌作用及機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中藥藥理與臨床,2018,34(1):190-193.

[7]白雪.常春藤皂甙元抗肝癌作用研究[D].西北農(nóng)林科技大學(xué),2017.

[8]陳晶.靶向封閉AKT1抑制肝癌細(xì)胞增殖和遷移的研究[D].青島大學(xué),2017.

[9]段磊.MiR-146a異常表達(dá)及其單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)rs2910164與肝癌易感性的相關(guān)研究[D].武漢大學(xué),2018.

[10]Guichard,Cécile,Amaddeo G,

.Integrated analysis of somatic mutations and focal copy-number changes identifies key genes and pathways in hepatocellular carcinoma[J].Nature Genetics,2012,44(6):694-698.

[11]Fujimoto A,Totoki Y,Abe T,

.Whole-genome sequencing of liver cancers identifies etiological influences on mutation patterns and recurrent mutations in chromatin regulators[J].Nat Genet,2012,44(7):760-764.

[12]Frank S,Hussain P,Lorne J,

.TP53 and liver carcinogene-sis[J].Human Mutation,2003,21:201-216.

[13]徐倩.一個新的IL6R抗體“HC6R1”抗肝癌的研究[D].蘇州大學(xué),2016.

[14]Schroder K,Tschopp J.The inflammasomes[J].Cell,2010,140(6):821-832.

[15]何鶯華.NLRC5在肝癌細(xì)胞中對血管內(nèi)皮生長因子A(VEGF-A)的表達(dá)調(diào)控及其機(jī)制研究[D].安徽醫(yī)科大學(xué),2017.

[16]蘇宏,葉江琳,劉慧,等.參芪化瘀方對H22肝癌細(xì)胞p53基因表達(dá)的影響[J].新中醫(yī),2011,043(12):111-113.