沙 莎，陸玲波，郭培培，陳 姝，靳牧涵，徐榮耀,3

骨骼具有機(jī)械支持、保護(hù)臟器、儲(chǔ)存鈣磷、造血等功能，這些功能的維持需要骨組織處于骨形成和骨吸收的動(dòng)態(tài)平衡，即需維持骨穩(wěn)態(tài)(bone homeostasis)[1]，中老年女性在絕經(jīng)后常因雌激素水平驟降導(dǎo)致骨穩(wěn)態(tài)失衡引起骨質(zhì)疏松[2](即原發(fā)Ⅰ型骨質(zhì)疏松)。絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松主要表現(xiàn)為骨密度及骨再生能力降低，危害患者健康[3]；如累及頜骨將直接導(dǎo)致種植牙成功率下降，拔牙創(chuàng)口愈合緩慢，骨折發(fā)病率增加等[4]。因此，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松早期診斷對(duì)提高患者后續(xù)生活質(zhì)量有重要意義。目前，對(duì)骨質(zhì)疏松的診斷主要基于骨密度測(cè)定、影像學(xué)檢查及必要的生化檢查等[5]，過(guò)程較為繁瑣，有待尋找更為簡(jiǎn)單便捷的診斷方法。

所有細(xì)胞均可釋放細(xì)胞外囊泡，細(xì)胞外囊泡是由脂質(zhì)雙分子層構(gòu)成的杯狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)含許多細(xì)胞成分，包括DNA、RNA、脂質(zhì)、代謝物、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞表面蛋白等，存在于多種體液(包括血液、唾液等)中，參與各種細(xì)胞間的通信[6]；而微小RNA(microRNA, miRNA)是細(xì)胞外囊泡中主要的核酸。miRNA是一類在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)的內(nèi)源性非編碼小RNA[7]，長(zhǎng)度為18～25個(gè)核苷酸；近年來(lái)miRNA因能調(diào)控成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞和骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)生長(zhǎng)分化和衰老而在骨質(zhì)疏松的預(yù)防、診斷和治療中成為新的靶點(diǎn)[8]；同時(shí)，我們?cè)诙嗥恼轮邪l(fā)現(xiàn)miRNA-143和miRNA-145在骨質(zhì)疏松的進(jìn)程中發(fā)揮重要作用[9-11]，并在公共數(shù)據(jù)庫(kù)TAM2.0: A tool for miRNA Set Analysis (http://www.lirmed.com/tam2/)中針對(duì)骨質(zhì)疏松(osteoporosis, postmenopausal)的特征性miRNAs進(jìn)行分析，結(jié)果顯示miRNA-145與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松相關(guān)；在分析其來(lái)源上(cell specificity)，間充質(zhì)干細(xì)胞在由于衰老或絕經(jīng)導(dǎo)致的成脂分化能力增強(qiáng)的過(guò)程中，miRNA-145的表達(dá)升高，而骨髓組織作為間充質(zhì)干細(xì)胞的主要來(lái)源，進(jìn)一步提示miRNA-145的表達(dá)水平可能與骨量的變化有關(guān)。因miRNA-143和miRNA-145均位于人類第5號(hào)染色體上，兩者共用一個(gè)啟動(dòng)子和一條pri-miRNA，且被報(bào)道發(fā)揮類似的功能，故本項(xiàng)目旨在探究唾液細(xì)胞外囊泡源miRNA-143/145與雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松的發(fā)病是否具有相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

女性的牙槽骨取自2020年1月—2021年6月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院因磨牙至少缺失1年而接受牙植入術(shù)的志愿捐贈(zèng)者，共12例；在牙植入手術(shù)中，我們使用φ3.0 mm取骨環(huán)鉆獲取絕經(jīng)前后女性牙槽骨下頜第一磨牙位置對(duì)應(yīng)的缺牙區(qū)來(lái)分析松質(zhì)骨骨密度的差異，以此避免不同牙位的影響。

《中國(guó)老年骨質(zhì)疏松診療指南》指出檢測(cè)骨密度為診斷骨質(zhì)疏松癥的重要指標(biāo)之一，雖然雙能X線骨密度測(cè)量(dual X-ray absorptiometry，DXA)是診斷骨質(zhì)疏松的主要方法，但其具有局限性。首先，DXA只是一種二維(2D)技術(shù)，僅量化面積骨密度(bone mineral density, BMD)(g/cm2)，不提供體積(3D) BMD測(cè)量(mg/cm3)；其次，DXA不能提供皮質(zhì)孔隙度等骨三維微結(jié)構(gòu)的信息，也不能區(qū)分皮質(zhì)骨和骨小梁骨密度，在區(qū)分如骨質(zhì)疏松(OP)和表現(xiàn)為骨軟化(OM)的代謝性骨病方面有一定局限性[12]；另一方面，肥胖也在一定程度上降低了DXA測(cè)量的精度，減肥患者由于體重的減輕容易在DXA圖像中引起偽影[13]，這對(duì)BMD的結(jié)果產(chǎn)生了較大的影響；此外，用DXA測(cè)量老年人脊柱和髖關(guān)節(jié)骨密度時(shí)易受到某些退行性病變(如腰椎骨贅或主動(dòng)脈鈣化)的影響，從而誤將骨密度提高，低估了這些患者真正的骨折風(fēng)險(xiǎn)[14]；而定量CT作為測(cè)量真實(shí)體積骨密度的方法，能將皮質(zhì)骨和松質(zhì)骨分開(kāi)評(píng)價(jià)，不受脊椎增生退變和血管鈣化等因素影響，在測(cè)量腰椎各椎體間骨密度時(shí)準(zhǔn)確性明顯高于DXA[15]。因此本實(shí)驗(yàn)使用錐形束CT機(jī)拍攝上述12例患者的顱頜面CBCT影像，獲取第三、第四頸椎骨密度以對(duì)絕經(jīng)期前后女性骨密度進(jìn)行側(cè)面分析。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①無(wú)頜骨腫瘤或腫瘤樣病變；②未攝入影響骨代謝的藥物(糖皮質(zhì)激素、抗癲癇藥物、抗結(jié)核藥物、含鋁抗酸劑、肝素)；③無(wú)影響骨代謝和生長(zhǎng)發(fā)育的系統(tǒng)性疾病(甲狀旁腺功能亢進(jìn)、甲狀旁腺功能減退、骨軟骨病、腎性骨營(yíng)養(yǎng)不良、畸形性骨炎、成骨不全、糖尿病)；④無(wú)頸椎疾病或外傷史；⑤顱頜面CBCT影像清晰，無(wú)明顯形態(tài)和結(jié)構(gòu)異常，第三、第四頸椎輪廓清晰可辨。

同時(shí)收集因骨折、正頜、植牙或阻生牙拔除手術(shù)住院患者的血清和唾液(2018年6月—2019年6月)。中國(guó)的大部分女性絕經(jīng)期是在45～55歲，并且為了避免年齡因素造成的干擾，我們選擇9例40～45歲女性患者作為絕經(jīng)前組，10例55～60歲作為絕經(jīng)后組。對(duì)于血樣和唾液的收集，早晨在患者未進(jìn)食狀態(tài)下采集血液，血樣離心取血清樣本進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。同時(shí)，在患者清晨未進(jìn)食且未受刺激的情況下收集唾液樣本，使患者取坐位，頭稍前傾，舌頭的尖端壓在上下顎或下頜骨上，輕輕地將唾液吐到采集漏斗中，直到液體的唾液(無(wú)氣泡)達(dá)到近5 mL為止；手持唾液采集管,保持直立，另一只手按壓采集漏斗，使漏斗中的唾液流入下方采集管；旋轉(zhuǎn)漏斗,使其從下方采集管脫離，移除漏斗裝置后，取出密封蓋，旋緊蓋子，對(duì)采集到的唾液樣本進(jìn)行封存；將采集管反轉(zhuǎn)5次，使唾液和唾液保存溶液充分混合；盡快將收集好的唾液-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

CBCT影像使用和血清、唾液樣本采集均由研究對(duì)象本人知情同意并簽字，本試驗(yàn)經(jīng)南京醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(PJ2020-110-001)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

micro-CT分析 (Skyscan1176, Bruker, 比利時(shí))；NewTom VG型錐形束CT機(jī)(NewTom VG, QR s.r.1,意大利)；ELISA試劑盒(武漢優(yōu)生爾商貿(mào),中國(guó))；QIAGEN試劑盒(Valencia, CA, 美國(guó))；一體化miRNA qRT-PCR檢測(cè)試劑盒(GeneCwopole，Rockvill，美國(guó))；透射電子顯微鏡(TEM，日本電子)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 絕經(jīng)期前后女性牙槽骨樣本micro-CT圖像對(duì)比 分別取6例絕經(jīng)前后女性患者牙槽骨樣本用于micro-CT分析。在牙植入手術(shù)中，我們使用φ3.0 mm取骨環(huán)鉆獲取絕經(jīng)期前后女性牙槽骨下頜第一磨牙位置對(duì)應(yīng)的缺牙區(qū)。將牙槽骨固定于micro-CT(Skyscan1176，Kontich，比利時(shí))樣本臺(tái)進(jìn)行掃描獲得圖像，掃描條件：電壓為50 kV，電流為456 μA，掃描層厚為18 μm。將掃描所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入NReconv1.6和CTAnv1.13.8.1軟件，重建和分析骨骼的三維圖像。

1.3.2 檢測(cè)絕經(jīng)期前后女性頸椎骨密度 根據(jù)中國(guó)最新定量CT診斷指南(BMD>120 mg/cm3，正常；80 mg/cm3

1.3.3 檢測(cè)血清樣本中雌激素水平 采用ELISA法檢測(cè)血清樣本中雌激素水平，相關(guān)操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.4 提取血清和唾液中細(xì)胞外囊泡 使用超速離心法提取血清和唾液中的細(xì)胞外囊泡。將血清樣本移至新的離心管內(nèi)，2 000×g，4 ℃，30 min離心；取離心獲得的上清液，12 000×g，4 ℃，45 min第2次離心；將第2次離心獲得的上清液通過(guò)0.45 μm濾膜過(guò)濾；取過(guò)濾液移至新離心管中， 110 000×g，4 ℃，70 min超速離心；棄上層清液，用PBS重懸沉淀，再次110 000×g，4 ℃，70 min超速離心；離心后棄去上清液，所得沉淀即為血清細(xì)胞外囊泡，用PBS重懸后，-80 ℃保存。取3 mL收集的唾液于離心管中，加入30 mL生理鹽水稀釋后，重復(fù)上述從血清樣本中提取細(xì)胞外囊泡的步驟從唾液中提取細(xì)胞外囊泡。

1.3.5 觀察提取的細(xì)胞外囊泡 取先前分離的細(xì)胞外囊泡懸液(約10 μL)，當(dāng)沉淀后去除浮液，常溫干燥數(shù)分鐘，采用透射電子顯微鏡(TEM)在80 kV下拍攝電鏡照片，觀察細(xì)胞外囊泡形態(tài)。

1.3.6 檢測(cè)血清和唾液樣本中miRNA-143/145水平 根據(jù)QIAGEN試劑盒說(shuō)明書(shū)提取血清和唾液細(xì)胞外囊泡中的miRNA-143/145，再用一體化miRNA qRT-PCR檢測(cè)試劑盒(GeneCwopole，Rockvill，美國(guó))進(jìn)行純化檢測(cè)。由于在miRNA的檢測(cè)過(guò)程中缺乏穩(wěn)定并且公認(rèn)的內(nèi)參基因，故在miRNA提取時(shí)加入ce-miR-39作為外參基因，以標(biāo)準(zhǔn)化miRNA的表達(dá)。采用2-ΔΔCT方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，表示miRNA-143/145的表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。試驗(yàn)至少獨(dú)立重復(fù)3次。兩組間數(shù)據(jù)比較采用Studentt檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 絕經(jīng)后女性骨密度下降，呈現(xiàn)骨質(zhì)疏松的趨勢(shì)

通過(guò)micro-CT對(duì)比分析絕經(jīng)期前后女性牙槽骨樣本發(fā)現(xiàn)，絕經(jīng)后骨皮質(zhì)厚度沒(méi)有明顯的變化，但松質(zhì)骨的骨小梁數(shù)目減少、變細(xì)變薄，小梁間隙變寬(圖1)。通過(guò)對(duì)松質(zhì)骨進(jìn)行骨參數(shù)分析結(jié)果顯示，BV/TV和BMD的值都呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)(圖2)。

圖1 絕經(jīng)期前后女性牙槽骨micro-CT影像圖Fig.1 Micro-CT images of alveolar bone in premenopausal and postmenopausal women

2.2 雌激素水平下降時(shí)，骨密度水平也下降

分析19例絕經(jīng)前后女性樣本中的雌激素水平與骨密度的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)當(dāng)雌激素水平下降時(shí)，骨密度水平也下降(圖3)。

圖3 雌激素水平與骨密度水平呈正相關(guān)Fig.3 Estrogen levels are positively correlated with BMD levels

2.3 透射電鏡下觀察血清和唾液中細(xì)胞外囊泡形態(tài)

通過(guò)透射電鏡對(duì)細(xì)胞外囊泡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，可以清晰地看到從血清中提取的細(xì)胞外囊泡為雙層膜樣結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)較均勻的杯狀，直徑在100～140 nm(圖4A)。進(jìn)一步觀察稀釋唾液中提取的細(xì)胞外囊泡，雖可見(jiàn)唾液中的一些其他雜質(zhì)，但總體上可以清晰看到細(xì)胞外囊泡呈較均勻杯狀的雙層膜樣結(jié)構(gòu)，直徑在100～200 nm(圖4B)。

*：P<0.05

A：血清中細(xì)胞外囊泡(紅色三角所指)；B：稀釋唾液中細(xì)胞外囊泡(紅色三角所指)

2.4 血清中的miRNA-143/145水平與雌激素水平呈負(fù)相關(guān)

檢測(cè)19例絕經(jīng)前后女性血清樣本中的雌激素水平以及血清細(xì)胞外囊泡中的miRNA-143/145水平，發(fā)現(xiàn)血清中miRNA-143水平隨著雌激素水平的下降而顯著上升(圖5A);與此同時(shí)，miRNA-145水平也隨著雌激素水平的下降而顯著上升(圖5B)，即miRNA-143和miRNA-145水平均與雌激素水平呈負(fù)相關(guān)。

A：血清中miRNA-143含量與雌激素呈負(fù)相關(guān)；B：血清中miRNA-145含量與雌激素呈負(fù)相關(guān)

2.5 唾液miRNA-143/145水平與雌激素水平呈負(fù)相關(guān)

檢測(cè)上述唾液樣本細(xì)胞外囊泡中的miRNA-143/145水平，發(fā)現(xiàn)當(dāng)雌激素缺乏時(shí)，miRNA-143水平較高(圖6A)，而miRNA-145也處于較高的表達(dá)狀態(tài)(圖6B)，說(shuō)明在唾液樣本中miRNA-143/145水平也與雌激素水平呈負(fù)相關(guān)，與血清樣本中細(xì)胞外囊泡的檢測(cè)結(jié)果具有良好的一致性。

3 討 論

雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松是女性在絕經(jīng)期后由于雌激素水平驟降，破骨細(xì)胞增殖分化活躍、凋亡減弱、活性增強(qiáng)，成骨細(xì)胞增殖分化減少、活性下降，導(dǎo)致骨穩(wěn)態(tài)失衡、骨內(nèi)部結(jié)構(gòu)紊亂及骨量丟失引起的骨質(zhì)疏松[16]；早期因無(wú)明顯癥狀易被忽視，但隨著病情的進(jìn)展、骨量的不斷丟失，患者易感乏力骨痛，在跌倒摔落等意外情況發(fā)生時(shí)極易骨折[17]，甚至在后期可出現(xiàn)駝背等脊柱嚴(yán)重畸形的情況。柴波等[18]研究結(jié)果表明我國(guó)50～59歲絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松癥的患病率約為20.38%， 因此， 對(duì)雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松的及時(shí)診斷顯得尤為重要。

A：唾液中miRNA-143含量與雌激素呈負(fù)相關(guān)；B：唾液中miRNA-145含量與雌激素呈負(fù)相關(guān)

本試驗(yàn)通過(guò)觀察絕經(jīng)期前后女性牙槽骨micro-CT影像學(xué)結(jié)果，檢測(cè)骨密度和雌激素水平，對(duì)比分析血清和唾液中miRNA-143/145水平與雌激素的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)女性絕經(jīng)期后隨著雌激素水平的下降，骨密度水平也下降，而血清和唾液中miRNA-143/145水平均隨著雌激素水平的下降上升。Weivoda等[8]的研究也證實(shí)miRNAs可與多個(gè)調(diào)控成骨和破骨相關(guān)的基因結(jié)合，在翻譯水平調(diào)控基因的表達(dá)，從而參與骨骼的發(fā)育、穩(wěn)態(tài)和老化等生物過(guò)程，提示miRNA-143/145檢測(cè)對(duì)雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松有一定臨床診斷價(jià)值。但血清或唾液中游離的miRNAs極不穩(wěn)定，易被RNA酶部分降解，所以在本試驗(yàn)中我們研究細(xì)胞外囊泡中的miRNA。

研究表明，細(xì)胞外囊泡由多種細(xì)胞分泌，并釋放到細(xì)胞外，以胞吞轉(zhuǎn)運(yùn)的方式穿過(guò)如血腦屏障等上皮屏障，幫助運(yùn)輸一些系統(tǒng)來(lái)源的分子成分(包括許多類型的DNA、RNA、蛋白質(zhì)等)從血液進(jìn)入唾液?；谄淦鹪匆约拜^小的尺寸，細(xì)胞外囊泡參與許多信息傳遞的過(guò)程，包括細(xì)胞內(nèi)通信、程序性細(xì)胞死亡、血管生成、免疫反應(yīng)、細(xì)胞和組織穩(wěn)態(tài)、炎癥、凝血、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化等，與細(xì)胞生理和病理過(guò)程相關(guān)[19]。由于細(xì)胞外囊泡為脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，不易被降解且能夠保護(hù)其內(nèi)容物免受RNase損傷和其他因素的干擾，所以不僅細(xì)胞外囊泡中的miRNA更加穩(wěn)定、豐度較高[20]，并且細(xì)胞外囊泡本身在循環(huán)中高度穩(wěn)定[21]，其內(nèi)容物和含量的變化多由特定的生理病理?xiàng)l件所引起，因此可以更靈敏地反映受檢者的生理病理狀態(tài)。

人體唾液大部分為水分，還有黏多糖、黏蛋白、唾液淀粉酶、溶菌酶、過(guò)氧化物酶等多種有機(jī)物以及鈉、鉀、鈣、氯、碳酸氫根等無(wú)機(jī)物。由于唾液具有與外界、日常飲食直接相通的特點(diǎn)，唾液中的內(nèi)容物會(huì)受細(xì)菌、飲食等各種因素的影響，其中游離的分子成分也較容易被降解，對(duì)于定性定量而言是一個(gè)難題[22]。本試驗(yàn)選擇提取唾液中的細(xì)胞外囊泡，這樣在一定程度上降低了唾液本身內(nèi)容物的復(fù)雜性，又減少了細(xì)菌等雜質(zhì)來(lái)源的干擾；同時(shí)，又因?yàn)榧?xì)胞外囊泡本身為脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)，能夠保證其內(nèi)miRNA含量的穩(wěn)定性，免受RNase損傷和其他因素的干擾。與游離的miRNA檢測(cè)相比，結(jié)果更加穩(wěn)定可靠，所以唾液細(xì)胞外囊泡中miRNA表達(dá)更多反映的是受檢者的生理病理狀態(tài)，而非飲食、細(xì)菌等因素的影響。此外，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)唾液樣本與血清樣本中miRNA-143/145的檢測(cè)結(jié)果具有良好的一致性，而相較于采集血樣，采集唾液有如下優(yōu)點(diǎn)：①采樣具有無(wú)創(chuàng)性，易于重復(fù)多次采樣；②采樣流程較簡(jiǎn)單，易于操作；③采集的唾液易于處理和儲(chǔ)存，張春紅等[23]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)大范圍收集樣本時(shí)，唾液樣本更適合在多個(gè)實(shí)驗(yàn)室和收集點(diǎn)之間傳送，更有利于跨實(shí)驗(yàn)室間的合作?；谏鲜鰞?yōu)點(diǎn)，提出可通過(guò)采集唾液以代替采集血樣進(jìn)行檢測(cè)，并且可以考慮建立范圍更大、覆蓋更廣的唾液樣本庫(kù)，進(jìn)一步研究雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松時(shí)miRNA-143/145的變化水平，提高通過(guò)miRNA-143/145水平診斷雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松的準(zhǔn)確性。

唾液檢測(cè)提供了一種新的、非侵入性的、更為簡(jiǎn)單的方法來(lái)幫助診斷雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松。人體口腔頜面部作為全身礦化組織最多的區(qū)域，骨質(zhì)疏松也會(huì)引起頜骨骨量減少、骨密度下降、骨微觀結(jié)構(gòu)破壞以及牙槽骨吸收等情況的發(fā)生[24]，可能會(huì)影響牙齒的牢固性而引發(fā)松動(dòng)，若病情進(jìn)一步發(fā)展，牙齒最終會(huì)脫落，導(dǎo)致咀嚼功能的喪失和語(yǔ)音功能的損害。長(zhǎng)期牙列缺損將導(dǎo)致牙槽嵴低平，加大了對(duì)絕經(jīng)后女性進(jìn)行正畸治療的難度[25]。當(dāng)頜骨骨密度下降時(shí)，還會(huì)對(duì)口腔微環(huán)境造成影響，加快牙周炎致病菌的生長(zhǎng)繁殖，引起牙周炎的持續(xù)感染；孫鵬飛等[26]研究發(fā)現(xiàn)骨質(zhì)疏松者較正常人更易患牙周炎。此外，在對(duì)缺失牙的種植修復(fù)過(guò)程中，低于正常水平的骨密度可能會(huì)影響種植體植入初期的穩(wěn)定性，造成種植體骨整合質(zhì)量下降，后期易松動(dòng)脫落，也有造成種植體邊緣性骨吸收的風(fēng)險(xiǎn)[27]。因此，及時(shí)診斷雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松并加以治療，對(duì)于牙周病的防治、種植牙成功率的提高、骨皮質(zhì)切開(kāi)術(shù)的療效、頜面部手術(shù)后骨缺損的再生等方面有較大幫助。

綜上所述，本研究結(jié)果表明唾液細(xì)胞外囊泡中miRNA-143/145水平與雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松有一定聯(lián)系，通過(guò)檢測(cè)其水平來(lái)診斷雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松不失為一種更安全便捷的診斷方式，未來(lái)在雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松的診斷中也許有更光明的應(yīng)用前景。