■呂 斌 葉元土* 易皓明 馬 杰 王卓君 吳代武 唐 峰 浦琴華

（1.蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，江蘇 蘇州 215123；2.浙江豐宇海洋生物制品有限公司，浙江 舟山 316000；3.浙江一星實(shí)業(yè)股份有限公司，浙江 嘉興 314300）

我國(guó)擁有的漫長(zhǎng)海岸線以及廣闊的海域，提供了豐富的海藻資源，與常規(guī)植物原料相比，海藻不占用土地資源，其栽培面積和產(chǎn)量位居世界前列。一般根據(jù)海藻所含色素的不同，可將其分為綠藻、褐藻、藍(lán)藻等，其中馬尾藻（Scagassum）屬褐藻門、墨角藻目、馬尾藻科，是暖溫帶多年生海藻，藻體中不僅含有豐富的碳水化合物（多酚類、褐藻膠、甘露醇、淀粉多糖等）、蛋白質(zhì)、脂肪酸以及碘、鉀、鈉、鎂、鈣、錳、硒等礦物質(zhì)和種類繁多的維生素，其中，褐藻糖膠和淀粉等多糖均具有清除自由基的能力和抗氧化作用[1]，這些營(yíng)養(yǎng)因子在提高機(jī)體免疫力、促進(jìn)生長(zhǎng)方面起著重要作用[2]，且蛋白質(zhì)、脂肪酸、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分可以提高飼料的營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量，達(dá)到兼具營(yíng)養(yǎng)和免疫的雙重功效。在飼料中添加1%的復(fù)合微藻可顯著提高半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）的生長(zhǎng)性能[3]。在花鱸（Lateolabrax maculatus）飼料中添加4%～5%的螺旋藻能顯著促進(jìn)生長(zhǎng)，提高腸道蛋白酶活性，增強(qiáng)免疫力[4]。王子魚（Labidochromis caeruleus）飼料中添加1%的裂壺藻不僅促進(jìn)魚體生長(zhǎng)，還具有良好的增色作用[5]。因此海洋中的藻類在魚類生長(zhǎng)中有著重要的作用。

然而，馬尾藻中存在大量的海藻酸、褐藻膠、多糖，其結(jié)構(gòu)致密、水溶性差，存在藻膠黏性，阻礙了組織間營(yíng)養(yǎng)成分和活性物質(zhì)的溶出，熱提取、酸堿提取、酶解提取、超聲波提取和發(fā)酵等方法可以有效提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用效率[6]，酶解法具有水解位點(diǎn)專一、高效、反應(yīng)溫和等優(yōu)勢(shì)，符合實(shí)際生產(chǎn)需求。采用酶解技術(shù)將馬尾藻粉中的纖維質(zhì)和果膠質(zhì)水解，提取出細(xì)胞間質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)，再通過(guò)濾膜系統(tǒng)分離純化得到馬尾藻粉（Scagassumpowder，SP）、馬尾藻提取物（Scagassumpowder extract A，SPE-A）和馬尾藻渣（Scagassumpowder extract B，SPE-B）。本試驗(yàn)以黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）為研究對(duì)象，在日糧中添加SP、SPE-A 和SPE-B，研究其對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)性能、腸胃組織酶活性、血清生化指標(biāo)以及體組成的影響，通過(guò)生長(zhǎng)表現(xiàn)判斷發(fā)揮功效的營(yíng)養(yǎng)成分，探究了黃顙魚飼料中添加馬尾藻的可行性，為有效提高海藻資源利用途徑，以及馬尾藻資源在黃顙魚飼料中的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)原料

試驗(yàn)所用魚粉均為秘魯超級(jí)蒸汽魚粉，其原料魚主要為秘魯鳀魚（Peruvian anchovy），SP、SPE-A 和SPE-B 均為浙江豐宇海洋生物制品有限公司提供。其生產(chǎn)工藝為：以東海海域的馬尾藻為原料，將新鮮的馬尾藻在蒸煮機(jī)中經(jīng)90～100 ℃烘干40 min，烘干后轉(zhuǎn)入超微粉碎機(jī)進(jìn)行超微粉碎，過(guò)80 目除去大顆粒雜質(zhì)得到SP；馬尾藻粉轉(zhuǎn)入酶解反應(yīng)釜，在50～55 ℃下，用復(fù)合蛋白酶（纖維素酶、果膠酶、海藻酸裂解酶）酶解2 h，轉(zhuǎn)入終止反應(yīng)釜加溫至105 ℃進(jìn)行酶滅活、滅菌1 h 得到酶解液，酶解液經(jīng)300 目板框壓濾，濾液經(jīng)濃縮、凍干后得到SPE-A，而濾渣經(jīng)濃縮、凍干后得到SPE-B。

魚粉、SP、SPE-A 和SPE-B 4 種原料營(yíng)養(yǎng)成分如表1 所示。與魚粉相比，SP、SPE-A 和SPE-B 的粗蛋白和粗脂肪含量明顯降低，而灰分含量增加，SPE-B的游離氨基酸含量低于SP和SPE-A。

表1 原料營(yíng)養(yǎng)成分組成（濕重基礎(chǔ)，%）

1.2 試驗(yàn)飼料

日糧營(yíng)養(yǎng)水平按照等氮等脂要求設(shè)計(jì)，試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表2所示。以15.0%超級(jí)蒸汽魚粉（FM）為對(duì)照組，在試驗(yàn)日糧中分別添加1%SP、0.5%SPE-A和1% SPE-B，共設(shè)計(jì)4組試驗(yàn)日糧。

表2 試驗(yàn)日糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)，%）

日糧所有原料經(jīng)粉碎后過(guò)60目篩，各種原料稱量后逐級(jí)混勻，加入豆油和適量水在攪拌機(jī)中混勻，用制粒機(jī)加工成直徑1.5 mm、長(zhǎng)度2～4 mm 的顆粒飼料。飼料風(fēng)干后放入密封袋中，置于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。原料的水解氨基酸、游離氨基酸和日糧游離氨基酸的組成如表3所示。4組試驗(yàn)日糧在游離氨基酸組成和含量方面沒有顯著差異。

表3 原料的水解氨基酸、游離氨基酸和日糧游離氨基酸的組成(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.3 試驗(yàn)魚養(yǎng)殖與飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在浙江一星實(shí)業(yè)股份有限公司的養(yǎng)殖基地中進(jìn)行，在總面積為40 m×60 m的養(yǎng)殖池塘中設(shè)置試驗(yàn)網(wǎng)箱（長(zhǎng)1.5 m×寬1.5 m×深2 m）12個(gè)，以海鹽縣長(zhǎng)山河為水源，養(yǎng)殖期間水溫一直保持在24～35 ℃。每5 d測(cè)定水下30 cm處的水質(zhì)指標(biāo)。養(yǎng)殖周期內(nèi)水體溶解氧＞6 mg/L，pH 8.0～8.4，氨氮濃度＜0.10 mg/L，亞硝酸鹽濃度＜0.005 mg/L，硫化物濃度＜0.05 mg/L。

試驗(yàn)用黃顙魚幼魚購(gòu)于浙江省湖州農(nóng)業(yè)合作社，選取其中規(guī)格整齊、體色健康和體重為（14.23±0.06）g的黃顙魚幼魚480尾，隨機(jī)分成4組，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)（n=3），每個(gè)網(wǎng)箱40尾。日投喂2次（06：00—08：00和16：30—18：30），日投喂量為黃顙魚體重的3%～5%，試驗(yàn)期60 d。

1.4 樣品采集

在正式養(yǎng)殖試驗(yàn)開始前，從黃顙魚魚苗中隨機(jī)抽取10 尾黃顙魚，作為初始魚樣本進(jìn)行全魚常規(guī)體成分分析。

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后禁食24 h采樣：①對(duì)每個(gè)網(wǎng)箱中的黃顙魚進(jìn)行稱重、計(jì)數(shù)和長(zhǎng)度測(cè)量，用于計(jì)算黃顙魚的存活率、特定生長(zhǎng)率、肥滿度和飼料系數(shù)；②從每個(gè)網(wǎng)箱中選取黃顙魚4 尾于-50 ℃冰柜中冷凍保存，用于常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定，計(jì)算蛋白質(zhì)沉積率和脂肪沉積率；③從每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)抽取10尾魚，用1 mL無(wú)菌注射器從尾柄采血，置于2 mL Eppendorf 管中，在室溫條件下靜置3 h 后，用離心機(jī)以3 500 r/min 離心10 min，取上層血清0.2 mL于0.5 mL Eppendorf管中，用液氮迅速冷卻后于-50 ℃冰箱保存，用于血清生化指標(biāo)分析；④從每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)選取10尾魚，采集魚的肝臟、腸道、胃等組織，用液氮迅速冷卻后于-50 ℃冰箱保存，用于組織酶活性測(cè)定。

1.5 樣品分析

將冷凍保存的全魚樣品解凍，按比例加水后用粉碎機(jī)低溫粉碎均勻，采用低溫真空冷凍干燥法測(cè)定樣品水分含量（LGJ-18B 型冷凍干燥機(jī)，北京四環(huán)科學(xué)儀器有限公司）；日糧和樣品中蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測(cè)定（GB 5009.5—2010；所用消化儀：LNK 87型，江蘇省宜興市科教儀器研究所）；粗脂肪含量采用石油醚索氏抽提法測(cè)定（GB/T 14772—2008；所用儀器：KN 520型，濟(jì)南阿爾瓦儀器有限公司）；用馬弗爐測(cè)定樣品灰分含量（GB 5009.4—2010；8-10TP 型，上?；厶﹥x器制造有限公司）；采用分光光度法（ISO 6491—1998；L2S 型，上海儀電有限公司）測(cè)定原料和日糧中總磷的含量；游離氨基酸使用S-433D 氨基酸分析儀（Sykam 公司）分離測(cè)定。血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性以及高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、膽固醇（CHOL）、三酰甘油（TG）含量采用雅培C800全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。脂肪酶（LPS）、淀粉酶（AMS）、胃蛋白酶（PPS）、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性，總抗氧化能力（T-AOC），丙二醛（MDA）含量均采用南京建成生物工程研究所有限公司試劑盒檢測(cè)。

1.6 指標(biāo)測(cè)定

式中：Nt——試驗(yàn)?zāi)S顙魚數(shù)量（尾）；

N0——試驗(yàn)初黃顙魚數(shù)量（尾）；

Wt——試驗(yàn)?zāi)w均重（g）；

W0——試驗(yàn)初體均重（g）；

t——試驗(yàn)天數(shù)（d）；

F——每尾魚平均總攝食量（g）；

Wpt——試驗(yàn)?zāi)w蛋白含量（g）；

Wp0——試驗(yàn)初體蛋白含量（g）；

Wp——每尾魚攝入的試驗(yàn)日糧總蛋白含量（g）；

Wft——試驗(yàn)?zāi)w脂肪含量（g）；

Wf0——試驗(yàn)初體脂肪含量（g）；

Wf——每尾魚攝入的試驗(yàn)日糧總脂肪含量（g）；

Wb——每尾魚末體重（g）；

L——每尾魚末體長(zhǎng)（cm）；

Wz——每尾魚試驗(yàn)?zāi)└我扰K均重（g）；

Wv——每尾魚試驗(yàn)?zāi)﹥?nèi)臟團(tuán)均重（g）。

1.7 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD，n=3）”表示，采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析（oneway ANOVA，LSD），同時(shí)利用Duncan’s法比較分析各組間的數(shù)據(jù)。差異顯著性水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)速度和飼料系數(shù)的影響（見表4）

如表4所示，黃顙魚的成活率為94.29%～99.05%，各組間無(wú)顯著差異（P＞0.05），表明在飼料中添加3 種馬尾藻原料后對(duì)黃顙魚的成活率沒有影響。

表4 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)速度和飼料系數(shù)的影響(n=3)

與FM對(duì)照組相比，SP組和SPE-A組的SGR分別上升了4.19%和5.24%，F(xiàn)CR 分別下降了5.45%和6.73%，而SPE-B組的SGR下降了8.38%，F(xiàn)CR上升了17.31%，均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。用PRR和FRR代表黃顙魚對(duì)飼料蛋白和脂肪的利用效率，SP組、SPE-A組和WSP-B組的PRR與FM對(duì)照組相比，均無(wú)顯著差異（P＞0.05），SP組和SPE-A組的FRR出現(xiàn)下降趨勢(shì)，差異不顯著（P＞0.05），SPE-B組的FRR顯著下降（P＜0.05）。

上述結(jié)果表示，在黃顙魚飼料中添加SP 和SPEA 可以使黃顙魚的生長(zhǎng)速度增強(qiáng)，飼料系數(shù)降低，而添加SPE-B導(dǎo)致了黃顙魚生長(zhǎng)性能的下降。

2.2 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚血清生化指標(biāo)的影響（見表5）

表5 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚血清生化指標(biāo)的影響(n=3)

如表5 所示。與肝功能相關(guān)的血清生化指標(biāo)顯示，與FM對(duì)照組相比，SP組和SPE-A組的ALB和GLB含量上升，其中SP組的ALB含量顯著上升（P＜0.05），SPE-B 組的ALB 和GLB 含量下降，差異不顯著（P＞0.05），SP組、SPE-A組和SPE-B組的ALT、AST和ASP活性均表現(xiàn)出下降，其中SP組的ALT、AST、ASP活性和SPE-B組的AST活性顯著下降（P＜0.05）。

與血脂代謝功能相關(guān)的血清生化指標(biāo)顯示，與FM 對(duì)照組，SP 組、SPE-A 組和SPE-B 組的CHOL 和HDL 含量變化不顯著（P＞0.05），SP 組的TG 和LDL 含量顯著上升（P＜0.05），SPE-A 組和SPE-B 組的TG 和LDL含量上升，差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚組織酶活性的影響（見表6）

如表6 所示，胃部組織中，與FM 對(duì)照組相比，SP組、SPE-A 組和SPE-B 組的LPS 活性顯著上升（P＜0.05），PPS活性差異不顯著（P＞0.05）。SP組和SPE-B組的AMS 活性相比FM 組顯著上升（P＜0.05）。在腸道組織中，與FM 對(duì)照組相比，SP 組的LPS 活性和SPE-B組的AMS活性顯著上升（P＜0.05）。

表6 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚組織酶活性的影響(n=3)

在肝臟組織中，SP組、SPE-A組和SPE-B組的GSH和MDA 含量相比FM 對(duì)照組均顯著下降（P＜0.05），SPE-A組和SPE-B組的T-AOC和CAT活性顯著下降（P＜0.05），SPE-B組的SOD活性也顯著下降（P＜0.05），此外試驗(yàn)組其余酶活性與對(duì)照組相比均差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚的體組成和形態(tài)指標(biāo)的影響（見表7）

如表7 所示，在飼料中添加SP、SPE-A 和SPE-B后，魚體的水分和粗蛋白含量上升，粗脂肪含量下降，差異均不顯著（P＞0.05），SP 組、SPE-A 組和SPEB 組的灰分含量也呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，其中SPE-B 組差異顯著（P＜0.05）。肝臟組織中，SPE-B 組的粗蛋白含量下降（P＜0.05），SP 組和SPE-A 組的粗脂肪含量顯著下降（P＜0.05）。

表7 馬尾藻添加物對(duì)黃顙魚體成分和形態(tài)指標(biāo)的影響(n=3)

在形體指標(biāo)方面，與FM對(duì)照組相比，SP組、SPEA 組和SPE-B 組的HSI 顯著增加（P＜0.05），VSI 無(wú)顯著變化（P＞0.05），SPE-B組的CF顯著下降（P＜0.05）。

3 討論

目前較多相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)告了海藻添加劑在飼料中的應(yīng)用，并且不同海藻對(duì)不同魚類的生長(zhǎng)具有顯著影響。馬尾藻中含有的蛋白質(zhì)（藻膽蛋白）、多酚（如褐藻多酚）、海藻多糖（如海藻酸鹽、巖藻聚糖）、類胡蘿卜素（如巖藻黃質(zhì)）以及其他萜烯等物質(zhì)在抗菌、抗炎、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)中具有重要作用[7-8]。此外，馬尾藻中含有豐富的碘化物、礦物質(zhì)、維生素及未知的可刺激動(dòng)物生長(zhǎng)的活性物質(zhì)，這類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要以易于吸收的無(wú)機(jī)態(tài)形式存在[9]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，日糧中添加1% SP和0.5% SPE-A的黃顙魚特定生長(zhǎng)率分別提高了4.19%和5.24%，而添加SPE-B 的黃顙魚特定生長(zhǎng)率降低了8.38%。在先前試驗(yàn)中分析得出褐藻酸鉀、海藻多糖、寡糖、甘露醇是酶解海帶的主要成分，褐藻酸鉀能與陽(yáng)離子反應(yīng)形成交聯(lián)鍵，產(chǎn)生凝膠體固定原料物質(zhì)，從而加強(qiáng)飼料密度和耐水性，提高飼料的利用效率[6]。SP、SPE-A 和SPE-B 原料中的水解氨基酸和游離氨基酸組成如表3所示，SPE-B 的水解氨基酸和游離氨基酸含量均低于SPE-A 和SP，且關(guān)于魚粉游離氨基酸模式的相關(guān)度也較低；另一方面在日糧游離氨基酸組成方面，3 種馬尾藻原料均以低劑量添加到日糧中，SP組、SPE-A組和SPE-B組的試驗(yàn)日糧中游離氨基酸含量與FM 組相比均無(wú)顯著差異，并且與FM 對(duì)照組游離氨基酸組成模式的相關(guān)系數(shù)分別為0.987 4、0.985 4 和0.986 7，因此游離氨基酸是否是導(dǎo)致試驗(yàn)黃顙魚生長(zhǎng)表現(xiàn)出差異的主要因子有待進(jìn)一步討論。這些方面都可能是影響黃顙魚生長(zhǎng)的重要因素。

關(guān)于海藻添加劑的促生長(zhǎng)作用機(jī)制已有較多報(bào)告，Thepot等[10]對(duì)褐籃子魚（Siganus fuscescens）的研究報(bào)道，飼料中添加不同形式的海藻提取物（全藻、乙醇提取物和提取物殘?jiān)┖笤囼?yàn)魚特定生長(zhǎng)率最高提升了49%，后腸微生物組成結(jié)構(gòu)中潛在致病性桿菌豐度降低且魚體先天免疫反應(yīng)增強(qiáng)。Jahromi 等[11]在凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）的研究中，發(fā)現(xiàn)飼喂馬尾藻能顯著降低三酰甘油、總活菌數(shù)和弧菌數(shù)，提高血細(xì)胞數(shù)量。表明不同的馬尾藻組分對(duì)魚類的生長(zhǎng)表現(xiàn)效果不同，其作用機(jī)制表現(xiàn)在許多方面，且藻類中還普遍存在一些如二甲基-β-丙酸噻亭（DMPT）、牛磺酸、谷氨酸等具有誘食作用的物質(zhì)，這些成分通過(guò)刺激魚類的化學(xué)感覺器官，促使神經(jīng)中樞釋放促食因子，提高魚類采食量。有研究表明濕法加熱、用水提取等方法可以有效降低植物性原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子[12]，并且蛋白水解法可有效提高蛋白質(zhì)提取率和內(nèi)源性消化能力[13]。SP、SPE-A和SPE-B三者在營(yíng)養(yǎng)組成上存在的巨大差異，如表1中所示，3種原料中粗脂肪含量極少，SPE-A的粗蛋白、灰分和鹽分含量高于SP和SPE-B，根據(jù)工藝和常規(guī)成分推測(cè)馬尾藻提取物中礦物鹽、維生素等可溶性物質(zhì)含量較多，而馬尾藻渣中纖維素、半纖維素等不溶性物質(zhì)含量高。有研究指出添加石莼（Ulva rigida）可以增強(qiáng)金鼓魚（Scatophagus argus）幼魚的食欲從而提高生長(zhǎng)性能[14]。SPE-B組黃顙魚的生長(zhǎng)性能下降，這可能與馬尾藻未過(guò)濾其中含有較多的皂苷單寧、植酸、棉酚等抗?fàn)I養(yǎng)因子有關(guān)，降低了飼料的誘食效果[15]，導(dǎo)致攝食率和生長(zhǎng)性能的下降，這可能是影響黃顙魚生理和生長(zhǎng)發(fā)生變化的主要差異。

血清生化指標(biāo)可以反映魚體的營(yíng)養(yǎng)代謝和健康程度，谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶作為魚體內(nèi)氨基酸代謝的兩種重要酶類，反映著魚體肝臟的健康狀況。正常情況下，血液中轉(zhuǎn)氨酶活性保持在一個(gè)正常的合理范圍內(nèi)，當(dāng)肝臟受到外界損傷導(dǎo)致炎癥、壞死、中毒等病癥出現(xiàn)時(shí)，肝臟會(huì)分泌大量的轉(zhuǎn)氨酶釋放到血液中，引起血液中轉(zhuǎn)氨酶含量上升[16]。另一方面，谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶作為肝臟中主要的氨基轉(zhuǎn)移酶，發(fā)揮著催化蛋白質(zhì)水解的作用，與機(jī)體的氨基酸代謝密切相關(guān)，研究證明肝臟中蛋白酶活性和轉(zhuǎn)氨酶活性的升高，可能與動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)的吸收和氨基酸的代謝旺盛有關(guān)，也表明了動(dòng)物對(duì)飼料中的蛋白質(zhì)利用率加強(qiáng)[17]。有研究發(fā)現(xiàn)，高劑量的雞肉粉引起血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的升高，認(rèn)為肝臟中蛋白質(zhì)代謝活動(dòng)加強(qiáng)而對(duì)魚體肝臟造成損傷[18-19]。本試驗(yàn)在日糧中添加馬尾藻后，相比對(duì)照組魚體血清轉(zhuǎn)氨酶活性下降，證明馬尾藻可以有效減輕高蛋白飼料對(duì)肝臟帶來(lái)的代謝壓力，崔培等[5]對(duì)王子魚（Labidochromis caeruleus）的研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加裂壺藻、鹽藻和小球藻后血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性也呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)，與本研究結(jié)果一致。膽固醇和三酰甘油作為脂質(zhì)代謝的主體，高密度脂蛋白和低密度脂蛋白作為膽固醇體內(nèi)運(yùn)輸?shù)某袚?dān)者，高密度脂蛋白負(fù)責(zé)將膽固醇從外周組織運(yùn)輸回肝臟進(jìn)行代謝，而低密度脂蛋白負(fù)責(zé)將膽固醇從肝臟向外周轉(zhuǎn)運(yùn)，本試驗(yàn)中SPE-A 組的膽固醇和三酰甘油含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，且高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的含量和比值也均處于正常范圍內(nèi)，表明飼料中添加馬尾藻對(duì)魚體脂質(zhì)代謝活動(dòng)沒有產(chǎn)生不利影響。

相關(guān)研究表明海藻粉在消化酶活性、抵抗病菌和抗氧化活性等方面也具有重要作用[10，20-21]。胃和腸道作為魚類消化吸收的重要場(chǎng)所，其中消化酶活性反映了魚體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收利用的有效程度。有研究發(fā)現(xiàn)海藻酶解物的多糖組分可以提高消化酶活性，增強(qiáng)魚體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收[22-23]，本試驗(yàn)中馬尾藻顯著提高了胃組織中脂肪酶和淀粉酶的活性，對(duì)腸道組織中的淀粉酶活性影響相對(duì)較小，與上述研究表現(xiàn)基本一致。此外，馬尾藻主要成分是膳食纖維，具有促進(jìn)腸道蠕動(dòng)的作用，但是加快腸道轉(zhuǎn)運(yùn)的同時(shí)也會(huì)減少食物在腸道的停留時(shí)間，黃顙魚作為偏肉食性的魚類，腸道較短，這可能會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不完全吸收，從而降低了其生長(zhǎng)性能，而SPE-B 組作為濾膜截留物質(zhì)，膳食纖維含量較高，這可能是導(dǎo)致其生長(zhǎng)性能下降的一個(gè)重要原因。

機(jī)體通過(guò)酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)活動(dòng)產(chǎn)生氧自由基，其攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，其最終氧化產(chǎn)物為丙二醛，丙二醛含量反映了機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接反映著細(xì)胞組織的損傷程度，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，SP組、SPE-A組和SPE-B組與FM對(duì)照組相比丙二醛含量顯著降低，證明日糧中添加馬尾藻可以有效減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，降低自由基對(duì)細(xì)胞的毒害作用。Sotoudeh等[24]對(duì)虹鱒（Oncorhynchus mykiss）的研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加江蘺（0～90 g/kg）后，魚體抗氧化狀態(tài)發(fā)生明顯變化，血清中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性和脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物含量顯著降低，但不對(duì)魚體生長(zhǎng)性能造成影響，與本試驗(yàn)結(jié)果相符。Wu 等[25]在棕櫚酸誘導(dǎo)的肝脂肪模型中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)馬尾藻多糖濃度在50 μg/mL以上時(shí)，肝細(xì)胞L02增殖活性明顯增加，凋亡率明顯降低。MDA含量逐漸降低，超氧化物歧化酶（SOD）水平逐漸升高，說(shuō)明馬尾藻多糖可減輕棕櫚酸誘導(dǎo)的肝細(xì)胞氧化損傷，其保護(hù)作用在一定范圍內(nèi)呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，證明褐藻糖膠對(duì)氧化應(yīng)激有著較強(qiáng)的保護(hù)作用，本試驗(yàn)MDA 水平隨著飼料中馬尾藻的添加呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)，推測(cè)可能與馬尾藻中多種抗氧化物質(zhì)（巖藻糖膠、不同硫酸鹽含量的褐藻糖膠等）有關(guān)，對(duì)羥基自由基的清除活性與金屬離子的螯合作用有關(guān)[26]，其使得機(jī)體內(nèi)氧自由基含量處于較低水平，或是減輕了自由基對(duì)組織細(xì)胞的氧化毒害作用，使得體內(nèi)抗氧化酶處于較低的水平。

在魚體常規(guī)組成方面，日糧中添加馬尾藻粉、馬尾藻提取物和馬尾藻渣3種原料后，相比FM對(duì)照組，SP組、SPE-A組和SPE-B組的全魚粗蛋白和粗灰分含量上升。在Sotoudeh 等[27]研究中，虹鱒攝食添加褐藻的飼料后魚體蛋白含量上升，與本試驗(yàn)結(jié)果一致，試驗(yàn)組的粗脂肪含量降低，但有研究證明飼料添加藻類提高了n-3不飽和脂肪酸的含量[28]。SP組和SPE-A組的肝臟粗脂肪含量降低，并且SP組、SPE-A組和SPEB組的肝體比指數(shù)也顯著升高，因此日糧中添加馬尾藻在不影響生長(zhǎng)狀況的情況下可以增加魚體粗蛋白含量，并降低了魚體脂肪含量，改善了黃顙魚肌肉品質(zhì)。此外，肝臟中脂肪含量的下降，避免了肝臟組織中脂肪堆積過(guò)多，保證魚體生長(zhǎng)健康。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在日糧中添加1%馬尾藻粉和0.5%馬尾藻提取物可以有效促進(jìn)黃顙魚的生長(zhǎng)性能，降低飼料系數(shù)，并且降低魚體脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，改善腸胃組織消化酶活性，促進(jìn)養(yǎng)殖魚類綠色健康生長(zhǎng)。