秦昆鵬 楊 濤 王永芳 趙玉蓉

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128)

近年來(lái)，有關(guān)短鏈脂肪酸在動(dòng)物生產(chǎn)中的研究日漸增多。短鏈脂肪酸在機(jī)體內(nèi)主要來(lái)源于結(jié)腸內(nèi)的微生物發(fā)酵，研究發(fā)現(xiàn)其不僅能作為能量底物為機(jī)體供能，而且還對(duì)機(jī)體脂肪代謝、糖代謝、免疫等生理活動(dòng)具有重要調(diào)節(jié)作用[1-4]。乙酸是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)最主要的短鏈脂肪酸之一，占體循環(huán)內(nèi)短鏈脂肪酸含量的60%，并且以游離酸(CH3COO-)的形式存在[5]。有研究報(bào)道，乙酸除了能作為能量底物和碳源參與機(jī)體內(nèi)代謝活動(dòng)外，還對(duì)機(jī)體食欲調(diào)節(jié)、脂肪代謝和胰島素抵抗等具有重要影響[6-8]，并且乙酸及其鹽類在含有相同CH3COO-含量時(shí)其生物學(xué)效價(jià)一致[9]。由過(guò)往研究推測(cè)，乙酸及其鹽類對(duì)機(jī)體食欲調(diào)節(jié)和脂肪代謝的影響可能會(huì)對(duì)肉雞生長(zhǎng)代謝產(chǎn)生影響。因此，本試驗(yàn)旨在探究飼糧中添加不同水平乙酸鈉對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能、屠宰性能、肉品質(zhì)和血清生化指標(biāo)的影響，以期獲得飼糧中添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞的作用效果，同時(shí)也為乙酸及其鹽類在肉雞飼糧中的合理應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

食品級(jí)乙酸鈉(99%)，由深圳某生物科技有限公司提供。羅斯308白羽肉雞購(gòu)自湖南某實(shí)業(yè)有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用1日齡羅斯308肉仔雞，預(yù)飼7 d(飼喂基礎(chǔ)飼糧)后選擇體重相近和精神狀態(tài)良好的肉雞288只進(jìn)行隨機(jī)分組，根據(jù)飼糧不同分為6個(gè)組，分別飼喂乙酸鈉添加水平為0(對(duì)照組，基礎(chǔ)飼糧)、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%和0.5%的飼糧，每組6個(gè)重復(fù)(籠)，每個(gè)重復(fù)8只雞。試驗(yàn)期為35 d。根據(jù)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

動(dòng)物試驗(yàn)在湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)耘園基地進(jìn)行。采用3層籠養(yǎng)方式飼養(yǎng)，在飼養(yǎng)試驗(yàn)前對(duì)雞舍和籠具進(jìn)行清洗消毒，然后用福爾馬林和高錳酸鉀進(jìn)行熏蒸、通風(fēng)。入雛前將圈舍升溫至32～35 ℃，此后溫度每周降低2～3 ℃，直至保持在20～22 ℃；雞舍相對(duì)濕度保持在50%～60%(預(yù)飼前3 d在65%以上)。日常管理參照《商品肉雞生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》(GB/T 19664—2005)，先飲水后開(kāi)食，自由采食和飲水。飼養(yǎng)過(guò)程中，注意監(jiān)測(cè)環(huán)境空氣質(zhì)量，注意通風(fēng)換氣，保持良好的雞舍環(huán)境；每天打掃雞舍清潔衛(wèi)生，并定期用專用消毒劑對(duì)雞舍進(jìn)行噴霧消毒。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)期間觀察試驗(yàn)雞健康情況，并記錄死淘率，分別在肉雞7和42日齡空腹稱重，并準(zhǔn)確計(jì)量試驗(yàn)階段采食量，計(jì)量試驗(yàn)期肉雞平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 屠宰性能及肉品質(zhì)

于42日齡，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)挑選1羽白羽肉雞，屠宰后進(jìn)行屠宰性能測(cè)定，測(cè)定方法參照NY/T 823—2004。分別取左右兩側(cè)胸肌和腿肌用于測(cè)定pH、肉色、滴水損失和系水力。pH采用MC Testo 205 pH測(cè)定儀測(cè)定，分別取屠宰后45 min和24 h的胸肌、腿肌3個(gè)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)定，取平均值為屠宰45 min后pH(pH45 min)和屠宰24 h后pH(pH24 h)；肉色用NR20XE肉色儀進(jìn)行測(cè)定；取5 g左右肌肉置于滴水損失測(cè)定管中，于4 ℃保存，分別于24 和48 h稱重，計(jì)算24和48 h肌肉滴水損失；肌肉系水力則用肉品系水力測(cè)定儀MJ-1000進(jìn)行測(cè)定。

1.4.3 血清生化指標(biāo)

于42日齡，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)挑選1羽白羽肉雞，頸靜脈采血，4 000 r/min離心分離血清，-20 ℃保存待測(cè)。采用酶標(biāo)儀測(cè)定血清中甘油三酯(TG)(單試劑GPO-PAP法)、總膽固醇(TC)(單試劑GPO-PAP法)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)(雙試劑直接法)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)(雙試劑直接法)和葡萄糖(GLU)(己糖激酶法)含量以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)(賴氏法)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)(賴氏法)活性。試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用LSD法進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對(duì)白羽肉雞ADG、ADFI和F/G均無(wú)顯著影響(P>0.05)，各乙酸鈉添加組白羽肉雞生長(zhǎng)性能之間也均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表2 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞屠宰性能和肉品質(zhì)的影響

2.2.1 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞屠宰性能的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對(duì)白羽肉雞屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均無(wú)顯著影響(P>0.05)，各乙酸鈉添加組白羽肉雞屠宰性能之間也均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.2.2 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞肉品質(zhì)的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對(duì)白羽肉雞胸肌亮度(L*)和黃度(b*)值、pH24 h以及24和48 h滴水損失均無(wú)顯著影響(P>0.05)，但飼糧添加0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉可以顯著降低胸肌pH45 min(P<0.05)，0.1%和0.3%乙酸鈉添加組胸肌pH45 min與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)；與對(duì)照組相比，飼糧添加0.1%、0.2%、0.3%和0.5%乙酸鈉顯著提高胸肌紅度(a*)值(P<0.05)，飼糧添加0.3%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著提高胸肌系水力(P>0.05)，而飼糧添加0.1%和0.2%乙酸鈉對(duì)胸肌系水力無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表3 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞屠宰性能的影響

表4 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞胸肌肉品質(zhì)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對(duì)白羽肉雞腿肌pH45 min、pH24 h、亮度、紅度和黃度值以及24和48 h滴水損失均無(wú)顯著影響(P>0.05)；飼糧添加0.3%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著提高腿肌系水力(P<0.05)，飼糧添加0.1%和0.2%乙酸鈉對(duì)腿肌系水力無(wú)顯著影響(P<0.05)。

2.3 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表6可知，飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞血清TG、TC、LDL-C、HDL-C含量以及ALT活性存在顯著影響(P<0.05)。與對(duì)照組相比，0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清TG含量顯著提高(P<0.05)，其中0.4%乙酸鈉添加組血清TG含量最高，且顯著高于0.1%、0.2%和0.3%乙酸鈉添加組(P<0.05)，0.5%乙酸鈉添加組血清TG含量顯著高于0.1%乙酸鈉添加組(P<0.05)。與對(duì)照組相比，0.1%、0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清TC含量顯著提高(P<0.05)，0.2%和0.5%乙酸鈉添加組血清TC含量顯著高于其他組。與對(duì)照組相比，各乙酸鈉添加組血清LDL-C含量顯著提高(P<0.05)，其中0.2%和0.5%乙酸鈉添加組血清LDL-C含量顯著高于其他各組(P<0.05)，0.4%乙酸鈉添加組血清LDL-C含量顯著高于0.1%乙酸鈉添加組(P<0.05)。0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清HDL-C含量顯著高于對(duì)照組、0.1%和0.3%乙酸鈉添加組(P<0.05)，而0.1%和0.3%乙酸鈉添加組血清HDL-C含量與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)，0.3%乙酸鈉添加組血清HDL-C含量顯著高于0.1%乙酸鈉添加組(P<0.05)。與對(duì)照組相比，0.4%和0.5%乙酸鈉添加組血清ALT活性顯著提高(P<0.05)，0.1%、0.2%和0.3%乙酸鈉添加組血清ALT活性無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，飼糧添加不同水平乙酸鈉對(duì)白羽肉雞血清GLU含量和AST活性無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表5 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞腿肌肉品質(zhì)的影響

表6 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和采食量緊密相關(guān)，采食量的多少直接決定了養(yǎng)分?jǐn)z入量，進(jìn)而影響動(dòng)物生長(zhǎng)性能。目前有不少關(guān)于乙酸對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能和攝食影響的報(bào)道。Canibe等[10]報(bào)道，飼喂含不同乙酸含量的液體發(fā)酵飼料對(duì)仔豬的生長(zhǎng)性能并無(wú)顯著影響；張治國(guó)[11]報(bào)道，飼糧添加0.1%～0.4%乙酸對(duì)小鼠和大鼠的ADFI無(wú)顯著差異；楊春雷等[12]報(bào)道，用醋酸酸化飼糧分別至pH為3.0、4.0和5.0后飼喂斷奶仔豬，可以顯著提高仔豬ADG和健康狀況。但也有報(bào)道乙酸鹽對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物采食量及ADG具有負(fù)面影響。武楓林等[13]報(bào)道，水牛正常條件下飼喂24 h后頸靜脈分別灌注500 mL的1和2 mol/L乙酸鈉，發(fā)現(xiàn)低水平乙酸鈉在0～3 h和12～24 h階段對(duì)水牛采食量有顯著抑制作用，高水平乙酸鈉則全天對(duì)水牛采食量有顯著抑制作用。王云云等[14]報(bào)道，分別給昆明小鼠每天腹腔注射0.3和0.5 kg/L的乙酸鈉，在4周內(nèi)，小鼠的采食量、飼料轉(zhuǎn)化率、增重率和絨毛發(fā)育程度被顯著抑制，并且上調(diào)了厭食激素[膽囊收縮素(CCK)、瘦素(LEP)和酪酪肽(PYY)]和攝食調(diào)控因子[Janus激酶2/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3(JAK2/STAT3)] mRNA的表達(dá)。Frost等[15]報(bào)道，靜脈和回腸輸注醋酸鹽(500 mg/kg BW)都可以抑制C57BL/6小鼠的食欲，降低小鼠采食量。Cuche等[16]給雌性大白豬回腸持續(xù)輸注1 h(2.4 mL/min)含60%乙酸的復(fù)合短鏈脂肪酸(pH 6.8,0.5 mmol/L)可以顯著提高血漿中厭食激素PYY的含量，并且抑制胃排空，在輸注完成后的15 min后血漿中PYY含量回歸基礎(chǔ)水平。本試驗(yàn)的結(jié)果與Canibe等[10]和張治國(guó)[11]的報(bào)道一致，飼糧添加0.1%～0.5%乙酸鈉對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。關(guān)于乙酸鈉對(duì)于試驗(yàn)動(dòng)物采食量和ADG影響的研究結(jié)果存在差異，但也可以發(fā)現(xiàn)規(guī)律，在飼糧中添加適量的乙酸鈉對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響或促進(jìn)，而對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物靜脈輸注或回腸輸注乙酸鈉則可以顯著降低采食量及ADG。這可能與乙酸鈉半衰期較短以及通過(guò)攝食攝入的乙酸可以被小腸上皮細(xì)胞迅速吸收代謝或經(jīng)門靜脈進(jìn)入肝臟內(nèi)代謝，最后才進(jìn)入血液，血液中的乙酸含量不足以對(duì)動(dòng)物采食造成影響有關(guān)。對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物直接靜脈或回腸輸注乙酸鈉可以短時(shí)間內(nèi)使動(dòng)物血漿內(nèi)乙酸含量升高，乙酸可以通過(guò)血腦屏障，在下丘腦神經(jīng)元內(nèi)轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A。該過(guò)程會(huì)釋放大量一磷酸腺苷(AMP)進(jìn)而使腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化，AMPK磷酸化進(jìn)而磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(ACC)，導(dǎo)致丙二酰輔酶A水平降低，下丘腦丙二酰輔酶A水平的降低與抑食因子POMC19表達(dá)的提高以及促食神經(jīng)肽Y(NPY)和刺豚鼠相關(guān)蛋白(AgRP)表達(dá)抑制有關(guān)[15]。

3.2 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞屠宰性能和肉品質(zhì)的影響

肉雞養(yǎng)殖的生產(chǎn)效益與肉雞的屠宰性能和肉品質(zhì)有直接關(guān)系，如何改善肉雞的屠宰性能和肉品質(zhì)日益受到關(guān)注。通過(guò)在飼糧中添加功能活性成分或新型飼料原料等營(yíng)養(yǎng)調(diào)控手段來(lái)提高肉雞胴體品質(zhì)是常見(jiàn)的措施。本試驗(yàn)在了解了乙酸生物學(xué)功能之后，推測(cè)乙酸可能對(duì)肉雞脂肪代謝產(chǎn)生影響，進(jìn)而對(duì)肉雞屠宰性能和肉品質(zhì)產(chǎn)生影響。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞屠宰性能并無(wú)顯著影響，但對(duì)白羽肉雞的肉品質(zhì)有顯著影響。即飼糧添加0.2%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著降低胸肌pH45 min；飼糧添加0.3%、0.4%和0.5%乙酸鈉顯著提高胸肌和腿肌系水力；飼糧添加0.1%、0.2%、0.3%和0.5%乙酸鈉顯著提升胸肌紅度值?；铙w禽肉一般為中性偏堿的狀態(tài)，屠宰后由于肌肉中肌糖原的無(wú)氧酵解生成乳酸，使pH迅速降低[17]。飼糧添加乙酸鈉使白羽肉雞肌肉pH下降的可能原因是乙酸進(jìn)入體內(nèi)會(huì)轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A，乙酰輔酶A既可以作為底物直接參與三羧酸循環(huán)供能，減少肌糖原的消耗，也可以作為糖異生的底物生成GLU，使肌糖原增加。還有研究指出，營(yíng)養(yǎng)干預(yù)會(huì)影響肌肉肌纖維的組成，肌肉肉品質(zhì)和肌纖維的組成密切相關(guān)。Lebedová等[18]報(bào)道，限飼顯著提高育肥豬肌肉ⅡB型肌纖維比例，顯著降低Ⅰ型肌纖維比例。ⅡB型肌纖維直徑大，占比越高肌纖維橫截面積越大，系水力越低，肉質(zhì)越差，而Ⅰ型肌纖維占比越高則紅度越好，系水力越高[19]。也有報(bào)道指出，肌肉橫截面積變大和肌糖原的減少相關(guān)[20]，故飼糧添加乙酸使白羽肉雞肌肉紅度質(zhì)提高、系水力增強(qiáng)的一個(gè)可能原因是充足的營(yíng)養(yǎng)供給對(duì)肉雞肌肉的肌纖維組成產(chǎn)生了積極影響，提高了Ⅰ型肌纖維比例，降低了ⅡB型肌纖維比例，肌纖維橫截面積變小，從而使肌肉紅度值變高，系水力變強(qiáng)。

3.3 飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

短鏈脂肪酸對(duì)動(dòng)物的生理活動(dòng)具有重要影響，在維持機(jī)體能量平衡及代謝穩(wěn)態(tài)、機(jī)體免疫調(diào)節(jié)以及脂肪代謝等方面具有重要作用。有研究指出，乙酸對(duì)動(dòng)物脂肪代謝具有重要調(diào)控作用[21]。Jocken等[22]報(bào)道，1 μmol/L乙酸鹽處理人多能脂肪源干細(xì)胞(hMADS)導(dǎo)致絲氨酸650位點(diǎn)磷酸化的激素敏感性脂肪酶(HSL)相對(duì)量減少，從而抑制了細(xì)胞脂解作用。Hong等[23]報(bào)道，乙酸鹽處理小鼠前脂肪細(xì)胞系(3T3-L1)可以激活G蛋白偶聯(lián)受體43(GPR43)，使氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)的表達(dá)量提高，從而促進(jìn)脂肪細(xì)胞的分化，同時(shí)還抑制異丙腎上腺素誘導(dǎo)的脂解作用。本試驗(yàn)探究了飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞血清中脂肪代謝相關(guān)生化指標(biāo)的影響，結(jié)果表明乙酸鈉的添加使白羽肉雞血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C的含量上升。血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C的含量與機(jī)體脂肪代謝密切相關(guān)，脂肪攝入過(guò)高和機(jī)體脂肪沉積過(guò)多都有可能導(dǎo)致其含量升高[24]。乙酸鈉的添加可能抑制了白羽肉雞體內(nèi)HSL誘導(dǎo)的或異丙腎上腺素誘導(dǎo)的脂解作用，并促進(jìn)了脂肪細(xì)胞的分化，從而使肉雞肝臟和機(jī)體脂肪沉積增加，進(jìn)而影響了血清生化指標(biāo)。另外，乙酸進(jìn)入體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A，可以作為脂肪合成的原料[25]，在肉雞肝臟內(nèi)可以直接參與脂肪的從頭合成及膽固醇的從頭合成，從而促進(jìn)體脂沉積。乙酸還可以抑制肝X受體(LXR)的表達(dá)[21]，而LXR可以促進(jìn)肝臟對(duì)HDL-C的吸收[26]，即飼糧添加適宜水平的乙酸鈉可能通過(guò)抑制LXR表達(dá)，導(dǎo)致肝臟對(duì)HDL-C的吸收減少，從而使血清中HDL-C含量升高[26]。

在乙酸與胰島素抵抗的研究上表明，乙酸可以緩解胰島素抵抗。Kimura等[27]報(bào)道，乙酸可以改善小鼠肌肉及肝臟組織胰島素敏感性，促進(jìn)小鼠糖酵解及能量消耗相關(guān)基因的表達(dá)，增強(qiáng)小鼠對(duì)GLU的吸收利用。Mitrou等[28]報(bào)道，攝入乙酸可以改善GLU耐受量，降低患者骨骼肌胰島素敏感性，增強(qiáng)骨骼肌對(duì)GLU的吸收和利用，降低血液中胰島素含量。本研究中，飼糧添加乙酸鈉并未顯著影響白羽肉雞血清GLU含量，即乙酸鈉對(duì)正常白羽肉雞血糖調(diào)節(jié)能力無(wú)顯著影響。

ALT和AST是肝功能檢測(cè)最常見(jiàn)的指標(biāo)。ALT主要分布在肝細(xì)胞內(nèi)，AST在肝細(xì)胞、心臟細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞均有分布，如果肝臟受損或損壞，肝細(xì)胞中的轉(zhuǎn)氨酶便進(jìn)入血液，血液中ALT和AST活性升高，提示肝臟疾病信號(hào)[29]。本試驗(yàn)中，飼糧添加0.4%和0.5%乙酸鈉使白羽肉雞血清中ALT活性顯著上升，這說(shuō)明飼糧添加0.4%和0.5%乙酸鈉使肝臟受到了一定程度的損傷。

4 結(jié) 論

綜上所述，飼糧添加乙酸鈉對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能和屠宰性能無(wú)顯著影響，添加適宜水平的乙酸鈉可以一定程度改善肉質(zhì)，但過(guò)量添加可能會(huì)使血脂升高、肝臟受損。其中，飼糧添加0.3%乙酸鈉改善了白羽肉雞肌肉紅度值和系水力，但對(duì)血清TG、TC和HDL-C含量無(wú)顯著影響，并且未導(dǎo)致肝損傷，是較為適宜的添加水平。